徐振晔治疗肺癌骨转移经验

近年来肺癌的发病率和病死率上升，大多数肺癌患者死于无法控制的远处转移，骨组织是恶性肿瘤远处转移的第三好发部位。上海中医药大学徐振哗教授致力于中医肿瘤临床研究30载，治疗肺癌骨转移取得良好疗效，现探析如下。     

肺岩宁方对肿瘤坏死因子α诱导的人肺癌细胞系核转录因子κB基因表达的影响

目的：探讨中药肺岩宁方含药血清对肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor—α,TNF—α）诱导的人肺癌细胞系A549核转录因子KB（nuclearfactor—κB,NF—κB）基因表达的影响。方法：制备肺岩宁方含药血清,以肺癌细胞系A549为靶细胞,确定肺岩宁方含药血清用药浓度。将A549细胞分为对照血清组、TNFα组、肺岩宁方含药血清组和综合治疗组。观察用药前后A549细胞大体形态变化;四唑单钠盐法测定肺岩宁方含药血清对细胞增殖的影响;蛋白印迹法检测肺岩宁方含药血清对TNF-α诱导的细胞核NF-κ及抑制性核转录因子（inhibitorxBa,IκBα）表达的影响;将人NF-κB重组质粒用脂质体转染法导入A549细胞24h后,用肺岩宁方含药血清治疗24h,采用双荧光素酶报告基因系统测定肺岩宁方含药血清对TNF—α诱导的细胞核NF-κBp65转录活性的影响。结果：与对照血清比较．15％和20％肺岩宁方含药血清对A549细胞具有明显的增殖抑制作用（P〈0．05,P〈0.01）。1μg／L TNF—α能够明显提高NF—κB基因的表达,与肺岩宁方含药血清共同作用后,能够显著抑制它的表达（P〈0．01）,而细胞内IκBα的表达差异无统计学意义（P〈0．05）;肺岩宁方含药血清能够显著降低A549细胞经NF—κB重组质粒转染后的转录活性（P〈0．01）。结论：肺岩宁方含药血清可抑制人肺癌细胞系增殖,可能是通过对TNF-α诱导的NF-κB基因活性的抑制作用实现的。。     

人参皂苷Rg3含量的变化

目的:建立经真菌转化前后三七中人参皂苷Rg3的含量测定方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Phenomex C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱;柱温30℃,检测波长为203nm,流速1.0mL/min,进样量为20μL。结果:人参皂苷Rg3的回归方程:Y=35672013X-2413,r=0.99992,在0.0019～0.2488 mg/mL范围内有良好的线性关系,平均回收率为99.56%,RSD=1.48%(n=8)。结论:该方法简便、快捷、准确、重复性好,可用于三七发酵产物中人参皂苷Rg3的含量测定。     

肺积方对IDO诱导Lewis肺癌小鼠模型免疫逃逸的影响

目的研究肺积方对吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)诱导Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma,LL/2)小鼠模型免疫逃逸的影响。方法采用C57BL/6小鼠建立LL/2-增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)-IDO模型48只,将小鼠按随机数字表分为模型组(灌胃生理盐水)、中药组[灌胃肺积方水煎液100mg/(g·d)]、1-甲基-D-色氨酸(1-methyl-D-tryptophan,1-MT)治疗组[灌胃1-MT混合液100mg/(kg·d)]和紫杉醇组[腹腔注射紫杉醇15mg/(kg·d)],每组12只。造模后第2日开始干预,其中24只观察小鼠生存期,余24只在造模并干预28日后采用流式细胞术检测脾脏CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)比例。结果与模型组比较,中药组、1-MT组生存期延长(P0.01),中药组、1-MT组、紫杉醇组Treg比例降低(P0.01)。与紫杉醇组比较,中药组、1-MT组生存期延长(P0.01),1-MT组Treg比例降低(P0.05)。结论肺积方能抑制肺癌细胞的增殖,抑制免疫逃逸,改善免疫功能,延长荷瘤小鼠生存期。     

试论中医阴阳平衡法治疗恶性肿瘤

阴阳失衡,机体内环境稳态的破坏是恶性肿瘤发生、进展的重要原因;调整阴阳的动态平衡是中医治疗肿瘤的重要法则。     

肺岩宁对Lewis肺癌荷瘤小鼠瘤组织中核小体构象调控因子H3-K56、Rtt109、Asf1及E2F1表达的影响

目的:恶性肿瘤细胞具有异常的细胞周期.前期体内实验证实肺岩宁具有干预细胞周期G1/S检测点信号通路的作用,本研究进一步探讨肺岩宁对S期核小体构象调控因子表达的影响.方法:将60只小鼠随机分成正常组、模型组、顺铂组和肺岩宁组,每组15只.右腋部皮下注射Lewis细胞构建C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤模型.观察各组小鼠的瘤质量和抑瘤率,采用流式细胞术检测细胞周期时相分布和增殖指数,实时聚合酶链反应法及蛋白质印迹法检测各组小鼠肺癌移植瘤细胞的核小体构象调控因子H3-K56、Ty1转座基因调节因子109(regulator of Ty1 transposition 109,Rtt109)、细胞反沉默功能因子1(antisilencing function 1,Asf1)、腺病毒E2启动子结合转录因子1(E2F1)mRNA和蛋白的表达.结果:肺岩宁组和顺铂组的瘤质量显著低于模型组(P＜0.01),抑瘤率分别为27.92％和42.50％.肺岩宁组癌细胞的增殖指数明显低于模型组和顺铂组,S期分布比例最少(P＜0.01).肺岩宁组H3-K56、Rtt109、Asf1、E2F1 mRNA和蛋白的表达较模型组显著下调(P＜0.05).结论:肺岩宁可能是通过影响核小体构象调控因子的表达干预异常细胞周期来发挥抗肺癌细胞生长增殖作用.     

HPLC法测定三七发酵产物中人参皂苷Rg3含量的变化

目的：建立经真菌转化前后三七中人参皂苷R昏的含量测定方法。方法：采用HPLC法,色谱柱为PhenomexC18（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为乙腈一水,梯度洗脱;柱温30％,检测波长为203nm,流速1．0mL／min,进样量为20μL。结果：人参皂苷Rg3的回归方程：Y=35672013X～2413,r=0．99992,在0．0019～0．2488mg／mL范围内有良好的线性关系,平均回收率为99．56％,RSD=1．48％（n=8）。结论：该方法简便、快捷、准确、重复性好,可用于三七发酵产物中人参皂苷Rg3的含量测定。     

转录因子Foxp3与肺癌

Foxp3是Fox转录因子家族中的一员,特异性表达于CD4+ CD25+ Treg细胞,并介导CD4+CD25+ Treg细胞的发育及其功能维持.随着分子生物学技术的进步,对Foxp3基因结构和功能的认识越来越明确,其对肺癌的发生发展、临床治疗和预后具有重要意义.明确Foxp3基因表达调控机制有利于阐明肺癌的免疫环境,...     

顺铂诱导肺癌A549细胞保护性自噬及肺岩宁对自噬蛋白Atg5、Atg7的影响

目的观察顺铂作用肺癌A549细胞后自噬的发生,及肺岩宁对自噬相关蛋白Atg5、Atg7的影响。方法顺铂和肺岩宁处理肺癌A549细胞,CCK-8筛选顺铂和肺岩宁的优化给药浓度,CCK-8检测各组A549细胞增殖能力,Western blot检测各组自噬蛋白表达。结果与单药顺铂相比,3 mg/L的顺铂联合20 mmol/L的自噬抑制剂氯喹明显提高了A549细胞增殖的抑制率(P0.05)。同时,顺铂导致了微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3Ⅱ)蛋白表达增加(P0.01)。肺岩宁干预A549细胞后,自噬蛋白Atg5蛋白表达低于模型组和顺铂组(P0.05),Atg7蛋白表达显著低于模型组和顺铂组(P0.01)。结论顺铂诱导了A549细胞产生保护性自噬,肺岩宁可能通过抑制肺癌细胞自噬来发挥抗肺癌细胞增殖作用。     

肺岩宁冲剂抗肺癌机制的初步探讨

目的 研究肺岩宁冲剂治疗后裸鼠人肺癌细胞移植瘤组织的差异蛋白表达谱,初步探讨肺岩宁冲剂抗肺癌的分子机制。方法 将人肺癌细胞H460经皮下移植的荷瘤裸鼠16只随机分为两组,空白对照组（8只）：灌服0.9%氯化钠溶液0.4 ml×14天;肺岩宁冲剂组（8只）：灌胃肺岩宁冲剂药液0.4 ml（含生药0.6 g）×14天。两组灌胃后第15天取移植瘤组织,提取细胞总蛋白,通过双向电泳分离、质谱分析和数据库检索鉴定蛋白表达谱的变化。结果 蛋白质组学分析结果显示,空白对照组裸鼠肿瘤组织细胞的蛋白组学有918个蛋白质点,肺岩宁冲剂组有970个蛋白质点,与空白对照组比较,有18个差异蛋白质点,其中表达上调的有9个,表达下调的有9个;按照功能可分为细胞周期相关蛋白、代谢相关蛋白、细胞信号转导分子、转录调控因子等。结论 肺岩宁冲剂可导致肿瘤组织蛋白质表达变化。