补肾壮筋汤联合盐酸氨基葡萄糖对大鼠膝软骨细胞增殖及凋亡影响的研究

目的研究中药经方补肾壮筋汤联合西药盐酸氨基葡萄糖,制备相应浓度的含药血清,作用于大鼠膝软骨细胞,为膝骨性关节炎的治疗提供新的理论依据及方法。方法将SPF级大鼠(32只)随机分为4组,分别以生理盐水、补肾壮筋汤、盐酸氨基葡萄糖、补肾壮筋汤联合盐酸氨基葡萄糖,对大鼠进行药物灌胃1周,制备相应浓度的含药血清作用于离体培养的大鼠膝软骨细胞,通过MTT法检测不同浓度(0. 6%、1. 2%、2. 4%)含药血清对软骨细胞增殖活力、流式细胞分析仪检测细胞凋亡率、Western blot检测软骨细胞中II型胶原蛋白的表达情况。结果 MTT法检测示,对大鼠膝软骨细胞的促进增殖作用中,中西医结合组优于其他各组,差异具有统计学意义(P0. 01);流式细胞仪检测细胞凋亡率示,中西结合血清组能够明显降低软骨细胞凋亡率,与其他各组比较差异具有统计学意义(P0. 01); Western blot示,中西医结合血清组促进软骨细胞中II型胶原蛋白表达明显高于其他各组,差异具有统计学意义(P0. 01)。结论中西医药物联合应用对大鼠膝软骨细胞增殖作用明显高于中药组及西药组,并能够促进软骨细胞中II型胶原蛋白的表达,降低大鼠膝软骨细胞凋亡的发生,从而起到骨性关节炎的治疗作用。     

成肌细胞原代培养及临床应用前景

成肌细胞(Myoblast)是肌组织中静止的单核细胞,肌纤维肌膜与基底膜之间,是肌细胞的前体细胞,在肌肉损伤修复过程中发挥重要作用。随着分子及细胞生物学的发展成肌细胞的特性逐渐被人们认识,如取材方便、来源广泛、体外增殖分化能力强、能与受体肌细胞融合并共享基因产物、移植后不会无限增殖或形成肿瘤、自体成肌细胞移植没有伦理争议等,因而成肌细胞被视为优良的种子细胞被应用于多种系统相关疾病的研究和治疗中。文章针对成肌细胞的原代分离、纯化、影响其增殖及分化因素、成肌细胞的临床应用前景等方面作以概述。     

1例肩峰撞击综合症合并Buford复合体病例报道

Buford复合体作为肩关节一种罕见的解剖变异,一直以来较少引起人们的关注,国内外也少有文献对其进行报道,但是随着肩关节镜技术的发展,人们逐渐认识到这是一种容易引起误诊和漏诊的解剖变异,如果采取错误的治疗方法,将严重影响患者的肩关节功能。本文对1例肩峰撞击综合症合并Buford复合体,但术前疑似盂唇损伤的病例进行报道。     

CNTF 联合RA 诱导成肌细胞类神经分化及与REST 的相关性

目的 探讨睫状神经营养因子（CNTF）联合视黄酸（RA）诱导成肌细胞类神经分化的方法以 及该诱导过程与神经元限制性沉默因子（REST）相关性。方法 以CNTF 诱导C2C12 去分化,再以RA 诱导 C2C12 类神经分化。通过细胞形态学、细胞免疫荧光、流式细胞术、Western blot 等技术对去分化及类神经 分化的细胞进行鉴定及相关分析,比较细胞类神经分化前后REST 表达变化。结果 诱导后细胞聚集生长,呈 典型的神经球样。细胞免疫荧光染色显示神经球能够被神经特异性标志物NSE、Sox1、GFAP 标记,神经球 离散为单个细胞接种后生长状态良好,神经干细胞标志物（nestin）呈阳性表达。Western blot 结果显示CNTF 去分化诱导后成肌细胞分化相关蛋白Myogenin、P21 表达降低,类神经分化后NSE、Sox1、GFAP 表达增多, 且成肌细胞特异性标志物Desmin 及REST 表达下降。流式细胞仪分析表面标志物NSE 显示诱导组与对照组 比较细胞有差异,且诱导组特异性阳性细胞率达84% 左右。结论 CNTF 联合RA 可诱导成肌细胞类神经分化, 且该诱导过程可能与REST 表达降低相关。     

小分子化合物诱导骨髓间充质干细胞类神经分化的实验研究*

目的 探讨小分子化合物组合（Forskolin、SB431542、DMH1、CHIR99021）诱导骨髓间充质干细胞（BMSCs）类神经分化的可行性。方法 全骨髓贴壁法分离大鼠BMSCs,流式细胞仪鉴定细胞。培养细胞至第3代,以含有Forskolin的神经元培养基预诱导1?d,再以含有Forskolin、SB431542、DMH1、CHIR99021的神经元培养基正式诱导3?d。以神经元培养基为对照组。通过观察细胞形态、免疫荧光检测、Western blotting技术对类神经分化细胞进行鉴定。结果 大鼠BMSCs以梭形细胞为主,可见长短不一的突起;经流式细胞仪鉴定,CD90、CD105表达呈阳性,而CD34和CD45表达呈阴性。诱导后,细胞有神经样形态改变,免疫荧光检测到神经元特异性烯醇化酶（NSE）、巢蛋白（Nestin）阳性表达,诱导3?d后Western blotting显示实验诱导组与对照组比较,NSE、Nestin和SOX1表达增多（P?<0.05）。结论 小分子化合物组合（Forskolin、SB431542、DMH1、CHIR99021）可诱导BMSCs类神经分化。