蓖麻毒素B链的克隆表达与鉴定

采用PCR法扩增出蓖麻毒素B链基因,并将其与PMD18-T克隆载体相连接,经序列分析正确后插入到表达载体PET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-RTB,将构建好的重组质粒转化入BL21感受态中,经IPTG于37℃诱导表达后,得到的融合表达的目的蛋白质经SDS-PAGE分析,相对分子质量约为31 000,利用Western与间接ELISA鉴定证明,其具有抗原性,为制备RTB单克隆抗体及提高检测方法的敏感性打下基础.     

分散固相萃取-气相色谱法测定薰衣草中4个特征成分含量

目的:建立基于气相色谱同时测定薰衣草中樟脑、芳樟醇、乙酸芳樟酯和乙酸薰衣草酯4个特征成分含量的分析方法。方法:样品经丙酮提取,PSA+C₁₈+GCB混合型分散固相萃取剂净化后,气相色谱-氢火焰离子化检测器进行检测。色谱条件为：使用(5%-苯基)-甲基聚硅氧烷毛细管(DB-5MS,30 m×0.25 mm, 0.25μm)色谱柱,高纯氮气为载气,进样量1μL,分流比5∶1,载气流速1.5 mL·min^-1,进样口温度250℃,柱温箱程序性升温(初始温度50℃,保持2 min,然后以5℃·min^-1的速率升温至140℃,再以20℃·min^-1的速率升温至300℃),检测器温度250℃。结果:4个成分达到完全分离,无干扰峰出现,专属性好;标准工作曲线线性相关系数均大于0.999 7;优化的试验条件下,低、中、高3个添加水平下回收率在89.9%～99.1%;日内和日间RSD在1.0%～2.6%和1.8%～3.7%;方法检测限和定量限在0.818～1.49 mg·kg^-1和2.73～4....