长、短链探针以链延伸反应提高基因传感器检测MRSA灵敏度的实验研究

目的：利用链延伸反应的原理延长引物链以提高石英谐振式基因传感器表面的质量负载，从而提高传感器检测MRSA的灵敏度。方法：以不对称PCR的反应产物做为长链探针，人工合成的寡核苷酸片段为短链探针，在基因传感器阵列表面分别固定上金黄色葡萄球菌mecA和femA的长链及短链探针共4种探针片段，与相应的靶序列杂交后，加入Klenow酶，37℃进行链延伸反应1h。结果：长、短链探针均有效地固定了传感器表面。mecA,femA短链探针在链延伸反应前的检测灵敏度为0.5nmol/L，但经链延伸反应后检测灵敏提高到了0.05nmol/L；而长链探针却无法与相应的基因组靶序列发生杂交。结论：短链探针链延伸反应有效地提高了石英谐振式基因传感器的灵敏度，但该法不适用于链探针。     

组合靶基因自动检测仪应用软件的设计

目的：研制与开发组合靶基因自动检测仪应用软件。方法：应用VB6．0编程语言及Access 97数据库实现压电石英谐振频率的实时检测与分析。结果：实现了组合靶基因自动检测仪压电石英谐振频率的实时检测。数据分析，结果保存与数据转换等。结论：组合靶基因自动检测仪应用软件是一类可实时检测与分析压电石英谐振频率的新型实用性软件，可广泛应用于压电石英谐振频率的检测。     

Ilizarov技术及其外固定架在临床中的应用

1951年俄罗斯学者Ilizarov经过大量临床试验,提出了"张力-应力"法则,此法则成为了后来牵张成骨技术的理论基础并极大促进了其在临床的推广和应用.尽管肢体延长术(Ilizarov技术)在临床上取得了极大成功,但仍然有许多的并发症发生.本文详细介绍了肢体延长术的发展历程、常见综合征及其处理原则、未来发展趋势,以期对从事肢体延长的各级医师提供帮助.     

不同温度对压电传感器基因杂交效应的影响

目的：探讨温度对压电传感器基因杂交效应的影响。方法：在压电传感器阵列上固定20碱基的疏基DNA探针,而后分别在15℃、20℃、25℃、30℃下与同长度的互补靶序列进行杂交,计算机采集并分析传感器频率数据,比较各温度下杂交达到平衡所需时间,杂交前后频率差,并计算杂交动力学参数。结果：随温度增加,杂交时间有缩短趋势,杂交前后的频率差值逐渐减小。结合常数变化不明显,解离常数增大,使平衡常数显著增大。结论：在石英晶体传感器阵列上,基因杂交量随温度增高而减小。     

基于双链特异性核酸酶触发滚环扩增的microRNA-21太赫兹超材料传感方法的构建

目的:构建一种太赫兹(THz)超材料传感方法用于microRNA-21(miRNA-21)的信号放大检测。方法:首先构建THz超材料传感方法,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳及zeta电位验证方法的可行性;对传感器检测条件进行优化之后,对不同浓度的miRNA-21以及其他不同的miRNAs进行检测,并与其他microRNA检测方法进行比较;最后,对该传感器的回收率进行了评价。结果:在最优实验条件下,通过双链特异性核酸酶(DSN)循环识别与滚环扩增(RCA)的双重信号放大策略,该THz超材料传感器对靶标miRNA-21的响应范围为10 fmol/L至10 nmol/L,检测限为8.49 fmol/L。并且该传感器具有较好的特异性,具备了从多种miRNAs中识别靶标miRNA-21的能力,并且在商业化人血清样本中的回收率可达94.33%到115.33%。结论:该THz传感器可以实现靶标miRNA-21的高灵敏、高特异性检测,具备了在miRNA相关疾病无标记诊断与早期预警的潜力。     

离子交换层析微柱法及亲和电泳法与液相色谱分析法对糖化血红蛋白含量测定的比较

目的 探讨微柱法对HbA1C定量检测的意义。方法 采用微柱法、电泳法与HPLC法分别对同一标本进行HbA1C 含量测定,比较3种方法对HbA1C含量检测结果。结果 微柱法精确度和重复性好（批内变异系数CV＜1．5％,批间CV＜5％）,与参比方法HPLC经相关处理,其相关系数r=0．945,两法具有高度的相关性（P＜0．001）。结论 采用微柱法对HbA1C定量测定,无须贵重仪器设备,是一种简便快速的测定方法,能在大多数临床实验室广泛推广。     

探针浓度对压电传感器基因杂交效应的影响

目的 探讨探针浓度对压电传感器基因杂交效应的影响。方法 9种浓度的探针与同一浓度的靶序列在压电传感器阵列上进行杂交,计算机采集并分析传感器频率数据,比较各探针浓度下固定前后频率差,杂交达到平衡所需时间,杂交前后频率差,同时,根据较低浓度数据得出的杂交动力学参数。计算各浓度下的频率变化理论值。结果 随探针浓度增加,固定引起的频率变化值逐渐增加,杂交时间有缩短趋势,杂交前后的频率差值在探针浓度较低（1nmol/L-0.5μmol/L)时逐渐增大,而探;针浓度较高（1.0-3.5μmol/L)时反而减小,高浓度时杂交前后频率变化理论值与实际值存在明显差异。结论 在石英晶体传感器阵列上,基因杂交效率随探针浓度增加而增大,但探针浓度过高反而抑制杂交,其原因可能主要在于探针之间的空间构象关系和静电排斥。     

压电基因传感器阵列的初步构建

目的　初步构建适于临床基因检测的新方法即压电基因传感器阵列。方法　制作 2× 5型基因传感器阵列 ,在阵列各检测池的银膜上通过巯基修饰法固定合成大肠杆菌肠毒素基因探针 ,而后与各靶序列进行杂交 ,以自制集成电路及电脑软件对频率数据进行采集与分析。结果　 12h内 ,气相对照检测池频率变化± 2Hz ,液相对照检测池频率变化± 4Hz ;基因探针固定后频率下降 ( 4 8± 5 )Hz ;与完全配对的靶序列杂交 ,0 .5h达到稳定状态 ,并使频率下降 ( 4 3± 5 )Hz ;与有 1～ 2个碱基错配的序列杂交 ,频率下降仅分别为 ( 2 1± 5 )、( 7± 5 )Hz ,与 3个碱基错配的序列及不相关序列杂交 ,频率无明显变化。结论　初步构建的基因传感器阵列有很好的稳定性和特异性 ,敏感性尚待进行一步提高。     

自吞消化道异物的双对比造影检查(附108例分析)

自吞消化道异物病例并不少见,但对于谎吞Ｘ线阴性异物者必须予以排除,并对确有异物者明确定位以利于临床进行治疗。普通Ｘ线检查往往难以解决上述问题,用双对比造影方法进行检查,其结果比较满意。材料与方法须经检查确定有否消化道异物者１０８例,年龄在２０～５０岁之间,均为男性。所有１０８例病人均先作常规腹透或摄腹平片。其发现阳性异物者有吞１～２枚长铁钉者１３例,吞服４～１２枚短铁钉者３８例,吞服若干枚大头针者２３例,吞服金属汤匙柄者７例,主诉吞服阴性异物而普通腹平片未发现异物者有：吞塑料调羹柄者７例,吞碎破…