骨髓来源血管内皮祖细胞的体外分离培养和鉴定

目的:探索体外分离培养骨髓来源血管内皮祖细胞的方法。方法:将骨髓细胞接种至明胶涂层的培养皿内,用含10%胎牛血清、添加50μg/ml ECGS的M199培养液,置37℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度恒温培养箱培养,0.05%胰酶-EDTA消化传代。通过CD31免疫荧光染色、荆豆凝集素免疫细胞化学染色及毛细血管腔形成能力检测进行鉴定。结果:培养5～7天,内皮祖细胞的早期克隆形成,2周后细胞表现出典型的"鹅卵石"状。可与荆豆凝集素特异性相结合;内皮细胞特异性表面标志CD31荧光染色呈阳性表达;培养过程中可形成管腔状结构。结论:自骨髓可以获取足量的EPCs。     

骨髓来源血管内皮祖细胞的体外分离培养和鉴定

目的:探索体外分离培养骨髓来源血管内皮祖细胞的方法。方法:将骨髓细胞接种至明胶涂层的培养皿内,用含10%胎牛血清、添加50μg/ml ECGS的M199培养液,置37℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度恒温培养箱培养,0.05%胰酶-EDTA消化传代。通过CD31免疫荧光染色、荆豆凝集素免疫细胞化学染色及毛细血管腔形成能力检测进行鉴定。结果:培养5～7天,内皮祖细胞的早期克隆形成,2周后细胞表现出典型的"鹅卵石"状。可与荆豆凝集素特异性相结合;内皮细胞特异性表面标志CD31荧光染色呈阳性表达;培养过程中可形成管腔状结构。结论:自骨髓可以获取足量的EPCs。     

牙源性急性炎症期拔牙的临床观察

急性炎症期是否可以拔牙，长期以来是一个有争议的问题。认为在急性炎症期拔牙可促使炎症扩散，产生严重的并发症。也有人认为急性炎症期拔牙首先可以控制新的感染继续入侵，建立良好的引流，减少局部的压力，使炎症局限化，缩短疗程，减少病人的痛苦。根据以上不同的观点，我科于2003年2月～2005年9月对210例牙源性急性炎症期拔牙进行了临床观察，现报告如下。     

骨髓间充质干细胞膜片的体外构建及成骨分化实验研究

目的:探索骨髓间充质干细胞膜片的体外构建简便方法,并评估其成骨分化潜能。方法:将兔骨髓间充质干细胞高密度接种,在成骨诱导条件下连续培养形成细胞膜片。通过组织学、碱性磷酸酶活性定量检测、透射电镜和扫描电镜等方法,检测细胞膜片的特性。结果:高密度连续培养及成骨诱导后形成骨髓间充质干细胞膜片。HE染色证实膜片是一种由多层细胞和细胞外基质组成的聚集体;茜素红染色呈阳性;碱性磷酸酶定量分析含量较高;扫描电镜及透射电镜检查均见基质中大量的矿化结节聚集。结论:通过体外简单的连续培养和成骨诱导后,可形成具有良好成骨能力的骨髓间充质干细胞膜片。     

基于细胞膜片技术构建组织工程骨的实验研究

目的:由多层骨髓间充质干细胞和细胞外基质构成的细胞膜片,与管状天然珊瑚支架相复合,在动物体内构建管状骨组织。方法:将骨髓间充质干细胞高密度接种后,在成骨诱导条件下连续培养形成细胞膜片。随后,将细胞膜片均匀缠绕在直径5mm、壁厚1.5mm的管状珊瑚外表面,体外静态孵育3天。最后将构建物移植到裸鼠背部皮下,术后8周,12周分别进行大体观察、三维CT扫描和组织学检查。结果:8周和12周后,新生组织中骨组织所占面积分别为25.75%和40.01%。组织学检测证实新骨形成表现为软骨内成骨方式,由编制骨逐渐成为成熟的完全矿化的皮质骨。结论:成骨性骨髓间充质细胞膜片与管状天然珊瑚支架复合,可构建出与天然骨形态及结构相类似的管状组织工程骨。