表皮细胞作为种子细胞构建尿道的长期随访比较研究

目的将通过分离培养的表皮细胞与脱细胞膀胱黏膜下筋膜复合，修复缺损的尿道，观察表皮细胞表型在尿道环境中的转归。方法采用同种异体（家兔）的膀胱，经显微分离和脱细胞液处理，制成无细胞的生物支架（并经随机切片证实脱细胞效果），选择兔的小块包皮组织，消化收集分离出的表皮细胞，经过增殖、传代培养植入生物支架中，并加入Brdu标记物，将其卷成管状，回植入自体人工造成的尿道缺损，术后1、2、6及12个月分别测定治疗效果（每组各处死3只家兔／批），观察指标：尿道造影、大体外形、修复段尿道黏膜的HE染色、免疫组化和荧光标记等。结果术后实验对象伤口愈合正常，修复尿道的大体形态和尿道造影显示排尿通畅，无尿瘘和狭窄发生；HE染色和免疫组化显示，术后1月-6月，修复段尿道黏膜层次由单一向复层结构转变；而术后12月修复段尿道黏膜已基本显示为类似移行上皮细胞结构；术后角蛋白染色阳性；Brdu标记在术后1月清晰显示植入上皮细胞层存在，随后逐渐稀少。术后6及12月尿道黏膜结构中未见显影。结论作为种子细胞，表皮细胞可与胶原筋膜结合运用于尿道修复，修复效果良好，并随着时间延长向尿道原有细胞结构转变。     

脱细胞基质载体和表皮细胞结合构建尿道的实验研究

目的探索组织工程修复技术在尿道构建中的应用前景。方法采用同种异体家兔膀胱,经显微外科分离和脱细胞液处理,制成无细胞的生物支架,12只雄兔随机分为成实验和对照2组,剥离实验对象尿道黏膜2cm;实验组切取小块兔包皮组织,消化收集分离出的表皮细胞,经过增殖、传代培养,植入生物支架中,培养2周,并加入Brdu标记物,将其卷成管状,植入实验组人工尿道缺损区域;对照组单纯采用无细胞植入的生物支架修复尿道;术前和术后1、2、6个月每组各处死2只家兔/批,分别行尿道造影、大体外形、修复段尿道黏膜的HE染色、免疫组化和荧光标记。结果术后动物伤口愈合正常,排尿通畅,无尿瘘发生。修复尿道大体形态和尿道造影显示带细胞修复的尿道形态完整,清晰宽敞,无狭窄发生;术后1个月,HE和免疫组化显示,修复段尿道黏膜层次单一,缺乏复层和乳头结构。术后2个月基本恢复正常尿道结构,复层上皮结构形成,角蛋白染色阳性。术后6个月黏膜复层上皮结构更为丰富,角蛋白染色阳性;Brdu标记在术后1个月清晰显示植入上皮细胞层存在,术后2个月植入的原始上皮细胞显影稀少。术后6个月尿道黏膜结构中未见显影;而单纯生物支架修复组的实验对象则出现排尿变细,任何观察时段,均出...     

AcSDKP对人真皮成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的：探讨N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对人真皮成纤维细胞增殖及胶原合成的影响。方法：人真皮成纤维细胞的原代培养及鉴定后,给予不同浓度AcSDKP（10-7,10-8,10-9,10-10,10-11mol/L）的干预,设立空白对照组。WST-8法检测人真皮成纤维细胞增殖;RT-PCR技术检测人真皮成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达。结果：与空白对照组相比,10-10mol/LAcSDKP抑制人真皮成纤维细胞增殖作用最强;10-8mol/L和10-9mol/LAcSDKP对Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的抑制作用最显著。结论：本实验发现AcSDKP能够抑制人真皮成纤维细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成,有望为病理性瘢痕的防治提供新方法。     

发展黑龙江绿色食品产业集群提升竞争力研究

绿色食品是遵循可持续发展原则,按照特定生产方式生产,经专门机构认定,许可使用绿色食品标志商标的无污染的安全、优质、营养类食品。