脂氧素A4改善肺微血管内皮细胞炎症损伤的体外实验研究

目的 观察脂氧素A4（lipoxin A4,LXA4）对肺微血管内皮细胞（pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs）炎症损伤的治疗作用。方法 体外培养人PMVECs,第一阶段：分为空白对照组（完全培养基培养）和TNF-α组（分别以5、10、20 ng/mL共培养24 h）,采用MTT法检测各组PMVECs存活率,用针头式滤器检测TNF-α损伤前后PMVECs的单层通透性。第二阶段：分为TNF-α组（20 ng/mL处理24 h）和LXA4干预组（1、10、100 μg/L处理24 h）,检测PMVECs存活率和单层通透性,RT-PCR检测PMVECs IL-1β、VCAM-1、NF-κB p65 mRNA的表达。结果 （1）5、10、20 ng/mL TNF-α组的PMVECs存活率分别是（76.39±9.3）%、（61.87±11.7）%、（49.54±12.6）%,与空白对照组比较,均显著降低（P< 0.05）,而经1、10、100 μg/L三种浓度LXA4干预后,20 ng/mL TNF-α组的PMVECs存活率均得到提高,其中100 μg/LLXA4干预后的PMVECs存活率为（82.32±8.7）%,有统计学差异（P < 0.01）;（2）与损伤前[（0.021±0.011）mL/min·cm2·kPa]比较,TNF-α处理60、90 min后PMVECs单层通透系数（Kf值）显著增高[（0.067±0.007）和（0.096±0.007）mL/min·cm2·kPa,P< 0.05）],而LXA4干预60、90 min时Kf值则显著降低[（0.039±0.008）和（0.058±0.011） mL/min·cm2·kPa,P< 0.05）];（3）与对照组比较,TNF-α组的IL-1β、VCAM-1、NF-κB p65 mRNA的表达水平均有显著升高（P < 0.01或P < 0.05）,而LXA4干预组显著改善（P< 0.01或P< 0.05）。结论 TNF-α能引起PMVECs的急性炎症损伤,LXA4对TNF-α引起的PMVECs急性炎症损伤有改善作用。