OH-BBN诱导不同鼠类膀胱肿瘤的研究现状

通过建立胱肿瘤动物模型进一步研究其发生、发展、转移等变化的思路早已被研究者们所熟悉,而使用N-丁基-N-(4-羟丁基)亚硝胺是目前诱导膀胱肿瘤的最常用方法之一,采用的实验动物也不尽相同.本文介绍OH-BBN在不同鼠类中研究现状.     

人外周血树突状细胞体外诱导培养及表型鉴定

目的从健康人外周血中分离单个核细胞（peripheral blood mononuclearcell,PBMC）,经体外诱导培养获取成熟树突状细胞（dendritic cell,DC）.方法取健康人新鲜外周血,经密度梯度离心法分离,获得单个核细胞,在含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中培养.置37℃、5%CO2培养箱内静置培养2 h后除去悬浮细胞.培养液中加入rhGM-CSF和rhIL-4继续培养贴壁细胞5 d,然后加入TNF-α促进其分化成熟.倒置显微镜下观察DC形态,流式细胞仪（flowcytometer,FCM）对其进行表型鉴定.结果显微镜下观察DC细胞形态不规则,表面有大量的毛刺状突起;成熟DC细胞表面CD83、CD80分子表达明显增高.结论用rhGM-CSF、rhIL-4和TNF-α联合培养可以从健康人外周血诱导培养出成熟的树突状细胞.     

等离子电切镜联合气压弹道碎石术治疗截瘫患者膀胱结石37例

2007年5月～2009年7月，我院采用等离子电切镜联合气压弹道碎石术治疗截瘫患者继发的膀胱结石37例，疗效满意，报道如下。     

医贯

寡欲论 尊生之士,不须服食,不须导引,不须吐纳,能大明生死,凡于道矣.生、死之门户,不生则不死.上根顿悟无生,其次莫若寡欲,未必长生,亦可却病.反而求之,人之死由于生,人之病由于欲.上工治未病,下工治已病.已病矣,绎其致病之根,由于不谨,急远房帏,绝嗜欲,庶几得之.世人服食以图长生,惑矣!甚者日服补药,以资纵欲,则惑之甚也!     

次氯酸钠溶液在根管治疗中的临床疗效观察

目的：观察1%次氯酸钠溶液在根管治疗中做为根管冲洗液,治疗慢性根尖周炎的临床疗效。方法将80例单根管慢性根尖周炎患牙,随机分为两组：实验组40例,用1%次氯酸钠溶液做根管冲洗液;对照组40例,用3%过氧化氢溶液做根管冲洗液,观察根管治疗后6个月的临床疗效。结果1%次氯酸钠溶液做为根管冲洗液的实验组,治疗有效率57.9%,用3%过氧化氢溶液冲洗根管的对照组,治疗有效率43.2%（P〈0.05）。结论1%次氯酸钠溶液是临床上常用的有效的根管冲洗液。     

负载肿瘤抗原的DC疫苗体外诱导的特异性抗膀胱癌效应研究

目的探讨负载膀胱癌抗原成分树突状细胞（dendritic cells,DC）疫苗的制备和体外诱导T淋巴细胞特异性杀伤膀胱癌细胞的作用。方法冻融法制备EJ细胞裂解物抗原成分,体外培养的人外周血单个核细胞（hu-PBMC）在rhGM-CSF、rhIL-4、TNF-α诱导下分化出DC,负载EJ细胞裂解物抗原后制备膀胱癌DC疫苗;免疫磁珠分离法从人免疫重建Balb/c裸小鼠脾脏组织中分离CD3＋T淋巴细胞,3H-TdR掺入试验测定DC疫苗刺激自体T淋巴细胞增殖的能力,51Cr释放试验检测DC疫苗诱导的T细胞对EJ细胞的杀伤作用。结果 Hu-PBMC在细胞因子rhGM-CSF、rhIL-4和TNF-α的刺激下分化为成熟DC,负载EJ抗原的DC疫苗体外可使同源T淋巴细胞活化,增殖指数增加,活化的T淋巴细胞对EJ细胞的杀伤率为（62.58±6.13）%,和对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论负载膀胱癌冻融抗原的DC疫苗体外可诱导人T淋巴细胞活化增殖,对EJ细胞有明显的杀伤作用。     

Kringle5基因的表达、纯化及其抗膀胱肿瘤作用的初步研究

目的获得高纯度并且有活性的K5蛋白.方法继构建了重组质粒pGEX-5X-1-K5的基础上,转化感受态细胞BL-21、DH-5α、Top10,并优化了表达条件,经过裂解、洗涤、溶解包涵体后,用带GST标签的谷胱甘肽琼脂糖4B亲和柱进行纯化,Bradford法测蛋白浓度,分别用ECV304细胞和裸鼠皮下移植瘤模型对蛋白进行了活性测定.结果获得了表达量最高的条件：BL21感受态细胞,诱导时间：6 h,纯化后的K5蛋白纯度达到95%以上,K5浓度为5μg/mL时抑制率最高.裸鼠模型上,K5组肿瘤的生长速度明显慢于PBS对照.结论含有GST的融合蛋白表达载体,表达量多、易于纯化、成本低、蛋白纯度高,并能有效的抑制ECV304细胞,抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,为K5的工业化大规模生产奠定了基础.     

绿色荧光蛋白在膀胱肿瘤动物模型中的应用

绿色荧光蛋白是一种来源于海洋多管水母属的荧光标志物。其能在细胞内稳定表达,具有对细胞无毒性,检测无需底物及辅助因子,且可以实时跟踪记录细胞生长情况,检测结果真实可靠的优点。绿色荧光蛋白的性质特点使其在膀胱肿瘤动物模型中有着很好的应用前景。     

OH—BBN诱导不同鼠类膀胱肿瘤的研究现状

通过建立胱肿瘤动物模型进一步研究其发生、发展、转移等变化的思路早已被研究者们所熟悉,而使用N-丁基-N-（4-羟丁基）亚硝胺是目前诱导膀胱肿瘤的最常用方法之一,采用的实验动物也不尽相同.本文介绍OH-BBN在不同鼠类中研究现状.     

人免疫重建NOD/SCID小鼠模型的建立

目的探讨NOD/SCID（nonobese diabetic/severe combined immunodeficien）t小鼠人免疫重建模型的建立方法和免疫特性.方法 16只NOD/SCID小鼠随机分成实验组和对照组,每组8只.Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,通过腹腔注射移植给实验组小鼠,空白对照组小鼠每只腹腔注射无菌PBS,第4、8和12周时,流式细胞术检测小鼠外周血中人的CD3＋T、CD19＋B淋巴细胞,ELISA法测定小鼠血清中人IgG含量,免疫组织化学染色检测小鼠脾脏和肝脏中人CD3＋T、CD19＋B淋巴细胞浸润情况.结果移植PBMC 4周后,实验组NOD/SCID小鼠外周血中人CD3＋T、CD19＋B的细胞分别为85.6%、76.7%,并且在小鼠脾脏组织中也可以检测到人CD3 T、CD19 B淋巴细胞.移植4、8及12周后小鼠血清中人IgG含量分别达到（863±12.5）μg/mL、（1217±16.7）μg/mL、（958±13.1）μg/mL.结论用人外周血PBMC经腹腔注射可以成功建立人免疫重建NOD/SCID小鼠模型,方法简便可靠.