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糖尿病时 ,多种因素激活肾脏细胞内有丝分裂原蛋白激酶 (MAPK)信号通路。MAPK激活后通过调节下游转录因子活性 ,控制基因表达 ,最终引起肾小球肥大和细胞外基质 (ECM)积聚 ,导致糖尿病肾病 (DN)的发生。 相似文献
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反义寡核苷酸技术的进展及应用 总被引:4,自引:0,他引:4
随着分子生物学和遗传工程的发展,基因治疗应运而生,得到广泛的肯定,其中包括反义核酸技术,简称反义技术。那些能与特定的DNA或RNA以碱基互补配对的方式结合,并阻止其转录和翻译的短核酸片段,称为反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide)。研究反义寡核苷酸作用机理和应用的技术叫反义技术。 反义技术概述 早在1984年,Johnathan G就报道了用反义RNA抑制TK基因的表达取得了良好的效果~[1]。反义寡核苷酸抑制靶基因的作用途经包括:1.反义寡核苷酸与DNA双螺旋形成三螺旋,… 相似文献
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医学生物化学实验改革的尝试 总被引:2,自引:0,他引:2
为了培养提高学生动手能力,掌握基本生化技术,培养学生独立思考、分析解决问题的能力,最近我室生物化学实验教学在教材建设,教学改革,加强实验技能和实验室建设等方面做了一些探索和尝试。 相似文献
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浅谈开展设计性实验的体会 总被引:1,自引:0,他引:1
开展设计性实验是教学改革探索中的一种尝试,目的是希望通过这种学习方法,提高学生学习兴趣。激发他们学习的主动性。通过三年的实践,我们认为设计性实验能提高学生自主学习及自我认识的能力,加深对生化这门课程的理解。同时能开阔学生的学习思路,培养他们对今后所从事工作的能力及信心。 相似文献
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目的:探讨葡萄糖诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2)内钙离子(Ca^2+)浓度的动态变化及其信号转导途径。方法:在葡萄糖诱导的HK-2细胞中加入不同浓度的蛋白激酶C抑制剂(Hypericin)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Apopain)、蛋白酪氨酸激酶抑制剂(Genistein)、一氧化氮合酶抑制剂(NAME),利用激光共聚焦显微镜(LSCM)观察HK-2细胞内[Ca^2+]动态变化。结果:LSCM下观察发现,150mmol/L葡萄糖可引起HK-2细胞内[Ca^2+]增高。150mmol/L葡萄糖诱导的HK-2细胞中加入10^-4mmol/LHypericin、10^-6mmol/LApopain、10^-7mmol/LGenistein、10^-2mmol/LNAME可抑制葡葡萄糖诱导的HK-2细胞内[Ca^2+]增高。结论:葡萄糖作用于HK-2细胞,可引起细胞内[Ca^2+]增高;蛋白激酶C、caspase-3、蛋白酪氨酸激酶、一氧化氮(NO)均参与了葡葡萄糖诱导的HK-2细胞内[Ca^2+]增高的信号传导过程。 相似文献
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目的探讨将含人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜覆盖于大鼠全层皮肤缺损创面,在创面愈合过程中对细胞外基质中纤维连接蛋白(Fn)及其受体整合素α5表达的影响。方法通过建立hVEGF基因工程生物膜覆盖大鼠全层皮肤缺损创面的动物模型,采用免疫组化方法并结合图像分析,分别观察并测定实验组和对照组大鼠创面愈合3、7、14、29d时创面中Fn和整合素α5表达的平均光密度值,判断其在创面中表达的强弱。结果在术后3、7、14d时,实验组中Fn表达显著高于对照组(P〈0.05);在术后14、29d时,实验组中整合素α5表达显著高于对照组(P〈0.05)。结论将hVEGF基因工程生物膜覆盖于大鼠全层皮肤缺损创面,在创面愈合的早、中期促进Fn的表达;在创面愈合中、晚期,上调整合素α5的合成与分泌,从而有利于创面愈合。 相似文献
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目的探讨含人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用。方法在SD大鼠背部皮肤制作深达皮肤全层的正方形创面,实验组大鼠创面上覆含hVEGF重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜;对照组分别在大鼠创面上覆整合空质粒的成纤维细胞的生物膜、空白生物膜和仅覆切口膜。采用形态学和免疫组化方法,观察术后3、7、14、29 d实验组和对照组大鼠创面肉芽组织生长及创面愈合情况。结果在各时相实验组中新生的毛细血管数以及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达均显著高于对照组(P<0.01),且VEGF表达与新生毛细血管数正相关。结论将含hVEGF重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜覆盖于大鼠全层皮肤缺损创面,能使创面成纤维细胞持续、有效地表达VEGF,强有力地促进肉芽组织增生,有利于创面愈合。 相似文献
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目的探讨高糖环境下成纤维细胞的增殖情况以及I型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)在介导肾小管-间质损伤过程中的作用. 方法采用MTT方法分别检测正常糖浓度和高糖浓度下细胞的增殖,RT-PCR方法观察PAI-1 mRNA的表达.同时将细胞培养于25mmol/L甘露醇中,观察高糖中渗透压所起的作用. 结果培养24h后,高糖以剂量依赖形式抑制细胞增殖.与正常对照组相比,高糖可以增加PAI-1的表达.甘露醇也抑制细胞增殖,同时对PAI-1的表达产生作用. 结论高糖可抑制成纤维细胞增殖,刺激PAI-1的表达.PAI-1在糖尿病肾病肾小管-间质纤维化过程中,可能具有主要的介导作用. 相似文献
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作者从一例人高转移型原发性胃癌组织及其对应的正常胃粘膜中分别提取总RNA和分离多聚(A)~+RNA,进而合成cDNA。cDNA第一条链合成效率前者为58.8%,后者为29.8%;第二条链合成效率前者为98.3%,后者为93.3%。cDNA分子大小在0.5~8Kb之间。cDNA接上含有NotI切点和EcoRI粘性末端的接头,重组到经EcoRI酶解5端脱磷酸化的pT7T318U质粒上,转化大肠杆菌NM522,构建了二个cDNA文库,文库的容量分别为1.2×10~5与1.0×10~5重组子,重组率均为80%,克隆效率分别为2.4×10~6克隆/lμg cDNA与2.0×10~6克降/lμg cDNA,插入片段的大小在0.5Kb~4Kb之间。 相似文献
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血液透析(血透)过程中患者血液与异己材料接触后导致血液中白细胞的激活,其产生的前炎症性细胞因子和透析患者的急、慢性并发症密切相关。有研究显示,白介素-1受体拮抗物(IL-1Ra)在反映机体炎症反应方面较为敏感[1]。因此,我们采用细胞培养和原位杂交等技术观察不同条件下正常人和尿毒症患者外周血单个核细胞( PBMC) IL- 1Ra的mRNA转录和蛋白质合成情况,以了解透析膜和内毒素在PBMC激活中的作用,为将来超净水透析的临床应用提供理论依据。 一、材料和方法 1研究对象:血透组患者9例,其中男性 6… 相似文献