犬脑内移植大鼠胰岛细胞的凋亡状况

目的　观察生物半透膜包裹异种胰岛样细胞团(ICCs) ,结合相对免疫特赦部位脑实质内移植的凋亡状况 .为异种胰岛细胞脑内移植可能的临床应用提供实验依据 .方法　SD大鼠ICCs分离、纯化与培养 ,生物半透膜包裹后犬脑实质内移植 .电镜观察移植后的细胞形态 ,胰岛素 TUNEL双标记染色鉴定胰岛β细胞凋亡 ,免疫组化染色观察凋亡相关基因bcl 2和bax的表达 .结果　胰岛素 TUNEL双标记染色证明了胰岛β细胞发生了凋亡 ,电镜下可见典型的凋亡细胞 ,有凋亡小体形成 .移植 1mo和 2mo,白细胞数分别为 2 4± 5和 93± 9(P <0 .0 1) ,白细胞数 /胰岛素阳性细胞数之比为 8± 3和2 0± 8(P <0 .0 1) ,随着移植时间的延长 ,白细胞增多 ,胰岛细胞减少 .Bcl 2和bax基因均有不同程度的表达 ,bax染色更浓 .结论　异种移植后的胰岛细胞死亡与凋亡有关 .半透膜包裹异种ICCs结合免疫特赦部位脑内移植的方法对克服免疫排斥反应有一定的作用 .     

半透膜包裹胰岛脑内移植延长异种胰岛的生存期

目的 研究生物半透膜包裹胰岛样细胞团(ICCs)的免疫隔离效果。方法 分离培养SD大鼠的ICCs，用生物半透膜包裹，体外观察半透膜的通透性，并将包囊后的ICCs植入犬大脑实质内，术后1个月和2个月以光镜和电镜观察移植物和周围脑组织的病理改变，免疫组化染色鉴定移植物内的胰岛B细胞。结果 半透膜包囊在整个体外实验过程中无破损，淋巴细胞及其它血细胞成份不能透过半透膜，而葡萄糖和胰岛素能迅速弥散透过半透膜囊。移植后2个月，移植物内无多形核细胞和淋巴细胞的团状浸润，免疫组化染色证明移植物内有胰岛B细胞存在，周围的脑组织仅有轻度的胶质细胞增生和水肿。结论 半透膜包裹ICCs结合免疫特赦部位移植的方法对克服异种胰岛移植的免疫排斥反应有一定的作用。     

CD95L和TGF—β在与胰岛细胞共同培养的Sertoli细胞上表达

目的 观察生物半透膜（BSM）包裹胰岛样细胞团（ICCs)与富含Sertoli细胞的睾丸样细胞团（SC）体外培养时，Sertoli细胞是否同时表达CD95L和TGF－β基因及体外抗免疫排斥作用的效果。方法 BSM包裹猪ICCs和SC，与人淋巴细胞进行培养。免疫组化染色观察CD95L、TGF－β的表达。通过测定胰岛素浓度和刺激释放实验，AO－PI荧光双染色和TUNEL染色，观察培养细胞的结构功能状况。结果 ICCs和SC共同培养时，许多Sertoli细胞表达CD95L和TGF－β蛋白。与淋巴细胞培养后，胰岛素分泌良好，刺激释放实验比值＞2．0，AO－PI荧光染色超过95％的细胞存活，TUNEL染色未发现凋亡细胞。结论 Sertoli细胞与胰岛细胞共同培养时可出现CD95L和TGF－β同时表达的微环境。