烘干和辐照对功能性红曲Monacolin K含量的影响

针对功能性红曲生产过程中的烘干及辐照两道工序对功能性红曲中Monacolin K含量的影响因素进行了研究.发现烘干温度越高,酸式结构的Monacolin K越多地脱水转化成内酯式结构的Monacolin K,在100℃下烘干15 h,总Monacolin K含量从7 748.01 mg/kg下降到5 663.92mg/kg,下降幅度26.9%左右.烘干时间对Monacolin K的降低及酸式Monacolin K的比例也有明显的影响.功能性红曲产品经钴-60辐照后总Monacolin K含量下降10%以上,酸式结构和内酯式结构的Monacolin K的含量均下降,酸式结构下降的幅度比内酯式结构下降的幅度更大.     

碱性高温淀粉酶基因的克隆与表达及酶特性的初步研究

从土壤中筛选到一能分泌碱性高温淀粉酶的芽孢杆菌属菌株。用质粒pTB522作载体,该淀粉酶基因(amyA)被克隆并在枯草芽孢杆菌ANA-1中得到表达。又通过亚克隆,得到含酶基因的更小重组质粒pTBX32(14.6kb)。携带该重组质粒的枯草芽孢杆菌ANA-1分泌的淀粉酶的特性与供体菌的相同。该酶作用最佳pH为8.5、最适温度为75℃,但在65℃,pH8.5条件下处理1h,该酶活性不降低。通过硫铵沉淀、热处理、DEAE——纤维素色谱和亲和色谱等分离技术,从培养液中部分纯化了该酶,其分子量估计为56000。     

蔗糖及一些渗透剂对紫草培养细胞中红色素释放的效应

紫草(Perilla frutescens)悬浮培养细胞在胞内产生并积蓄花青苷(红色素)。通过实验发现用一些渗透剂如甲苯、氯仿、聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X—100)、二甲亚砜(dimethylsulfoxide)、醋酸和乙醇等处理培养细胞,可使细胞内的红色素释放出来。培养的紫草细胞一般在含3%蔗糖浓度的LS培养基中生长,当提高蔗糖浓度至4.0%～4.5%时,细胞生长量及色素的产量均有增加。实验结果表明,蔗糖浓度的提高不仅可以增加碳源,而且更重要的原因还可能是蔗糖渗透压的影响,在高糖浓度也即高渗透压下,细胞红色素的渗透性有所增加。     

HPLC法测定红曲中酸型与内酯型Monacolin K

功能性红曲产品中的MonacolinK包括酸型和内酯型两种成分.采用HPLC法,色谱柱为ZORBAXSBC 18,5μm,250mm×4.6mm,柱温28℃,V(乙腈)∶V(0.1g/dL磷酸水溶液)=65∶35为流动相,紫外检测器波长为238nm,可同时对酸型和内酯型的MonacolinK进行定量检测,线性关系和重复性均满足要求.固体红曲样品可以用甲醇直接萃取,液态的红曲样品在甲醇萃取之前需调整pH值6～7,测定结果能反映原样品中两种形态MonacolinK的含量.色素对MonacolinK检测存在一定影响,但对于多数功能性红曲色价低、MonacolinK高的特点,这一影响作用较轻,可以忽略.     

产过氧化氢酶菌株培养条件的优化

通过对溶壁微球菌培养基优化,确定最佳发酵培养基,并对发酵工艺条件进行了初步的优化.最适碳源是麦芽糖,最适氮源是蛋白胨和酵母膏,最近无机盐是MnSO4;该菌株产酶的最佳培养基配方为:60 g麦芽糖,13 g蛋白胨,8 g酵母膏,1 g MnSO4,5 g NaCl,2 g NaH2 PO4·2H2O,2 g K2HPO4·3H2O,0.5 g MgSO4·7H2O,0.5 g CaCl2,1 000 mL水.从该菌株发酵过程曲线发现,该菌株大量产酶期在12-14 h.摇瓶发酵最适初始pH值为7.0,250 mL三角瓶装液量为25mL,接种体积分数为5%,培养温度为37℃.     

加热巴氏杀菌和辐射选择性杀菌联合加工对圆腿货架寿命和产品品质的影响 初报

加热巴氏杀菌后样品中的细菌总数,可用钴一60γ射线辐射杀菌的方法使之进一步降低,D_(10)=0.12Mrad。0.3Mrad辐照的样品,在0℃条件下货架寿命可达半年,比对照的延长了一倍以上。辐照对产品的化学成份没有影响。产品经品尝试验,接受情况良好。加热巴氏杀菌和辐射选择性杀菌联合加工是圆腿的一种新加工工艺。     

食品工业用红曲菌株产桔青霉素能力的研究

为筛选出低产或不产桔青霉素的红曲霉菌株 ,选用 3 5株食品发酵工业用红曲霉 ,研究不同的培养条件对其产桔青霉素能力的影响。结果显示 ,所有菌株在大米培养基上均产桔青霉素 ,3 0个株菌 (85 71% )在液体培养基上产毒 ;两种培养基上的产毒范围分别为 0 2 8～ 2 458 80mg kg和 0 0 9～ 55 65mg kg ,毒素产量均数分别为 2 0 1 60mg kg和 11 99mg kg ,中位数分别为 61 99mg kg和 3 51mg kg ,同一菌株在大米培养基上产桔青霉素能力高于液体培养基。色价测定结果表明 ,菌株在大米培养基上的色素产量也高于液体培养基 (3～ 50 9倍 ,平均 93倍 )。本研究筛选出一株在大米培养基上色素产量最高 (113 4U g)而桔青霉素产量较低、适用于食品发酵工业用的红曲霉菌株。研究结果提示 ,用于生产食品或保健食品的红曲菌种在使用前必须进行安全性评价 ,并在全国范围内定期对生产厂家、菌种保藏单位使用和保藏的菌种进行产桔青霉素能力调查 ,对红曲发酵产品中桔青霉素污染水平进行监测 ,建立我国红曲制品中桔青霉素的限量标准迫在眉睫     

盐酸克伦特罗的高灵敏时间分辨荧光免疫分析

目的采用时间分辨荧光技术建立高灵敏的盐酸克伦特罗(CBL)间接竞争免疫分析法(CBL-TRFIA)。方法以CBL-BSA为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗CBL抗体;CBL与卵清蛋白的联结物(CBL-OVA)包被96孔板为固相抗原,与游离CBL共同竞争有限的抗CBL抗体;用稀土离子Eu3+标记的羊抗兔抗体进行示踪。结果该方法的灵敏度为0.01μg/L,测量范围为0.01~25μg/L,平均回收率为99.7%,RSD3.9%,与盐酸异丙肾上腺素的交叉反应率为0.01%,与沙丁胺醇、盐酸肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素无交叉反应。8条不同时间进行的CBL-TRFIA的效应点值ED80、ED50、ED20分别为(0.07±0.01)μg/L(、1.47±0.11)μg/L和(23.6±0.56)μg/L。尿样经TRFIA和ELISA试剂盒同时检测CBL,两者的相关系数为0.932,结果相符。结论CBL-TRFIA分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景。     

红曲霉菌9903发酵工艺条件对色素及桔霉素生产的影响

筛选到一株高产色素、低产桔霉素的红曲霉菌9903，并鉴定该菌种为红曲红曲菌。为提高色素含量、降低桔霉素含量，对该菌的发酵培养基成分进行了研究，通过三因素三水平正交实验得到了摇瓶最佳培养基配方，在10L的自动发酵罐实验中，以玉米淀粉和谷氨酸单钠盐为主要成分的发酵液色价达到184U／mL，桔霉素质量浓度低于1mg/L，发酵动力学的初步研究表明，色素及桔霉素的生产与菌体生长有一定的偶联关系，而且桔霉素在发酵后期有一定程度的降解。此外，溶氧条件对红曲霉产色素和桔霉素的影响的初步研究表明，高溶氧对色素和桔霉素的生产都有促进作用。     

国产红曲制品中桔青霉素污染水平研究

目的了解中国红曲制品中桔青霉素的污染水平。方法用高效液相色谱方法对采自市场或厂家送检的114个红曲产品进行了研究。结果114份样品中,桔青霉素阳性者68份,阳性率59.65%,污染水平范围0.18～1739.23mgkg,平均污染水平211.61mgkg(中位数6.62mgkg)。红曲产品种类不同,桔青霉素污染水平各异,以红曲红色素粉中桔青霉素含量最高,27份样品中有25份(92.59%)检出桔青霉素,污染水平范围0.85～1739.93mgkg,平均508.40mgkg(中位数169.88mgkg)。其次为红曲米粉原料,19份样品中有12份(63.16%)桔青霉素阳性,但83.33%阳性样品中桔青霉素水平在10mgkg以下;功能性红曲中84%样品桔青霉素水平在6mgkg以下。结论国产红曲制品不同程度被桔青霉素污染,所调查样品中有15份(13.16%)色价桔青霉素比值超过日本标准。