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目的 检测Yes相关蛋白(YAP)在人胃腺癌、胃腺瘤及正常胃黏膜组织中的表达,探讨YAP对胃癌细胞增殖和转移的作用及其分子机制.方法 免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测YAP在78例人胃腺癌、39例人胃腺瘤及46例正常人胃黏膜组织的表达.利用建立慢病毒小发夹RNA(shRNA)靶向YAP基因的胃癌SGC-7901细胞株,Western blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的蛋白表达水平.噻唑蓝(MTT)比色法和Transwell试验检测YAP下调对胃癌细胞增殖和转移的影响.结果 YAP在69.23%的胃腺癌组织中高表达,与正常胃黏膜(0.33 ±0.15)和胃腺瘤(0.42 ±0.20)比较,YAP mRNA在胃腺癌(1.74±0.46)的表达水平明显增高(P<0.001).体外实验显示,YAP下调减少PCNA和MMP-2蛋白的表达,并抑制胃癌细胞增殖活性和转移能力.结论 YAP在人胃腺癌组织中高表达,并且YAP下调抑制胃癌细胞的增殖和转移. 相似文献
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目的 构建大鼠早期黏膜下浸润结直肠癌( SICRC)与非黏膜下浸润结直肠癌(SNICRC)模型并鉴定两者的差异蛋白,以筛选早期SICRC的生物学标记.方法 应用N-甲基-N-亚硝基脲( MNU)诱导建立大鼠SICRC与SNICRC模型.二维荧光差异定量双向电泳技术(2D-DIGE)和基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱鉴定出SICRC与SNICRC的差异蛋白.荧光定量Real-time PCR和Westem blot实验验证所选蛋白的鉴定结果.结果 成功建立大鼠SICRC与SNICRC模型.2D-DIGE发现SICRC和SNICRC之间有5个差异表达蛋白(P值均<0.01).质谱分析鉴定这5个蛋白发现,与SNICRC和正常对照(NC)比较,转凝蛋白(Transgelin)、肽基脯氨酰异构酶A和原肌球蛋白1在SICRC表达上调,而碳酸酐酶Ⅱ(CAⅡ)与一种未命名蛋白表达下调.Real-time PCR和Westemblot验证结果显示,Transgelin mRNA和蛋白水平在SICRC组(33.05±0.75、86.63±1.83)高于SNICRC( 22.68±0.89、67.93±2.39)和NC组(18.07 ±0.55、44.25±1.55)(P值均<0.05),而CAⅡmRNA和蛋白水平在SICRC组(18.01±0.53、41.55±1.89)低于SNICRC组(26.28±1.08、61.11±1.57)和NC组(33.08±0.76、83.43 ±1.61)(P值均<0.05),变化趋势与蛋白质组学一致.结论 2D-DIGE是筛选早期SICRC与SNICRC差异表达蛋白的有效手段,鉴定的差异蛋白有可能成为临床早期黏膜下浸润结直肠癌筛选和诊断的生物学标记. 相似文献
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