靶向人PDESA3基因的shRNA对人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP的影响

目的：观察腺病毒载体介导特异性短发夹RNA（shRNA）对人阴茎海绵体平滑肌细胞环磷酸鸟苷（cGMP）的影响,为应用RNA干扰（RNAi）技术治疗阴茎勃起功能障碍（ED）提供实验依据。方法：成功构建携带3条针对人PDESA3基因位点特异性shRNA的重组腺病毒（rAd5-shRNA-PDE5A3）,并设立阴性对照病毒组和空白对照组,分别转染人阴茎海绵体平滑肌细胞。以放射免疫法分别检测转染重组腺病毒24、48、72h后细胞内cGMP浓度变化,观察rAd5-shRNA-PDE5A3对海绵体平滑肌细胞内cGMP的影响。结果：实验组rA（15-shRNA-PDE5A3转染人阴茎海绵体平滑肌细胞后胞内cGMP水平显著高于阴性对照组和空白对照组,在转染后72h最为显著。结论：3条特异性针对人PDE5A3mRNA靶位点的shRNA可有效地增加海绵体平滑肌细胞内cGMP的水平,增强对PDE5基因的阻抑效果。