阻断核心岩藻糖基化修饰抑制肾小管上皮细胞的间充质转化

目的: 探讨阻抑核心岩藻糖基化修饰对肾小管上皮细胞间充质转化(EMT)过程的影响。方法: 利用转化生长因子β₁(TGF-β₁)建立肾小管上皮HK-2细胞EMT的模型,应用RNAi技术沉默HK-2细胞的α-1,6-岩藻糖基转移酶(FUT8)基因表达,光镜下观察FUT8 基因沉默后细胞形态变化,免疫印迹及免疫细胞化学方法测定细胞表型标记物蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1)的表达变化,流式细胞仪测定细胞凋亡。 结果: TGF-β₁孵育48 h后,HK-2细胞失去原有的上皮细胞形态,呈现纤维细胞形态,纤维细胞表型标记蛋白α-SMA、FSP-1及N-cadherin表达明显升高,而上皮细胞表型标记蛋白E-cadherin表达明显下降,同时伴有 FUT8 基因表达上调,细胞凋亡增加,而提前转染FUT8 siRNA能明显减弱上述这些反应。结论: FUT8催化的核心岩藻糖基化修饰参与HK-2细胞的EMT过程;阻断核心岩藻糖基化修饰,能有效阻断肾小管上皮细胞的EMT过程。     

核心岩藻糖基转移酶siRNA抑制肾小管上皮细胞转化生长因子β-Smad2/3通路活化

目的 探讨α-1,6核心岩藻糖基转移酶（FUT8）小分子干扰RNA（siRNA）对肾小管上皮细胞转化生长因子（TGF）β-Smad2/3信号通路的影响。 方法 HK-2细胞共分为6组：正常组、阴性对照组、TGF-β1组、TGF-β1加FUT8干扰组、TGF-β1加阴性对照组、FUT8干扰组。利用外源性TGF-β1激活HK-2细胞TGF-β-Smad2/3信号通路。应用siRNA技术沉默FUT8。用免疫荧光方法测定细胞表面核心岩藻糖链表达;用免疫沉淀、凝集素免疫印迹以及免疫双染的方法测定FUT8基因沉默后TGF-βⅡ型受体（TGF-βRⅡ）、TGF-βⅠ型受体（ALK-5）的核心岩藻糖基化变化,并检测Smad2/3蛋白表达和磷酸化（p）-Smad2/3蛋白表达及其核转位的变化。 结果 与正常组及阴性对照组相比,加入5 μg/L的TGF-β1孵育HK-2细胞48 h,能显著上调 TGF-βRⅡ和ALK-5蛋白表达水平（P < 0.05）,导致p-Smad2/3表达水平明显升高（P < 0.05）,并促使其发生核转位。HK-2细胞表面存在核心岩藻糖链表达。与正常组及阴性对照组相比,TGF-β1孵育后,TGF-βRⅡ与ALK-5两种受体的核心岩藻糖链均显著升高（P < 0.05）,FUT8 siRNA能显著抑制TGF-βRⅡ与ALK-5核心岩藻糖链表达（P < 0.05）,从而抑制p-Smad2/3表达升高（P < 0.05）及其核转位,但不影响TGF-βRⅡ和 ALK-5的蛋白表达（P > 0.05）。 结论 在肾小管上皮细胞中,TGF-βRⅡ和ALK-5蛋白翻译后的核心岩藻糖基化修饰是它们发挥生物学功能所需要的,阻止TGF-βRⅡ和ALK-5的核心岩藻糖基化,能抑制TGF-β-Smad2/3信号转导通路的活化。     

普通含钙透析液分段枸橼酸抗凝与无肝素透析在高危出血透析患者中的应用

目的 ：观察应用普通含钙透析液分段局部枸橼酸抗凝（regional citrate anticoagulation,RCA）的安全性、有效性。与无肝素透析比较在高危出血患者中凝血情况、治疗时间的差异。方法：选取大连市中心医院2019年1月至2021年12月有高危出血风险的维持性血液透析患者35例,其中男性19例,女性16例。分别予以无肝素透析和4%枸橼酸钠局部抗凝治疗,枸橼酸应用输液泵分别自管路动脉端和静脉壶处持续泵入。比较RCA应用前后患者血离子情况、血压变化和出凝血时间影响。比较2种方法凝血情况、透析时间的差异。结果：枸橼酸组患者通过在线调整透析机参数,透析后血钠可以维持平稳（P>0.05）。应用含钙透析液（1.5 mmol/L）,无低钙血症发生,透析后血钙较透析前升高（P<0.05）。枸橼酸组患者透析前后血压、心率平稳,无明显变化（P>0.05）,随着透析时间延长,静脉压、跨膜压有所升高（P<0.05）。RCA治疗后患者活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）较透析前延长（P<0.0...     

血清基线低密度脂蛋白胆固醇水平对维持性血液透析患者预后影响的回顾性队列研究

目的 探讨启动透析治疗前基线血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）水平对维持性血液透析患者预后的影响。方法 选取2010年1月1日至2016年12月31日于大连市中心医院启动血液透析治疗并满3个月,符合入组条件的患者238例。根据血液透析前血清基线LDL-c水平将患者分为LDL-c≥1.8 mmol/L组（119例）和LDL-c <1.8mmol/L两组（119例）,观察的主要终点事件为全因死亡,运用Kaplan-Meier分析方法比较两组生存率的差异。结果 LDLc≥1.8mmol/L组1、2、3、4、5和6年的生存率分别为93%、77%、64%、44%、31%和31%;LDL-c<1.8 mmol/L组1、2、3、4、5和6年的生存率分别为93%、82%、79%、77%、70%和64%。Kaplan-Meier生存分析显示LDL-c≥1.8 mmol/L组与LDLc<1.8 mmol/L组相比,死亡风险显著升高（P=0.004）。多因素Cox比例风险模型分析发现,调整混杂因素后,维持性血液透析患者基线LDL-c≥1.8 mmol/L组死亡风险是LDL-c<1....     

糖尿病对维持性血液透析患者生存率的影响及其危险因素分析的回顾性队列研究

目的 探讨糖尿病作为原发病和伴发病对维持性血液透析患者预后的影响并分析全因死亡的危险因素。方法选取2010年1月1日至2016年12月31日于大连市中心医院接受维持性血液透析的602例患者进行回顾性研究,随访至2021年12月31日。根据疾病状况分为原发性糖尿病肾病（DKD）组（257例）,糖尿病作为伴发疾病（DCM）组（61例）及无糖尿病（NDM）组（284例）。按年龄≤60岁（324例）及>60岁（278例）进行亚组分析。采用Kaplan-Meier生存曲线分析3组患者的生存率差异,单因素及多因素Cox回归分析探讨全因死亡的危险因素。结果 所有患者随访中位时间62个月,全因死亡共329例。三组患者第2～5年的生存率差异有统计学意义（P<0.05）。生存分析结果显示,NDM组患者生存率高于其他2组,差异有统计学意义（P<0.05）,DKD组和DCM组患者生存率差异无统计学意义（P=0.162）。多因素Cox回归结果显示,开始透析时年龄（HR 1.01,95%CI 1.01～1.02,P=0.002）、脑卒中（HR 1.44,95%CI 1.08～1.92,P=0.0...     

维持性血液透析患者血红蛋白动态变化与预后关系的回顾性队列研究

目的 探讨维持性血液透析(MHD)患者血红蛋白(Hb)动态变化及演变模式与预后的关系,并探索评估Hb动态变化与预后关系的更好方法.方法 收集2010年1月1日至2016年12月31日于大连市中心医院行血液透析满3个月、符合入组条件的患者.每3个月进行一次随访,构建Hb动态演变数据库.终点事件为全因死亡.依据患者的平均H...