多种分子形式芳香基酰胺酶的分离及其临床应用

对肝病患者血清芳香基酰胺酶（ＡＡＤ）的不同分子形式进行了分离和定量研究，发现在正常人、急性肝炎、慢性肝炎和肝硬化患者中可分出ＡＡＤ３种组分，肝癌患者除出现这３种组分外，还可见亚组分出现。ＡＡＤ谱型正常人以ＡＡＤ－１为主；急性肝炎、慢性肝炎和肝硬化患者ＡＡＤ－１减少，ＡＡＤ－２和ＡＡＤ－３增加；肝癌患者则ＡＡＤ－１明显减少，ＡＡＤ－３显著升高。显示ＡＡＤ谱型分析有助于肝病的诊断或鉴别诊断。     

肝缺氧诱导因子-1α与肝癌发生、发展及治疗研究新进展

失控的增殖导致缺氧(hypoxia)是肝细胞癌(HCC)形成的特征性微环境.缺氧可促进癌细胞增殖、转移、血管新生、抑制癌细胞分化、凋亡以及对放化疗耐受.缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是介导生理性和病理性低氧反应的关键转录因子,在转录水平上调控百余种靶基因,参与调节血管新生及糖代谢等过程,与HCC生长、浸润、转移和预后等密切相关.近年来以HIF-1α为靶点的基因疗法如RNA干扰、反义技术和自杀基因技术等,成为HCC辅助治疗的新策略.本文综述了HIF-1α转录水平异常与HCC发生、发展及靶向HIF-1α基因治疗HCC的新进展.     

HS-GGT和AFP-mRNA联合分析在肝癌诊断中的临床价值

目的　探讨肝癌特异性γ 谷氨酰转移酶 (HS GGT)和AFP mRNA联合分析在肝癌诊断中的临床价值。方法　从肝癌患者外周血有核细胞中提取总RNA ,以逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)扩增分析AFP mMNA ,同时定量分析患者血HS GGT水平 ,比较它们在肝癌诊断中的临床价值。结果　所设计RT PCR扩增AFP基因片段大小为 15 9bp ,肝癌患者外周血AFP mRNA阳性率为60 3 % ,显著高于急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、肝外肿瘤及正常对照组 (P <0 0 1)。另外 ,AFP mRNA阳性率 ,在AFP浓度低于 5 0ng/ml肝癌组中为 5 7 1% ,在伴肝外转移的肝癌组中全数阳性。AFP mRNA阳性与肿瘤大小间无明显相关性 ,与HS GGT联合分析诊断肝癌的总阳性率达 93 6% 结论　HS GGT定量和外周血AFP mRNA分析有助于肝癌诊断、远处转移或术后复发的监测     

脑脊液酶测定对中枢神经系统白血病的诊断价值

中枢神经系统白血病(简称CNL)早期诊断尚乏特异方法。本文报告对63例白血病病人脑脊液(简称CSF)内腺苷脱氨酶(简称AD)和乳酸脱氢酶(简称LDH)活力及LDH同功酶谱的研究结果。     

HBV相关肝细胞癌患者核因子-κB异常情况及其临床意义

核因子-κB(NF-κB)是与免疫球蛋白κ轻链增强子B区结合,具有和某些基因上启动子区固定核苷酸序列结合而启动该基因转录的蛋白质,激活的NF-κB,在炎症相关性肝癌(HCC)中高表达,在肝细胞慢性炎症和癌变之间起桥梁作用[1].我们用酶联免疫吸附法(ELISA)及实时定量PCR法分析了人肝癌组织及肝病患者外周血中NF-κ B的表达,以探讨其在肝癌诊断、转移预测和鉴别诊断中的临床价值.     

HSB、GSTs和TNF-α联合检测诊断肝癌的比较分析

目的 探讨血清肝癌特异性γ－谷氨酰转移酶（ＧＧＴ）浓度在肝癌诊断与鉴别中的临床价值。方法 定量检测了肝癌、慢性肝病和肝外肿瘤患者血清中肝癌特异性ＧＧＴ区带（ＨＳＢ）活性,并同时检测谷胱苷肽－Ｓ－转换酶（ＧＳＴｓ）和肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）浓度,以比较分析它们在肝癌诊断与鉴别中的临床意义。结果 肝癌组ＨＳＢ和ＧＳＴｓ浓度均明显高于慢性肝病和肝外肿瘤组（ｐ〈０．００１）。ＴＮＦ－α浓度肝癌组明显     

干预磷脂酰肌醇蛋白多糖3基因转录联合抗肿瘤药物抑制肝癌细胞增殖的协同作用

目的探讨干预磷脂酰肌醇蛋白多糖(GPC)3基因转录和联合抗肿瘤药物对肝癌细胞增殖的抑制效果。方法构建4种GPC-3-shRNA质粒转染肝癌HepG2细胞,以realtime-PCR、Western Blot法观察GPC-3基因及蛋白表达水平,分析其与肝癌细胞增殖、凋亡的关系。计量资料两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果 4种转染质粒中shRNA1转染HepG2细胞效率85%,在mRNA水平的沉默效率为89.3%,GPC-3蛋白表达显著抑制(P0.01)。shRNA1干扰组72 h HepG2细胞抑制率71.1%,与阴性组比较差异有统计学意义(t=18.092,P0.001);shRNA1干扰组肝癌细胞发生生物学特性改变,迁移抑制率为89.1%,明显慢于阴性组,差异有统计学意义(t=8.326,P0.001);HepG2细胞运动抑制率为53.6%、侵袭抑制率60.1%,与阴性组比较差异均有统计学意义(t值分别为52.400、48.245,P值均0.001)。shRNA1干扰组β-catenin mRNA抑制率为46.9%,Gli1 mRNA上调率为7.4%,与对照组比较差异均有统计学意义(t值分别为30.108、-3.551,P值分别为0.001、0.009)。在24 h时,10μmol/L索拉非尼与shRNA1联合,对肝癌细胞抑制率为52.6%,100μmol/L索拉非尼与shRNA1联合,对肝癌细胞的抑制率为79.5%,与对照组比较差异有统计学意义(t值分别为23.314、50.352,P值均0.001)。索拉非尼对HepG2细胞的半数抑制浓度(IC_(50))值为(4.67±1.20)μmol/L、雷帕霉素为(7.85±2.00)nmol/L、厄洛替尼为(18.36±0.56)μmol/L,与shRNA1联合使用后HepG2细胞抑制率达95.11%。结论特异性shRNA干预GPC-3转录可抑制肝癌细胞增殖、迁移运动和侵袭能力,并诱导肝癌细胞凋亡,与抗肿瘤药物协同抑制癌细胞增殖,提示GPC-3可能是肝癌治疗有效靶点,联合靶向治疗将为肝癌提供更佳治疗策略。     

外周血白蛋白mRNA分析在肝癌诊断和转移监测中的价值

目的     

IGF-Ⅱ和IGF-Ⅱ-mRNA异常表达对肝癌诊断的价值

目的:探讨胰岛素样生长因子(IGF)-Ⅱ及IGF-Ⅱ-mRNA在肝癌组织中的表达特点及游离IGF-Ⅱ的临床价值。方法:以免疫组化法分析肝癌癌灶、癌周和远癌组织中IGF-Ⅱ的表达与胞内定位。从肝组织中制备总RNA,经随机引物和逆转录酶合成IGF-Ⅱ-cDNA,巢式聚合酶链反应扩增及DNA测序证实,分析IGF-Ⅱ-mR-NA的表达,并分析血清游离IGF-II水平。结果:肝癌组织IGF-Ⅱ表达呈强阳性,明显高于癌旁和远癌肝组织,分布呈胞浆包涵体样、全胞浆和核内三种形态。癌灶总RNA水平显著低于癌周与远癌组织;其IGF-Ⅱ灵敏度为2ng/L,扩增基因片段为170bp,癌灶和癌周组织中IGF-Ⅱ基因检出率,分别为100%和53.2%,远癌组织未见扩增片段。肝癌患者血游离IGF-II水平明显高于肝硬化和慢性肝炎患者。结论:IGF-Ⅱ及IGF-Ⅱ-mRNA的过度表达与肝癌形成有关,并有助于肝癌早期诊断。