转录因子PDX—1在猪胰干细胞体外诱导分化过程的表达及意义

目的：检测转录因子PDX－1在体外诱导胰干细胞分化过程中的表达，探讨PDX－1表达的意义。方法：自动胰岛分离系统分离胰腺组织，获得纯化的胰管上皮细胞，在有血清培养基（RPMI1640）中进行细胞原代培养，而后在无血清培养基（DMEM／F12）中加入表皮生长因子（EGF）和尼克酰胺（nicotinamide)促进胰管上皮细胞中的干细胞分化。Western Blotting检测化各个阶段贴壁细胞、衍生胰岛和成熟胰岛PDX－1蛋白表达，逆转录－多聚酶链反应（RT－PCR）检测PDX－1mRNA和上皮细胞标志抗原CK－19(cytokine-19)mRNA在分化各个阶段的表达。结果：转录因子PDX－1在分化的各上阶段表达逐渐增加，上皮细胞标志抗原CK－19在各个分化阶段表达逐渐减少。结论：转录因子PDX－1可能在胰干细胞分化衍生为胰岛的过程中起重要作用。     

TGF-1转染对胰岛生物学性状的影响

目的研究转化生长因子(transforming growth factor TGF-β1)对大鼠同种胰岛移植物体内外的内分泌功能及存活的影响.方法构建TGF-β1的真核表达载体pcDNA3-TGF,并将其转染纯化后的Wistar大鼠胰岛,RT-PCR检测TGF-β1和大鼠胰岛素(Insulin 1 Ins1)在实验组和对照组胰岛中的表达,放射免疫法(radioimmunological assay RIA)检测体外培养液中的胰岛素含量;链脲霉素(streptozotocin STZ)60mg/kg腹腔内注射制作SD大鼠模型,分别将实验组和空白对照组Wistar胰岛移植到受体SD大鼠的肾包囊下,观察其在体内逆转糖尿病的作用以及作用时间的长短,并检测受体大鼠的糖耐量.结果实验组胰岛有TGF-β1和Ins1的表达,而对照组仅有Ins1的表达;实验组体外培养液中的胰岛素含量在基础相和刺激相分别为(3.86±1.24)ng/ml和(8.43±1.59)ng/ml,对照组体外培养液中的胰岛素含量在基础相和刺激相分别为(4.13±1.45)ng/ml和(8.95±1.74)ng/ml,组间无显著性差异(P＞0.05),而组内有显著性差异(P＜0.05);实验组平均正常血糖维持时间(26.8±2.9d)比对照组(13.2±4.5d)显著延长.对照组糖耐量曲线均明显高于实验组.结论 TGF-β1对胰岛移植物的内分泌功能无损害作用,但是可以延长胰岛移植物体内存活时间.     

猪胰管上皮细胞体外诱导分化为胰岛的形态鉴定与功能测定

目的对成年猪胰管上皮细胞体外培养,促进增殖与分化,并对衍生胰岛进行形态鉴定和功能测定。方法在有血清培养基中行导管上皮细胞原代培养,无血清培养基中加入表皮生长因子和尼克酰胺诱导胰管上皮细胞分化,衍生胰岛行双硫腙(DTZ)染色,逆转录多聚酶链反应(RTPCR)检测胰岛素基因(Ins)和上皮细胞标志抗原(CK19)在衍生胰岛和成熟胰岛中表达,放射免疫法(RIA)测定衍生胰岛与成熟胰岛分泌胰岛素的功能。结果培养第28天细胞汇合并开始出芽形成胰岛样细胞团;衍生胰岛双硫腙染色阳性,同时表达Ins基因和CK19基因,成熟胰岛仅表达Ins基因;衍生胰岛在基础相胰岛素分泌量为(1.86±1.24)ng,刺激相为(4.43±1.59)ng,差异有显著性(P<0.05)。结论猪胰管上皮细胞在体外培养条件下可分化为胰岛,衍生胰岛表达β细胞表面标志并能分泌胰岛素。     

胰腺癌手术后经动脉化疗泵区域灌注疗法的作用

有研究表明 ,胰腺癌切除术后经股动脉插管行腹腔动脉灌注 5 Fu能抑制肝脏转移 ,并显著提高患者的长期生存率[1]。现将我们近年来开展的有关胰腺癌扩大切除术后 ,经动脉化疗泵行区域灌注化疗的初步结果报告如下。一、临床资料1.一般资料 :1995年 12月～ 2 0 0 1年 6月经扩大切除并存活的胰腺癌患者中 ,有 3 0例术中置动脉化疗泵 (至腹腔干 )行 5 Fu区域灌注化疗 (5 Fu组 ) ,另以 2 7例术后未行辅助治疗的患者作为对照组。对照组与 5 Fu组在年龄 (55.4±13 .9岁 ,58.8± 11.5岁 )、男女性别构成比 (16/ 11,15/ 15)、胰腺切除方式、肿瘤大小…     

转录因子PDX-1在猪胰干细胞体外诱导分化过程中的表达及意义

目的检测转录因子PDX-1在体外诱导胰干细胞分化过程中的表达,探讨PDX-1表达的意义.方法自动胰岛分离系统分离胰腺组织,获得纯化的胰管上皮细胞,在有血清培养基(RPMI1640)中进行细胞原代培养,而后在无血清培养基(DMEM/F12)中加入表皮生长因子(EGF)和尼克酰胺(nicotinamide)促进胰管上皮细胞中的干细胞分化.Western Blotting检测分化各个阶段贴壁细胞、衍生胰岛和成熟胰岛PDX-1蛋白表达;逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR) 检测PDX-1 mRNA和上皮细胞标志抗原CK-19(cytokine-19)mRNA在分化各个阶段的表达.结果转录因子PDX-1在分化的各个阶段表达逐渐增加,上皮细胞标志抗原CK-19在各个分化阶段表达逐渐减少.结论转录因子PDX-1可能在胰干细胞分化衍生为胰岛的过程中起重要作用.     

转化生长因子-β1对大鼠同种胰岛移植物的影响

目的　研究转化生长因子 β1 (TGF β1 )对大鼠同种胰岛移植物体内外的内分泌功能及存活的影响。方法　构建TGF β1的真核表达载体 pcDNA3 TGF ,并将其转染纯化后的Wistar大鼠胰岛 ,逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)检测TGF β1和大鼠胰岛素 (Ins1 )在实验组和对照组胰岛中的表达 ,放射免疫法 (RIA)检测体外培养液中的胰岛素含量 ;链脲霉素 (STZ) 60mg/kg体重腹腔内注射制作SD大鼠模型 ,分别将实验组和空白对照组Wistar胰岛移植到受体SD大鼠的肾包囊下 ,观察其在体内逆转糖尿病的作用以及作用时间的长短 ,并检测受体大鼠的糖耐量。结果　实验组胰岛有TGF β1和Ins1的表达 ,而对照组仅有Ins1的表达 ;实验组体外培养液中的胰岛素含量在基础相和刺激相分别为 (3 .86± 1 .2 4 ) μg/L和 (8.43± 1 .59) μg/L ,对照组体外培养液中的胰岛素含量在基础相和刺激相分别为 (4.1 3± 1 .45) μg/L和 (8.95± 1 .74) μg/L ,组间差异无显著性 (P>0 .0 5) ,而组内差异有显著性 (P <0 .0 5) ;实验组平均正常血糖维持时间 (2 6 .8± 2 .9)d比对照组的 (1 3 .2± 4 .5)d显著延长。对照组糖耐量曲线均明显高于实验组。结论　TGF β1对胰岛移植物的内分泌功能无损害作用 ,但是可以延长胰岛移植物体内存活时间     

49例胰腺癌血管浸润的术前评估与手术切除方法探讨

目的 对进展期胰腺癌血管浸润的程度、范围进行影像学评估及手术切除可行性判断并探讨其切除方法。方法 对经术前CT和MR／MRCP检查伴血管浸润的49例进展期胰腺癌进行影像学分析，根据临床及影像学特征确定手术指征，同时根据术中发现确定对受累血管的处理和手术方法。结果 49例伴血管浸润的进展期胰腺癌中，影像学评估无手术指征者6例，其余43例接受手术探查的病例中，施行肿瘤手术切除30例，切除率为69.8％，其中行血管切除者25例。结论 现代影像学技术有助于评估进展期胰腺癌血管浸润程度，对指导手术切除和术中受累血管处理方法有重要意义，改进手术方法有助于提高伴血管浸润的进展期胰腺癌的手术切除率。     

转录因子PDX-1在猪胰干细胞体外诱导分化过程中的表达及意义

目的 检测转录因子PDX-1在体外诱导胰干细胞分化过程中的表达,探讨PDX-1表达的意义。方法 自动胰岛分离系统分离胰腺组织,获得纯化的胰管上皮细胞,在有血清培养基(RPMI1640)中进行细胞原代培养,而后在无血清培养基(DMEM/F12)中加入表皮生长因子(EGF)和尼克酰胺(nicotinamide)促进胰管上皮细胞中的干细胞分化。Western Blotting检测分化各个阶段贴壁细胞、衍生胰岛和成熟胰岛PDX-1蛋白表达;逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测PDX-1mRNA和上皮细胞标志抗原CK-19(cytokine-19)mRNA在分化各个阶段的表达。结果 转录因子PDX-1分化的各个阶段表达逐渐增加,上皮细胞标志抗原CK-19在各个分化阶段表达逐渐减少。结论 转录因子PDX-1可能在胰干细胞分化衍生为胰岛的过程中起重要作用。