运用全染色体探针FISH技术进行罗伯逊易位携带者胚胎植入前诊断

目的运用全染色体探针荧光原位杂交技术(fluorescent in situ hybridization ,FISH)对14/21罗伯逊易位携带者的胚胎进行植入前遗传学诊断,达到优生目的.方法应用FITC、Texas标记的21/14全染色体探针对14/21罗伯逊易位携带者的胚胎活检后的单个卵裂球进行遗传学检测,选择正常信号或携带者信号核型胚胎进行移植.结果常规单精子显微注射-胚胎移植(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后获取胚胎12个,活检优质胚胎11个,杂交后有信号胚胎7个,其中1个正常胚胎,1个携带者胚胎;1个14单体胚胎,1个21单体胚胎,1个21三体胚胎,另2个胚胎活检后均为21号二体,无14号信号.结论运用14/21全染色体探针荧光原位杂交技术对14/21罗伯逊易位携带者的胚胎进行植入前遗传学诊断是能够将正常核型胚胎挑选出来进行移植,从而达到优生目的.     

体外受精周期中来源于单原核受精卵胚胎性染色体分析

目的：分析常规体外受精和单精子显微注射周期中来源于单原核受精卵胚胎性染色体的异常率。方法：应用FITC、Texas red标记的X/Y染色体着丝粒部位α卫星重复序列探针，对常规体外受精和单精子显微注射周期中来源于单原核受精卵的胚胎进行荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization,FISH）, 分析其性染色体的异常率和性染色体类型。结果：共分析来自常规体外受精和单精子显微注射周期中来源于单原核受精卵的胚胎111个。总胚胎固定率为92.80%，胚胎杂交率为95.15%。有杂交信号的常规体外受精后单原核受精卵发育来的胚胎中，胚胎性染色体二体率为54.35％，单体率为23.91％，嵌合体率为21.74％。有杂交信号的单精子显微注射后单原核受精卵发育来的胚胎中，胚胎性染色体二体率为34.62％，单体率为34.62％，嵌合体率为30.77％。结论：常规体外受精和单精子显微注射周期中来源于单原核受精卵的胚胎有高于正常的性染色体异常率，不利于进行胚胎移植；前者性染色体二体率显著高于后者。     

不同冷冻保护剂对人类精子冷冻复苏后活动能力的影响

目的:比较添加葡萄糖或蔗糖的冷冻保护剂对人类精子冷冻复苏后活动力的影响。方法:将50例志愿者的精液标本分别采用添加葡萄糖或蔗糖的保护剂冷冻,比较精子复苏后的活动力。结果:冷冻前,前向活动精子百分率为(58.4±5.7)%,活动率为(63.4±6.1)%,采用添加葡萄糖的冷冻保护剂冷冻复苏后的前向活动精子百分率为(43.8±7.6)%,活动率为(48.4±7.6)%;采用添加蔗糖的冷冻保护剂冷冻复苏后的前向活动精子百分率为(42.6±8.9)%,活动率为(48.0±8.5)%。冷冻前后精子的前向活动百分率和总活动率差异有统计学意义(P<0.01),采用2种不同的冷冻保护剂冷冻复苏后的精子前向活动百分率和总活动率没有统计学差异(P>0.05)。结论:冷冻对精子活动力损伤明显,添加蔗糖作为精子冷冻的保护剂是可行的。     

高育龄妇女胚胎植入前21号染色体非整倍体检测

目的运用荧光原位杂交技术(fluorescent in situ hybridization,FISH)对生育过21三体患儿的高育龄妇女的胚胎进行植入前遗传学诊断,达到优生目的.方法应用FITC标记的21号着丝粒探针对生育过21三体患儿的高育龄妇女的胚胎活检后单个卵裂球进行遗传学检测,选择正常信号或携带者信号核型胚胎进行移植.结果常规单精子显微注射-胚胎移植(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后获取胚胎4个,活检优质胚胎3个,杂交后每个卵裂球均出现3个21号染色体完整信号,认为3个胚胎均为21三体异常胚胎,故建议放弃移植,从而成功避免了21三体患儿的出生.结论运用21号染色体着丝粒探针荧光原位杂交技术对生育过21三体患儿的高育龄妇女的胚胎进行植入前遗传学诊断是可行的,同时也是必要的,是避免非整倍体患儿出生的重要途径.     

冷冻对人精子氧化应激水平、核DNA损伤的影响

目的 研究冷冻储存对精子形态、氧化应激水平和核DNA损伤的影响.方法 根据WHO的标准(1999年),随机选取正常精液样本、异常精液样本各30例.分别检测精子冷冻前后正常形态率、丙二醛(MDA)浓度和DNA损伤率.结果 ①两组精液精子冷冻前后变化:冷冻后正常精液组中精子正常形态率降低明显,MDA值升高显著(P<0.05);DNA损伤率升高,但差异无统计学意义.而冷冻后异常精液组中精子正常形态率明显降低,MDA值显著升高,DNA损伤率升高(P<0.05);②两组精液之间冷冻损伤的比较:冷冻对异常精液正常形态精子损伤、DNA损伤明显高于正常精液组(P<0.05);③精子正常形态率与MDA浓度呈负相关(r=-0.525),MDA浓度与DNA损伤率呈正相关(r=0.692).结论 冷冻可导致异常精液的正常形态率下降,脂质过氧化损伤、DNA损伤率升高.而在正常精液中则导致精子正常形态率的下降,脂质过氧化损伤的增加.     

活动精子总数与宫腔内人工授精妊娠率的关系

目的探讨处理前后的精液特征对IUI妊娠率的影响。方法收集分析342例不育不孕患者共372个IUI治疗周期,检测记录每个周期精液处理前后的各精液参数,并按照妊娠结果分成两组:妊娠组与非妊娠组,按照处理后精子活动总数(PTMS)分成3组:PTMS<10×106/ml,10×106/ml≤PTMS<20×106/ml,PTMS≥20×106/ml。比较各组间的精液参数和IUI妊娠率。结果372个IUI周期共获得62例妊娠,总周期妊娠率是16.67%,总病例妊娠率是18.13%。妊娠组与非妊娠组各精液参数无明显差别;PTMS<10×106/ml组获得的妊娠率明显低于后两组(P<0.05)。结论当PTMS>10×106/ml时,IUI治疗周期才有可能获得较为理想的妊娠率。     

卵母细胞发育潜能与颗粒细胞凋亡关系的初步研究

目的　探讨卵母细胞发育潜能与颗粒细胞凋亡之间的关系。　方法　将卵母细胞在体外培养 28~30 h后,取其颗粒细胞,采用TUNEL法进行凋亡率的分析,并与卵子的成熟情况和卵子的评分及形成胚胎结果进行对照。　结果　经培养后,随着卵母细胞成熟度的降低,凋亡率升高;而且随着卵母细胞评分和发育潜能的降低,颗粒细胞凋亡率逐渐升高。　结论　卵子发育潜能与颗粒细胞凋亡密切相关,通过测定颗粒细胞的凋亡率可预测未成熟卵母细胞的发育潜能。     

混匀上游法人工授精治疗抗精子抗体阳性不孕症患者的效果

目的研究对抗精子抗体阳性患者进行混匀上游法人工授精的治疗效果及影响各种人工授精结果的因素.方法通过检测实施人工授精患者夫妇双方抗精子抗体,并对其不孕年限、是否原发、子宫内膜厚度和类型等进行统计分析,结合用混匀上游法处理精液后实施宫腔内人工授精患者的人工授精结局,研究宫腔内人工授精对抗精子抗体阳性患者的治疗效果和各种影响人工授精结局的因素.结果统计人工授精治疗163个周期,妊娠39例,总周期妊娠率为23.93%.在抗精子抗体阳性夫妇和抗精子抗体全阴性夫妇之间妊娠率没有显著性差异.结论混匀上游法洗涤精子后行官腔内人工授精能去除抗精子抗体的影响.对至少一侧输卵管通畅患者实施的宫腔内人工授精成功率与不孕年限、是否为原发不孕无关.     

液氮蒸汽法、程序冷冻法冷冻精子复苏后活动能力比较

目的比较液氮蒸汽法和程序冷冻法冷冻保存的人类精子复苏后的活动能力。方法在同一种冷冻保护剂作用下,分别采用液氮蒸汽法和程序冷冻法对79份精液标本进行冷冻,比较复苏后精子的活动力。结果液氮蒸汽法冷冻的标本复苏后前向活动精子百分率和总活动率分别为43.2%±7.7%、52.2%±9.6%,用程序冷冻法冷冻者分别为44.2%±3.5%、52.9%±4.9%,两组相比,P均〉0.05;但与冷冻前的58.2%±5.6%、65.6%±5.7%相比均明显下降,P均〈0.05。结论采用液氮蒸汽法和程序冷冻法冷冻的人类精子复苏后活动能力相似,两种方法均可以用于常规的精子冷冻。     

表皮生长因子和促性腺激素对人类卵母细胞体外成熟的影响

目的 :研究表皮生长因子 (EGF)和不同浓度促性腺激素 (Gn)对未成熟卵母细胞体外成熟的影响。　方法 :将EGF添加至卵母细胞培养液中 ,观察EGF Gn联合应用与单独使用Gn对卵母细胞体外成熟的影响 ;分别改变绒毛膜促性腺激素 (hCG)和卵泡刺激素 (FSH)的浓度 ,观察不同浓度的hCG、FSH对卵母细胞体外成熟的影响。结果 :添加EGF可显著提高卵母细胞的体外成熟率 (P <0 .0 5 ) ;提高hCG和FSH的浓度对卵母细胞的培养、受精及卵裂无影响。　结论 :EGF可促进卵母细胞体外成熟 ,明显提高卵母细胞体外成熟率 ;提高Gn浓度对卵母细胞的培养无进一步的促进作用。