糖皮质激素受体在慢性吗啡耐受大鼠脊髓背角神经元凋亡中的作用

目的 评价糖皮质激素受体在慢性吗啡耐受大鼠脊髓背角神经元凋亡中的作用.方法 鞘内置管成功的健康雄性SD大鼠20只,体重300～350 g,随机分为4组(n=5):对照组(C组)、慢性吗啡耐受组(M组)、吗啡+糖皮质激素受体拮抗剂组(MR组)和吗啡+糖皮质激素受体激动剂组(MD组)分别于8:00和20:00鞘内注射生理盐水10μl、吗啡10μg、吗啡10μg+RU38486 2μg、吗啡10μg+地塞米松4μg,连续6 d.于每天8:00给药后30 min行甩尾实验,给药第7天处死大鼠,取L3～L5脊髓行TUNEL染色,光镜下观察脊髓背角神经元的凋亡情况,计算凋亡率.结果 地塞米松、RU38486分别对慢性吗啡耐受的形成起促进、抑制作用.与C组比较,M组和MD组脊髓背角神经元凋亡率升高(P＜0.05);与M组比较,MR组脊髓背角神经元凋亡率降低,MD组脊髓背角神经元凋亡率升高(P＜0.05).结论 糖皮质激素受体参与了慢性吗啡耐受形成中大鼠脊髓背角神经元凋亡的过程.     

地塞米松对慢性吗啡耐受大鼠脊髓背角神经元凋亡的影响

目的 探讨糖皮质激素受体参与慢性吗啡耐受的机制,以及地塞米松对慢性吗啡耐受大鼠脊髓神经元凋亡的影响.方法 20只健康雄性SD大鼠随机分为4组,分别为经鞘内给予生理盐水(C组)、吗啡(M组)、吗啡+糖皮质激素受体拮抗剂RU38486(M/R.组)和吗啡+糖皮质激素受体激动剂地塞米松(M/D组),1d 2次,连续6 d.采用甩尾实验评价大鼠热痛敏,给药后第7天取L3～L5脊髓进行TUNEL染色.结果 M组大鼠在鞘内给予吗啡后形成较稳定的吗啡耐受,地塞米松对吗啡耐受的形成有促进作用.M组脊髓背角凋亡细胞数较C组增加(P<0.05).与M组比较,M/D组脊髓背角凋亡细胞数显著增加(P<0.05).结论 脊髓神经元凋亡可能是慢性阿片耐受的神经基础,糖皮质激素受体可能在阿片耐受脊髓神经细胞凋亡过程中发挥作用.     

补中益气汤治疗脾气虚证大鼠分子生物学机制实验研究

目的:通过观察脾气虚证模型大鼠回肠组织中线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅳ活性与Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的变化,并与治疗组进行对比,探讨补中益气汤治疗脾气虚证的作用机理。方法:选取SPF级健康大鼠42只,造模采用经典的复合因素造模方法,用随机分组法分为健康组、模型组及治疗组,每组14只大鼠。用比色法检测各组大鼠回肠组织中线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅳ活性与Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性。结果:(1)模型组与健康组相比,线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅳ活性与Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性明显降低(P0.05)。(2)治疗组与模型组相比,线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅳ活性与Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性明显增高(P0.05)。结论:脾气虚证的大鼠线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅳ与Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性明显降低,补中益气汤能够改善以上指标的异常状态,提示补中益气汤治疗脾气虚证的作用机制为修复能量代谢障碍。     

脾气虚证大鼠病理表现内在机制的实验探索

目的:观察不同组别大鼠回肠组织中线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅳ的活性、GSH-Px(谷胱甘肽过氧化物酶)的活性与MDA(丙二醛)的含量的区别与变化,探讨脾气虚证表现出相应症状的内在机制。方法:选取SPF级大鼠40只,选用经典复合因素造模方法与随机分层法将大鼠分为健康组、脾气虚组及中药组。通过比色法来检测每组大鼠回肠组织中线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅳ活性,GSH-Px活性及MDA含量。结果:(1)脾气虚组与健康组相比,线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅳ活性明显降低(P0.05),GSH-Px活性明显降低(P0.05),MDA含量明显增高(P0.05)。(2)中药组与脾气虚组相比,线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅳ活性明显增高(P0.05),GSH-Px活性明显增高(P0.05),MDA含量明显降低(P0.05)。结论:脾气虚证的大鼠线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅳ活性明显降低,GSH-Px活性明显降低,MDA含量明显增高,通过补中益气汤治疗,各项指标都有恢复正常的趋势,提示脾气虚证的内在机制为能量代谢障碍与自由基损伤,而补中益气汤能在一定程度上恢复能量代谢并修补自由基损伤。     

胞外信号调节激酶信号通路在大鼠慢性吗啡耐受形成中的作用

目的 探讨胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在慢性吗啡耐受形成中的作用.方法 鞘内置管成功的雄性SD大鼠30只,体重300～350 g,随机分为3组(n=10).置管后7 d开始给药,对照组(C组)鞘内注射0.4%二甲基亚砜10μl,慢性吗啡耐受组(M组)给予吗啡10μg,ERK上游激酶抑制剂+吗啡组(P组)于给予吗啡前30 min给予丝裂原激活蛋白激酶激酶抑制剂PD98059 10μg,2次/d,连续7 d.每天第1次给药后30 min及最后一次给药后1 d时测定甩尾潜伏期,并计算最大镇痛效应百分比.最后一次测定甩尾潜伏期后取脊髓L3-5节段,采用Western blot法和免疫荧光法测定脊髓背角μ受体和磷酸化ERK1/2(p-ERK/1/2)的表达水平.结果 M组和P组随着给药时间的延长,形成了吗啡耐受,而P组吗啡耐受程度轻于M组(P＜0.05).与C组比较,M组脊髓背角μ受体表达下调,p-ERK1/2表达上调(P＜0.01).与M组比较,P组脊髓背角μ受体表达上调,p-ERK1/2表达下调(P＜0.01).结论 ERK信号通路参与了大鼠慢性吗啡耐受的形成.     

糖皮质激素受体通过细胞外信号调节激酶途径参与吗啡耐受机制

目的 探讨糖皮质激素受体参与吗啡耐受形成的机制及细胞外信号调节激酶(ERK)信号途径在其中的作用.方法 将40只健康雄性SD大鼠行鞘内置管后随机分为4组(n=10),盐水对照组(C组)鞘内注射生理盐水lOμl;慢性吗啡耐受组(M组)鞘内注射吗啡10μg;糖皮质激素受体拮抗剂组(MR组)鞘内注射吗啡10μg,再注射糖皮质激素受体拮抗剂RU38486 2μg;糖皮质激素受体激动剂组(MD组)鞘内注射吗啡10μg,再注射糖皮质激素受体激动剂地塞米松4μg,鞘内注射每种药物均为2次/d,连续7 d.采用甩尾实验评价大鼠热痛觉,于给药后第8天取出腰膨大处脊髓分别进行Western印迹检测μ阿片受体(MOR)、糖皮质激素受体(GR)、磷酸化ERK(pERK)蛋白表达及TUNEL染色.结果 地塞米松和RU38486分别对吗啡耐受诱导的热痛敏具有促进和抑制作用.与M组(凋亡细胞数5.4±1.1,蛋白表达MOR 37±5,GR 20±6,pERK1 39±4,pERK2 41±5)比较,MR组凋亡细胞数(3.2±0.4)显著少(P<0.01);MD组(16.0±1.6)显著多(P<0.01);MR组MOR(28±5)、GR(12±6)、pERK1(33±4)、pERK2(34±5)蛋白表达均下调(均P<0.01);MD组MOR(55±6)、GR(28±9)、pERKl(49±6)、pERK2(59±5)蛋白表达均上调(均P<0.01).结论 糖皮质激素受体的活性可影响吗啡诱导的脊髓神经凋亡及吗啡耐受中脊髓pERK的表达.

Abstract：

Objective To investigate the mechanism of glucocorticoid receptors(GR)participating in morphine tolerance development via the extracellular signal-regulated kinase(ERK)signal pathway.Methods Forty healthy male SD rats were implanted with intrathecal catheters and then randomized into 4 groups:Group C received an intrathecal injection of 10 μl saline,Group M 10μg morphine,Group MR 10μg morphine followed by 2μg GR antagonist RU38486 and Group MD 10μg morphine followed by 4μg GR agonist dexamethasone(DEX)respectively.Each intrathecal drug was administered twice daily for 7 days.Tail-flick test was employed to evaluate the thermal hyperalgesia.After tail-flick test at Day 8,the lumbar intumescentias were isolated by Western blot to examine the protein expressions of Mu opioid receptor(MOR).GR and pERK.And terminal deoxynucleotidyl transferase mediated X-dUTP nick end labeling(TUNEL)stain was performed.Results DEX and RU38486 enhanced and inhibited morphine induced hyperalgesia to heat respectively.Compared with Group M(count of spinal dorsal horn apoptotic cells 5.4±1.1,protein expression:MOR 37±5,GR 20±6,pERK1 39±4,pERK2 41±5),apoptotic cells decreased in Group MR(3.2±0.4)(P<0.01)and increased in Group MD (16.0±1.6)(P<0.01);the protein expressions of MOR(28±5),GR(12±6),pERK1(33±4)and pERK2(34±5)were down-regulated in Group MR(P<0.01)while up-regulated in Group MD(55±6,28±9,49±6,59±5)(P<0.01).Conclusion The activity of glucocorticoid receptors affects the morphine-induced spinal neural apoptosis and the expression of spinal pERK in morphine tolerance.     

VR全景技术在分娩镇痛教学及科普宣传中的应用

<正>分娩是一种正常的生理过程,但分娩期间的剧烈疼痛（产痛）可增加产妇焦虑、恐惧等不良情绪,常引起母体强烈的应激反应,对母体和胎儿造成不良影响,故倡导分娩镇痛一直是现代医学领域的重要议题之一。然而,目前我国分娩镇痛的普及率、产妇及家属的接受度均较低。医务人员熟练掌握分娩镇痛技术,产妇及家属接受与认可分娩镇痛技术,是分娩镇痛得以广泛开展的关键。