高效液相色谱法与薄层扫描法测定女贞子中齐墩果酸含量的比较

目的 研究用高效液相色谱测定女贞子中齐墩果酸含量的方法,并与薄层扫描色谱法比较.方法 色谱柱为kroma-sil C18(5μm,250mm x4.6 mm);柱温30℃;流动相甲醇-水(85:15);流速0.7 ml·min-1;检测波长为204 nm.结果 齐墩果酸在0.645 6～4.304μg范围内线性关系良好,r=0.999 9(n=5),平均回收率为101.8%,RSD=0.75%.结论 高效液相色谱法比薄层扫描色谱法更灵敏、简便、准确,精密度好.     

大孔吸附树脂纯化丹参酚酸的研究

目的:优选大孔吸附树脂纯化丹参酚酸的工艺条件。方法:以丹酚酸B的含量为指标,对大孔吸附树脂型号、吸附条件、洗脱条件进行了考察。结果:最佳工艺条件为采用HPD-300大孔吸附树脂,最大上样量以丹酚酸B计为172.40 mg.g-1干树脂,pH 3.5,以70%乙醇3倍柱体积洗脱,吸附-洗脱过程中丹酚酸B的平均保留率可达88.11%,纯化后丹酚酸B含量为72.80%。结论:该工艺可用于纯化富集丹酚酸类成分。     

田黄方抑制ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化作用及机制研究

目的基于1-磷酸鞘氨醇(S1P)/1型1-磷酸鞘氨醇受体(S1PR1)通路探讨田黄方抑制ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的作用及相关机制。方法将40只ApoE~(-/-)小鼠随机分为模型组、田黄方低剂量组(1.5 g/kg)、田黄方高剂量组(4.5 g/kg)和阿托伐他汀组(10 mg/kg),每组10只,另选具有相同遗传背景的同龄野生型C57BL/6J小鼠10只为对照组。模型组与药物干预组均给予高脂饲料喂养8周,对照组给予普通饲料喂养。干预组每日灌胃相应药物,对照组与模型组给予等量生理盐水灌胃。12周后,取小鼠血清,分离主动脉,保存于-80℃冰箱。全自动生化分析仪检测血清中TG、TC、HDL-C、LDL-C水平,高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)检测血清中S1P含量;油红O染色法观察主动脉组织形态学变化;RT-PCR法检测肝脏与胆固醇逆转运相关蛋白CD36、ABCA1、SR-BI、LXRa和S1PR1 mRNA表达情况。结果模型组主动脉管腔内及主动脉根部可见较大的AS斑块形成,与模型组比较,干预组主动脉管腔内及主动脉根部的AS斑块面积显著减小(P0.05)。与对照组比较,模型组小鼠血清中TG、TC、LDL-C水平及CD36 mRNA表达升高(P0.01),HDL-C、S1P水平及ABCA1、SR-BI、LXRa和S1PR1 mRNA表达降低(P0.01)。与模型组比较,各给药组TG、TC、LDL-C水平及CD36 mRNA表达降低(P0.05,P0.01),HDL-C水平及ABCA1、SR-BI、LXRa mRNA表达升高(P0.05,P0.01)。结论田黄方具有调节血脂和抗AS的作用,其机制可能与其调控S1P-S1PR1通路介导胆固醇逆转运有关。     

基于肠道菌群-TβMCA-FXR轴探讨田黄方对老年脂代谢紊乱小鼠作用机制北大核心CSCD

目的:从肠道菌群角度探讨中药复方田黄方改善老年高脂血症小鼠脂代谢紊乱的作用机制。方法:3 w~4 w龄雄性C57BL/6J小鼠正常饮食喂养至12月成自然衰老小鼠,喂饲高脂饮食14 w构建老年高脂血症模型,给予田黄方提取物100 mg/kg干预10 w,正常对照组予普通饲料喂养至试验结束。试剂盒检测小鼠血清和肝脏总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)含量、胆盐水解酶(BSH)活力,靶向代谢组学联合16S rDNA测序分析胆汁酸代谢谱以及肠道菌群结构,Western Blot、PCR法检测法尼醇X受体(FXR)、蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP1)、胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)、成纤维生长因子15(FGF15)的mRNA和蛋白表达情况。结果:与模型对照组相比,田黄方提取物100 mg/kg组小鼠肝脏TC、TG含量显著下降(P<0.01),肠道菌群发生重塑,大肠埃希菌属(Escherichia)、阿克曼菌属(Akkermansia)、拟杆菌属(Bacteroides)丰度明显减少(P<0.05或P<0.01)、BSH酶活力下降(P<0.01),肠道中游离胆汁酸脱氧胆酸(DCA)、鹅脱氧胆酸(CDCA)和石胆酸(LCA)含量降低(P<0.01);与模型对照组相比,牛磺-β-鼠胆酸(TβMCA)20 mg/kg组小鼠血清及肝脏TC、TG含量显著下降(P<0.01),回肠和肝脏Fxr、Fgf15 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05),Cyp7a1 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05)。结论:田黄方通过调节肠道菌群,抑制BSH活性,使TβMCA水平增加进而抑制肠道FXR、FGF15表达,同时下调肝脏FXR和SHP表达,上调CYP7A1表达,导致胆汁酸合成增加,TC降低。田黄方通过肠道菌群-TβMCA-FXR轴发挥降脂作用。     

UPLC-TOF-MS与网络药理学联合探讨人参改善胰岛素抵抗的作用机制＊

目的 运用网络药理学研究人参改善胰岛素抵抗（Insulin resistance，IR）的多成分、多靶标、多途径作用机制。方法 通过超高效液相色谱与四极杆飞行时间质谱联用（Ultra performance liquid chromatography quadrupole-time-of-flight hybrid mass spectrometry，UPLC-Q-TOF-MS）分析人参中的主要化学成分，使用DAVID数据库进行基因本体论（Gene ontology，GO）分析和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）通路分析，并运用Cytoscape 3.6.1软件绘制网络互作图，imageGP工具绘制GO气泡图，使用Vina软件进行分子对接预测。结果 研究得到人参改善IR作用的41个关键活性成分和26个关键靶点，GO、KEGG通路富集和Vina分子对接分析发现，人参可能主要通过人参皂苷Rg1、人参皂苷Rd、人参二酮和25-羟基原人参二醇等活性成分，作用于MAPK1、VEGFA、PIK3R1、NR3C1靶点，调节mTOR信号通路、Toll样信号通路、胰岛素通路等信号通路发挥改善IR作用。结论 人参改善IR体现了多成分、多靶点、多途径的作用特点，为进一步研究人参改善IR作用药效物质基础和作用机制提供了新的思路和方法。     

复方贞术调脂胶囊水提液精制方法研究

目的优选复方贞术调脂胶囊水提液精制方法。方法以总酚酸、总多糖、丹酚酸B含量及总固体得率为指标,比较壳聚糖絮凝法、超滤法和水醇法三种精制方法对复方贞术调脂胶囊水提液的精制效果。结果采用壳聚糖絮凝法进行精制,水提液中丹酚酸B、总多糖及总酚酸转移率较高,分别为90.37%,93.16%,94.39%,总固体得率为31.5%。结论壳聚糖絮凝法工艺简单,有效成分转移率较高,可用于复方贞术调脂胶囊水提液的精制。     

田黄方对高脂饮食诱导小鼠肾脏损伤的改善作用及机制研究

目的 探究田黄方(THF)对高脂饮食诱导C57BL/6J小鼠肾脏损伤的改善作用及机制.方法 将SPF级的C57BL/6J雄性小鼠分为正常组、模型组、田黄方组,高脂饮食诱导5个月及给药干预6周;采用H&E染色观察小鼠肾脏组织病理情况;生化检测试剂盒检测肾脏匀浆脂代谢和氧化应激状态指标:乳酸脱氢酶(LDH)、低密度脂蛋白胆...     

复方贞术调脂方对饮食性高脂血症大鼠肝脂酶的作用

目的:研究复方贞术调脂方(FTZ)对饮食性高脂血症大鼠肝脂酶的调节作用及其作用机理.方法:雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组、FTZ高、中、低剂量组和阳性药物非诺贝特组.正常组喂普通饲料,模型组喂普通饲料并给予脂肪乳剂灌胃(10mL/kg),给药组给予脂肪乳剂灌胃4h后灌胃给予相应的药物.观察动物的血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)变化;比色法检测肝组织中肝脂酶(HL)活性、荧光定量PCR法测定肝组织HL的mRNA表达水平、ELISA法检测肝组织中HL蛋白含量.结果:大鼠灌胃高脂乳剂8 w后,模型组大鼠TC、TG、LDL-C均较正常对照组明显升高,而不同剂量FTZ组的TC、TG、LDL-C均低于模型组,并呈明显的剂量依赖性;模型组大鼠HL的mRNA表达、蛋白量及其酶活性则显著低于正常;FTZ能使高脂饮食引起的HL的mRNA和蛋白表达及其酶活性降低,与正常对照组无显著差异.结论:FTZ对HL的mRNA和蛋白表达及酶活性均有调节作用,HL是FTZ调节血脂的重要作用靶点.这可能是其调血脂、抗动脉硬化的一个重要作用机制.     

透析-色谱联用技术研究黄连生物碱与牛血清白蛋白的结合作用

目的:研究黄连中与牛血清白蛋白(BSA)有结合作用的潜在活性成分。方法:采用平衡透析与高效液相色谱联用技术筛选黄连中与BSA有结合作用的成分;考察BSA浓度、缓冲液pH值对黄连生物碱与BSA结合作用的影响;比较黄连中各生物碱单体与BSA单独作用和黄连总生物碱与BSA作用的区别。结果:黄连中共有7个化学成分与BSA结合作用明显,通过对照品对照,其中6个成分被分别鉴定为非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马亭及盐酸小檗碱;各生物碱单独结合作用强于它们在黄连中混合存在的结合作用,各生物碱在与BSA结合过程中存在竞争作用。结论:蛋白结合-平衡透析-高效液相色谱法联用可有效、快速地预测黄连中多种成分在体内的吸收情况,筛选其潜在活性成分,且能体现中药整体作用的特点,为其药效物质基础的进一步研究提供依据。