过表达缺氧诱导因子1α影响前列腺癌血管生成的体内研究

目的:观察转染缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在体内环境下对人前列腺癌血管形成的影响,并探讨其分子机制。方法:对构建的转染HIF-1α人前列腺癌LNCaP细胞(LNCaP/HIF-1α)复苏后培养,ELISA法检测转染前后培养液上清PSA水平;流式细胞术检测细胞周期;将转染前后的LNCaP细胞建立免疫裸鼠皮下肿瘤模型,观察肿瘤生长情况;收集肿瘤标本后针对肿瘤血管生成相关蛋白血管内皮生长因子(VEGF),诱导型一氧化氮合酶(iN-OS),促血管生成素2(Ang-2)行免疫组化染色。结果:与LNCaP细胞相比,转染HIF-1α的人前列腺癌LNCaP细胞培养液PSA水平明显降低(t=8.243,P<0.05);流式细胞术显示其更具有增殖活性。体内实验显示皮下肿瘤成瘤率提高,成瘤时间提前。LNCaP/HIF-1α免疫组化研究显示VEGF、iNOS、Ang-2表达较LNCaP组增强。结论:在体内环境下,HIF-1α过表达能够诱导人前列腺癌LNCaP细胞血管形成相关蛋白VEGF、iNOS表达上调,提高肿瘤血管形成能力。并通过诱导肿瘤血管形成来增强肿瘤的侵袭转移能力;体内外实验显示HIF-1α可能对人前列腺癌LNCaP细胞Ang-2表达不产生影响,而在体内环境下Ang-2表达受其他因素调控。     

Smad4在人前列腺癌细胞系LNCaP和ARCaP中的差异表达及意义

目的:探讨TGF-β/Smads信号转导的核心Smad4在前列腺癌转移潜能获得中的作用及可能的机制。方法:用Millicell体外侵袭试验观察LNCaP和ARCaP系IF-11、IA-8细胞株转移潜能的差异情况,分别应用Western印迹法和逆转录PCR鉴定这3种细胞株中Smad4蛋白及mRNA的差异表达。结果:ARCaP系IF-11、IA-8细胞株的体外侵袭潜能明显高于LNCaP细胞(P<0.01);但Smad4蛋白在低转移潜能的LNCaP细胞中高表达,而在高转移潜能的IF-11、IA-8中表达缺失(P<0.01),Smad4 mRNA表达结果与蛋白一致。结论:Smad4在转移潜能不同的前列腺癌细胞系间存在差异表达,Smad4表达缺失可能是晚期前列腺癌发生侵袭转移的机制之一。     

膀胱癌细胞RT4和253J中转移相关蛋白的差异表达及意义

目的 检测转移相关蛋白上皮型钙黏素(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)在膀胱癌细胞RT4和253J中的表达,从细胞黏附性和骨架蛋白角度探讨膀胱癌恶性进展的分子机制.方法 用Western blot法测定RT4和253J两种细胞中E-cadherin和Vimentin的表达差异,Millicell小室检测RT4和253J的体外侵袭能力,分析RT4和253J的细胞特性.结果 E-cadherin在RT4细胞中高表达、在253J细胞中低表达,而Vimentin在RT4细胞中表达缺失、在253J细胞中表达很高;Millicell证实253J细胞穿膜数较RT4细胞显著增多.结论 人膀胱癌细胞RT4和253J的E-cadherin、Vimentin表达及两种细胞的侵袭潜能差异无统计学意义,提示这两种蛋白的表达差异在促进或抑制膀胱癌的恶性进展中起重要作用.

Abstract：

Objective To detect the expression of metastasis-associated proteins in bladder cancer cells RT4 and 253J and explore the molecular mechanisms of malignant transition of bladder cancer. Methods The expression of E-cadherin and Vimentin in RT4 and 253J cells was detected by Western blotting.Millicell polycarbonate filter was used to analyze the invasive potency of RT4 and 253J cells. Results E-cadherin was detected with high expression in RT4 cells, whereas a very low expression in 253J cells:Vimentin was not detected in RT4 cells, but a high expression in 253J cells. Conclusion There was remarkable difference in the expressions of E-cadherin and Vimentin in RT4 and 253J cells, and there was different invasion characteristic in these two cell liness. E-cadherin and Vimentin play a key role in the malignant transition of bladder tumor.     

食管癌不同治疗方式对患者生命质量的影响

目的:研究食管癌单纯手术和单纯放射治疗对患者生命质量的影响.方法:用改良 EORTC QLQ C-30法对24例食管大部切除手术与50例单纯放射治疗的患者进行生命质量测评并比较.结果:食管癌手术后与单纯放射治疗在情感功能、认知功能、睡眠症状、吞咽症状、气促、腹泻、返流症状六个维度方面差别有统计学意义(P<0.05),其他维度差别无统计学意义.结论:食管癌手术治疗情感功能和认知功能优于放疗;睡眠症状和吞咽症状少于放疗;气促、腹泻、返流症状得分多于放疗.手术治疗患者的生命质量在总体上优于单纯放疗.     

雄激素受体在不同激素依赖特性的前列腺癌细胞株中的表达及活性

目的:探讨雄激素受体(AR)在前列腺癌激素依赖特性转变过程中的可能作用.方法:分别应用Western Blot和RT-PCR法检测四种前列腺癌细胞株(LNCaP,C4,C4-2及C4-2B)的AR蛋白表达差异和转录活性差异状况,并初步分析其在前列腺癌雄激素依赖特性转化过程中所发挥的作用.结果:AR在雄激素依赖的低转移性细胞株LNCaP中的蛋白表达量和转录活性最低,同时AR在雄激素非依赖的高转移性细胞株C4,C4-2及C4-2B细胞株中的蛋白表达、转录活性却逐渐增高.结论:AR在雄激素依赖特性和转移潜能不同的前列腺癌细胞株之间确实存在着有意义的差异表达,而这种表达差异可能在影响前列腺癌激素依赖特性转变过程中发挥重要作用.     

核因子κB抑制蛋白α在膀胱癌细胞系的表达与上皮-间质转化及体外侵袭能力负相关

目的探讨核因子-κB抑制蛋白α(IκBα)在不同膀胱癌细胞系的表达与上皮-间质转化(EMT)及肿瘤细胞体外侵袭能力的关系。方法 Western blot法比较人膀胱癌RT4细胞、5637细胞、235J细胞、J82细胞、T24细胞IκBα、上皮性钙黏素(E-cadherin)、神经钙黏素(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达差异;通过TranswellTM实验比较5种细胞体外侵袭能力的差异;显微镜下观察并比较5种细胞形态学差异。结果 RT4细胞和5637细胞具有上皮细胞的形态学特征,253J细胞、J82细胞和T24细胞具有间质细胞的形态学特征。RT4细胞和5637细胞具有较高的E-cadherin表达水平,但不表达vimentin和N-cadherin。253J细胞、J82细胞和T24细胞E-cadherin表达部分(253J)或完全(J82、T24)缺失,但vimentin和N-cadherin表达水平较高。RT4细胞和5637细胞的体外侵袭能力明显弱于253J细胞、J82细胞和T24细胞。RT4细胞和5637细胞IκBα表达水平明显高于253J细胞、J82细胞和T24细胞。结论 IκBα在膀胱癌细胞的表达水平与EMT及体外侵袭能力负相关。     

转化生长因子β对前列腺癌LNCaP细胞株侵袭转移相关蛋白表达的影响及意义

目的:研究在体外培养条件下转化生长因子β(TGF-β)对前列腺癌LNCaP细胞株侵袭转移相关蛋白表达的影响,初步探讨TGF-β在前列腺癌侵袭、转移过程中的作用及可能的机制。方法:利用TGF-β干预处于对数生长期的前列腺癌LNCaP细胞,Western印迹法分别检测不同时间段细胞上皮型钙粘素、神经型钙粘素及波形蛋白的表达情况。结果:LNCaP细胞在TGF-β干预后,细胞侵袭转移的标志性蛋白神经型钙粘素、波形蛋白表达显著上调,以干预后12h最为明显;而上皮型钙粘素表达无明显改变。结论:TGF-β可能通过诱导低转移潜能的前列腺癌LNCaP细胞发生上皮细胞间质性转化,增强PCa的侵袭、转移能力。     

缺氧诱导因子1α过表达对前列腺癌细胞血管生成能力的影响

目的：观察转染缺氧诱导因子1α（HIF-1α）对人前列腺癌细胞血管形成相关蛋白的影响,并探讨其分子机制。方法：用脂质体Lipofectamine2000包装重组真核表达载体pCDNA3.1（-）/HIF-1α后转染人前列腺癌细胞LNCaP,600μg/ml G418筛选稳定表达的抗性克隆。免疫荧光及Western印迹法鉴定HIF-1α过表达,Western印迹法检测血管形成相关蛋白血管内皮生长因子（VEGF）、iNOS、促血管生成素2（Ang-2）。结果：与未转染细胞LN-CaP相比,转染细胞LNCaP/HIF-1α中出现明显的HIF-1α蛋白条带,并激发出较强荧光,VEGF、iNOS表达增加,Ang-2未见明显变化。结论：HIF-1α过表达能够诱导LNCaP细胞血管形成相关蛋白表达增多,进而增强其体外血管形成能力。     

Gleason评分为7的前列腺癌分子生物学分析

Gleason评分为7的前列腺癌患者的生物学特性不尽相同，其是否存在着不同的分子生物学遗传模式尚未清楚。研究者采用多色FISH检测分析了44名经过活检确诊为前列腺癌的患者染色体的改变，其中20个患者Gleason评分为3＋4（A组），24例患者Gleason评分为4＋3（B组）。结果显示。A组中2例患者（10．0％）特异性地获得8q24，9例患者特异性的丢失8p22，但未发现既丢失8p22又同时获得8q24的病例；B组（4＋3）中14例患者（58．3％）有8p22的特异性丢失，6例患者（25％）同时有8022的丢失又有8q24的获得。     

食管癌不同治疗方式对患者生命质量的影响

目的：研究食管癌单纯手术和单纯放射治疗对患者生命质量的影响。方法：用改良EORTC QLQ C30法对24例食管大部切除手术与50例单纯放射治疗的患者进行生命质量测评并比较。结果：食管癌手术后与单纯放射治疗在情感功能、认知功能、睡眠症状、吞咽症状、气促、腹泻、返流症状六个维度方面差别有统计学意义（P〈0．05）,其他维度差别无统计学意义。结论：食管癌手术治疗情感功能和认知功能优于放疗;睡眠症状和吞咽症状少于放疗;气促、腹泻、返流症状得分多于放疗。手术治疗患者的生命质量在总体上优于单纯放疗。