胞嘧啶脱氨酶基因在消化道肿瘤基因治疗中的应用

本综述了胞嘧啶脱氨酶基因的结构、功能及克隆方法等方面的基本内容，着重综述了近几年它在肿瘤基因治疗研究中通过药物前体转换机制杀伤肿瘤细胞的重要作用，并对它所表现出的肿瘤杀伤效果机制如旁观效应等进行了分析，同时对其靶向表达及特异性抑制问题进行了探讨。     

恶性肿瘤基因治疗进展

基因治疗最主要的对象之一是恶性肿瘤,因为肿瘤常规治疗的方法如手术、放疗及化疗等由于缺乏特异性和对正常组织毒性太大而受到限制。基因治疗针对肿瘤发生的遗传基础,容许选择性地破坏肿瘤细胞,同时减少系统毒性;而且肿瘤基因治疗基本上不用考虑社会伦理问题,可选用的治疗基因较多,实验模型易建立,患者及家属易接受及临床治疗也迫切需要。因此,尽管基因治疗是由遗传病开始,但肿瘤基因治疗后来居上,发展迅速。自1989年至1996年美国食品及药品管理局(FDA)批准基因治疗进入临床试验的治疗方案已有120多项,而肿瘤基因治疗方案占80％以上。     

胞嘧啶脱氨酶基因的体外前药转换胃癌细胞的杀伤作用研究

目的建立胃癌组织细胞自杀基因体外前药转换基因治疗方法。方法和结果首先将含ＣＤ基因的重组逆转录病毒载体ｐＣＤ２在ＰＡ３１７细胞中包装、筛选、收获病毒上清及进行病毒滴度测定后，体外转导Ｍ８５胃癌细胞，以ＰＣＲ方法证明ＣＤ基因稳定整合到宿主细胞基因组中，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析了ＣＤ基因的表达；转基因胃癌细胞在前药５－ＦＣ作用下呈现明显的选择性生长抑制效应。且观察到强效的“旁观者效应”。结论为胃癌组织基因治疗提供了极有意义的资料。     

p53基因的变异在遗传性非息肉病性结直肠癌发病中的作用

目的：研究p53基因在遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)中的表达，以了解其在HNPCC发病中的作用。方法：标本取自13个严格符合Amsterdam标准的HNPCC家系的22例大肠癌、10例良性肠道病变及20例散发性大肠癌病人的肿瘤组织石蜡切片。采用免疫组化方法进行p53基因表达研究，其结果应用SPSS10．0软件进行分析。结果：63．7％的HNPCC病人中p53免疫组化呈阴性表达，仅27.2％呈阳性表达，说明在HNPCC病人中p53多呈野生型存在；而在散发性大肠癌中，90％病人p53呈阳性表达，两组比较，差异有显著性。结论：p53的变异在HNPCC发病中可能不起主导地位。p53阴性的大肠癌病例应进一步随访研究其是否属HNPCC家系。     

胞嘧啶脱氨酶基因在消化道肿瘤基因治疗中的应用

本文综述了胞嘧啶脱氨酶基因的结构、功能及克隆方法等方面的基本内容,着重综述了近几年它在肿瘤基因治疗研究中通过药物前体转换机制杀伤肿瘤细胞的重要作用,并对它所表现出的肿瘤杀伤效果机制如旁观者效应等进行了分析,同时对其靶向表达及特异性抑制问题进行了探讨。     

胞嘧啶脱氨酶基因对胃癌细胞的杀伤作用

目的探讨胞嘧啶脱氨酶基因对胃癌细胞的杀伤作用。方法应用胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因,通过逆转录病毒载体转入人胃癌细胞Ｍ８５中,经０．４ｍｇ／ｍｌ的Ｇ４１８筛选阳性克隆扩增后进行前药５ＦＣ敏感试验。结果转ＣＤ自杀基因的Ｍ８５细胞较亲代Ｍ８５细胞对前药的敏感性显著增高（Ｐ＜０．０５）。体外实验中还观察到,前药在对转自杀基因的Ｍ８５细胞产生杀伤作用同时,还对与其共培养的亲代Ｍ８５细胞产生明显的杀伤作用,即“旁观者效应”。进一步将转基因Ｍ８５细胞和未转基因Ｍ８５细胞接种至裸鼠皮下,发现两者成瘤性无明显差异;前药５ＦＣ对未转基因肿瘤的生长无影响,而对转基因肿瘤的生长明显抑制。结论本研究为ＣＤ基因治疗胃癌向临床过渡提供了依据。     

中国人遗传性非息肉病性结直肠癌hMLH1与hMSH2基因的种系突变研究

目的 探讨中国人遗传性非息肉病性结直肠癌（HNPCC）患hMLH1与hMSH2基因的种系突变特点。方法 对诊治的6个HNPCC家系的先证用聚合边反应（PCR）的方法扩增其hMHL1及hMSH2的35个外显子，SSCP方法检测其变异，对可疑突变进行自动测序以确定突变类型。结果 6例先证SSCP检测在3例患中发现4处异常条带，自动测序证实hMSH211外显子有1处插入突变和1处错义突变、13外显子有1处错义突变，1例在hMLH118外显子及hMSH215外显子均有插入突变。结论 中国人HNPCC的错配修复基因突变以hMSH2为主，插入造成的移码突变和错义突变仍为主要病理突变类型。