逆转录病毒载体介导乙型肝炎病毒反义基因的转录表达

为了探索在真核细胞内转录表达乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）反义核酸的方法，用基因重组技术将ＨＢＶ前Ｃ／Ｃ基因（ＰｒｅＣ／Ｃ）和前Ｓ／Ｓ基因（ＰｒｅＳ／Ｓ）片段反向插入逆转录病毒载体质粒，再将重组体分别转染ＰＡ３１７包装细胞，进而获得能够介导ＨＢＶ反义基因向小鼠ＮＩＨ３Ｔ３细胞转移表达的重组逆转录病毒。经分子杂交试验表明，含有ＨＢＶ反义基因的重组逆转录病毒序列已经整合到转染的ＰＡ３１７细胞染色体上；转导的ＮＩＨ３Ｔ３细胞内有ＨＢＶ反义ＲＮＡ转录表达。结论：逆转录病毒载体包装细胞系统能够介导ＨＢＶ反义基因在真核细胞中转录表达，因而有可能利用反义技术和基因转移方法进行抗－ＨＢＶ基因治疗     

难辨羧状杆菌的医源性感染和治疗

难辨羧状杆菌（Ｃｄ）感染性腹泻常因使用广谱抗生素引起,Ｃｄ产生的两种毒素可引起肠道粘膜损伤和炎症,Ｃｄ感染者的临床表现不一,大多为无症状携带者,或仅有轻度腹泻,重症者有严重的假膜性肠炎,从患者粪便中检出Ｃｄ产生的毒素可确诊Ｃｄ感染,停用广谱抗生素是治疗的首要措施,病情较重时应给予甲硝唑或万古霉素的治疗,用药３天后大多数感染者的症状得到控制。     

毛细支气管炎患儿HLA-DR及IL-4表达与IgE生成关系探讨

为探讨毛细支气管炎患儿淋巴细胞HLA—DR和Thl／Th2细胞因子表达对IgE合成的影响，对58例RSV毛细支气管炎患儿及20例正常儿童，采用间接免疫荧光法检测外周血淋巴细胞HLA—DR表达；以IFN—γ代表Thl类细胞因子和IL4代表Th2类细胞因子，ELISA方法及多标记免疫分析系统测定血清IgE和IL-4及IFN—γ的表达水平。结果患儿组外周血淋巴细胞HLA—DR表达阳性率、IgE及IL-4表达均显著高于对照组，P分别＜0．01、＜0．05和＜0．01；两组IFN—γ水平差异无显著性(P＞0．1)，而患儿组IL—4／IFN—γ水平则显著高于对照组(P＜0．02)；HLA-DR表达及IL—4水平与血清IgE水平之间密切相关(P＜0．001)。提示RSV毛细支气管炎患儿Thl／Th2类细胞因子表达处于Th2强势状态，淋巴细胞HLA—DR和IL—4高表达使IgE合成增多，在毛细支气管炎的发病中起重要作用。     

儿童呼吸道感染性疾病病原学检测与合理用药

小儿时期常见疾病中，呼吸道感染占极重要地位，不仅发病率高，病情也常较严重。在我国，儿童急性下呼吸道感染（占儿科住院患儿的24．5％～65．2％），5岁以下儿童中，每年有105万人死亡，其中30万死于肺炎，下呼吸道感染是婴幼儿时期死亡的主要原因之一。目前我国多数临床医生更多的是通过患儿的临床特点和一般实验室检查来获得对感染病原的初步印象，从而开始经验性治疗，导致了部分不合理用药，特别是不合理使用抗生素，促使细菌耐药及增加医疗费用。寻求降低呼吸道感染发病率及死亡率最有效的办法是可靠的病原学证据，为临床诊断和治疗提供指导。     

肺炎患儿血小板增高的临床意义

【目的】 通过对肺炎伴血小板增多的儿童进行临床特征、实验室指标及潮气通气肺功能检测分析,探讨血小板计数能否作为评判儿童肺炎严重程度和预后的量化指标。 【方法】 对102例肺炎伴有血小板增多(外周血血小板计数＞400×10⁹/L)的患儿(A组)与107例肺炎血小板计数正常的患儿(B组)的临床特点、血实验室生化指标、血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL-6)、潮气通气肺功能检测数据进行比较。 【结果】 与B组比较, A组发生呼吸困难和喘息比例高,住院时间长,白细胞计数高,血浆TNF-α、IL-6的表达增高,代表小气道阻塞的肺功能指标呼气达峰时间(tPTEF)、达峰时间比(呼气达峰时间/呼气时间、tPTEF/tE)、剩余25%潮气量时的呼气流速(TEF25)、剩余25%潮气量时的呼气流速/呼气峰流速(TEF25/PTEF%)降低,差异有统计学意义(P<0.05)。外周血小板计数与IL-6浓度成正相关(r=0.354,P<0.05),与tPTEF/tE、 TEF25呈负相关(r=0.461、0.407,P＜0.05)。 【结论】 外周血血小板计数升高可作为评判肺炎的炎症反应及病情严重程度的实用参考指标。     

牛磺酸对大鼠肝缺血再灌注后小肠损伤的保护作用

目的探讨牛磺酸对大鼠肝缺血再灌注(I/R)后小肠损伤的保护作用。方法将大鼠随机分成假手术组,肝I/R组,牛磺酸预处理+肝I/R组;采用阻断肝动脉、门静脉30min后再灌注的方法,制作肝I/R模型。各组于再灌注3,6,24h分别采血,测定二胺氧化酶(DAO)数值,检测小肠功能;同步切取小肠,测定肠道组织中的SOD及MDA含量,评价肠道自由基损伤程度;切片后行苏木素-伊红(HE)染色,观察病理形态学改变;原位末端标记法(TUNEL)测定细胞凋亡;免疫组化法测定caspase-3表达。结果与假手术组比较,肝I/R组SOD水平明显降低(P<0.05),MDA和DAO水平明显升高(P<0.05),小肠病理损伤严重,凋亡指数明显升高(P<0.05),caspase-3阳性率明显增加(P<0.05)。与I/R组同时间点比较,牛磺酸预处理+I/R组各项指标均明显改善(均P<0.05)。结论牛磺酸对肝I/R后小肠损伤具有保护作用。     

肝门部胆管癌根治术肝切除范围的合理选择

外科手术切除是肝门部胆管癌最有效和首选的治疗方法,笔者根据该病的4种类型提出合理的手术切除范围选择,旨在进一步规范肝门部胆管癌的外科治疗。     

十二指肠乳头癌临床分析：附80例报告

目的:探讨十二指肠乳头癌早期诊断及手术方法。方法:回顾分析中南大学湘雅医院2010年3月—2017年3月收治的80例十二指肠乳头癌患者资料,其中16例行局部切除术,64例行胰十二指肠切除术。结果:主要首发临床表现为皮肤瘙痒、进行性黄疸60例(75.0%),腹痛不适40例(50.0%),畏寒、发热4例(5.0%),食欲不振、消瘦3例(3.75%),检查发现十二指肠乳头肿物2例(2.5%)。术前B超、CT、MRI、胃镜/十二指肠镜、ERCP阳性率分别为82.26%、89.66%、91.3%、93.75%、94.29%。行十二指肠乳头局部切除术16例中,13例为十二指肠乳头腺癌,1例为十二指肠乳头神经内分泌癌,2例为十二肠乳头腺瘤局部癌变;行胰十二指肠切除术组共64例中,61例为十二指肠乳头腺癌,2例为十二指肠乳头神经内分泌癌,1例为十二指肠乳头腺瘤局部癌变。与十二指肠切除术患者比较,局部切除术患者术中出血量、住院费用、术后并发症发生率均明显降低(均P0.05),但平均住院时间无统计学差异(P0.05),术后1、3、5年生存率均无统计学差异(均P0.05)。结论:对于十二指肠乳头癌,十二指肠镜及ERCP是相对较可靠的诊断方法,应首选胰十二指肠切除术;对于某些特殊病例,局部切除术在严格掌握其适应证的前提下,术中确保切缘阴性,可以作为一种安全有效的手术方式。     

苏州地区呼吸道感染儿童中呼吸道7种病毒的流行病学监测

目的对2001年1月至2007年12月苏州大学附属儿童医院收治的苏州地区急性呼吸道感染儿童中呼吸道合胞病毒（RSV）等7种病毒进行流行病学监测。方法用直接免疫荧光法对17715份鼻咽分泌物标本进行RSV等7种病毒抗原检测。结果（1）7年中儿童急性呼吸道感染以RSV为发病首位，7年平均年阳性检出率为23．42％。流行高峰季节在每年的11月份至次年3月份，5月份至9月份是低谷期；流感病毒（IV）平均年检出率为6．17％，以流感病毒A型（IVA）优势流行，但每年3月份流感病毒B型（IVB）检出率有所上升；副流感病毒（PIV 1-3型）平均年检出率为3．84％，PIV流行呈常年性，检出率由高至低依次为PIV3、PIV1、PIV2；腺病毒（ADV）平均年检出率为1.32％，以春、夏两季相对较高。（2）RSV感染以1岁以内婴幼儿（尤为男性）多见（P〈0．01）；IV与ADV感染以3岁以上儿童多见（P〈0．01）；PIV3感染以2岁以内婴幼儿多见（P〈0．01）。结论RSV流行具有明显的季节性，1岁以内婴幼儿是其主要感染源；IV与ADV以冬春、夏季检出率较高，偏向3岁以上儿童；PIV流行无明显季节性，各亚型检出率及年龄分布不同。