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大鼠VEGF腺病毒基因转染系统的构建及鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
目的:探讨构建携带大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)的重组腺病毒载体方法,为后续的基因转染研究作准备。方法:采用RT-PCR扩增的方法获取鼠源性的VEGF,并克隆入穿梭质粒pDC316。构建的质粒pDC316-VEGF经酶切及测序鉴定正确后,通过lipofectamine2000的介导与腺病毒包装质粒pBHGE3共转染至人胚肾细胞HEK293,经同源重组后获得携带鼠VEGF的重组腺病毒VDC316-VEGF。应用PCR鉴定重组腺病毒,空斑传代纯化病毒并反复冻融扩增病毒。以50%组织培养感染剂量法(TCID50)测定病毒滴度。结果:PCR鉴定证实重组腺病毒含有鼠VEGF,病毒滴度为3×109pfu/mL。结论:成功构建的携带大鼠VEGF的重组腺病毒载体能在HEK293细胞内扩增获得足够高的病毒滴度,可作为后续基因治疗研究工作中可靠的基因转染工具。  相似文献   
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目的:评价中西医结合治疗甲沟炎的临床效果。方法:对38例早期甲沟炎患者采用中西医结合治疗,主要包括创面清洁、酒精碘伏消毒、局部外敷如意金黄散。结果:本组疗程3~28d,平均疗程(5.73±4.53)d,红肿消退时间(2.17±0.51)d,患处触觉痛完全或基本消失,疮口均愈合良好,无需手术治疗。随访8w,只有1例复发,复发率为2.6%。结论:甲沟炎采用综合疗法进行治疗的效果好,复发率低,值得临床推广。  相似文献   
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