应用旋转细胞培养系统建造组织工程化人工软骨的实验研究

组织工程学的兴起 ,为临床上修复因各种原因导致的软骨缺损带来了希望[1 ,2 ] 。旋转细胞培养系统 (ＲＣＣＳ)具有模拟微重力、高密度培养细胞、组织的特性[3] 。目前 ,国外已经将其广泛用于组织工程研究领域。本研究旨在应用ＲＣＣＳ进行组织工程化人工软骨的再造研究 ,探讨ＲＣＣＳ提供的外部环境对形成组织工程化人工软骨的影响。1.材料与方法 :Ⅱ型胶原酶、胰蛋白酶购于Ｓｉｇｍａ公司 ;乙交酯和丙交酯的共聚物 (ＰＬＧＡ)泡沫材料由中国科学院化学所提供 ,材料孔径为 2 0 0～ 30 0 μｍ ,孔隙率为 90 % ;ＲＣＣＳ购于Ｓｙｔｈｅｃｏｎ…     

采用组织工程技术再造鼻翼软骨的实验研究

组织工程学作为一门新兴交叉学科 ,为临床再造鼻翼软骨带来希望[1] 。本研究以合成聚乙交酯 丙交酯 (ＰＬＧＡ)支架为载体并应用旋转生物反应器 (ＲＣＣＳ)作为复合体体外培育装置 ,进行了建造组织工程化鼻翼软骨的研究 ,探讨ＰＬＧＡ作为细胞支架的可行性及ＲＣＣＳ对复合体软骨组织再生的影响。1 材料和方法 :①软骨细胞培养 :应用Ⅱ型胶原酶消化兔关节软骨后 ,获取软骨细胞并将其浓缩至 2× 10 7个细胞 /ｍｌ。②支架制备 :由中科院化学所制备呈鼻翼软骨形状的ＰＬＧＡ支架。③体外构建及培养复合体 :实验分 3组 ,每组 10个样本。Ⅰ组在…     

组织工程化人工骨修复颅骨缺损的研究

目的应用同种异体兔成骨细胞研究组织工程化人工骨对骨缺损的修复能力.方法取4周龄新西兰幼兔的颅骨组织,应用胰酶及Ⅰ型胶原酶消化,经分离、培养而获得的成骨细胞种植到可降解聚合物(PLGA)泡沫材料上,体外培养1周后,将两者的复合体移植到兔颅骨缺损区域,细胞接种浓度为4×1010个/L.分别于术后4、8、12周取材,进行大体、X线、组织学及免疫组织化学观察.以缺损区单纯植入泡沫材料或单纯种植成骨细胞为对照组.结果成骨细胞-支架复合体组颅骨缺损修复明显,两对照组颅骨缺损无明显修复.术后12周,对各组免疫组织化学染色结果进行图像分析,其中实验组灰度值为92.6,单纯泡沫材料组与单纯种植成骨细胞组灰度值分别为131.7及119.3.结论本实验构建的组织工程化人工骨具有较强的颅骨缺损修复能力,PLGA泡沫材料是成骨细胞较适宜的支架材料.     

皮肤组织工程-细胞支架的构筑及其生物相容性评价

皮肤组织工程的发展提供了一种无损伤修复创伤和功能重建的皮肤治疗模式.作为组织工程的三要素之一,细胞支架发挥着重要的作用.为满足组织工程中对细胞支架在力学性能、物理结构及生物相容性等方面的要求,我们首先制备了聚乳酸(PDLLA)、聚乳酸-己内酯(PLACL)多孔支架,并以生物相容性较好的猪的无细胞真皮(acellular dermis matrix,ADM)为参比,分别把三种材料植入大鼠背部肌层,术后定期取大鼠皮下埋藏组织进行组织学检测.结果发现PDLLA与PLACL多孔支架的降解周期、力学性能、孔隙率及其孔径都可以根据皮肤组织工程中的要求进行调控.组织学检查,移植物内无明显炎性细胞,21天后,均完全血管化且分布较均匀.说明PDLLA与PLACL的生物相容性较ADM差,但并未出现明显的异物排斥反应,两者的生物相容性基本上可以满足组织工程中对支架的要求,这为聚乳酸类人工皮肤的进一步研究提供了有意义的实验依据.     

聚乳酸与聚乳酸—羟基乙酸多孔细胞支架的制备及孔隙的表征

应用溶液烧铸致孔剂浸出技术制备了不同致孔剂用量与不同致孔剂颗粒尺寸条件下的一系列聚乳酸及不同组成的聚乳酸－羟基乙酸多孔细胞支架；用一种改进的方法－重量法测定其孔隙率；在聚乳酸－羟基乙酸多孔支架上进行了软骨细胞培养。研究结果表明，随着制备过程中致孔剂用量的增加，多孔支架的孔隙逐渐增加，而与致孔剂的颗粒大小基本无关；致孔剂的颗粒大小只影响多孔支架的孔径；在致孔剂用量及致孔剂颗粒尺寸都相同的情况下，随着共聚物中乙交酯含量的增加，孔隙率逐渐下降；软骨细胞在支架上繁殖情况良好，三周后已开始分泌细胞外基质。