重组脂联素对糖尿病肾病大鼠氧化应激的影响

目的探讨脂联素在早期糖尿病肾病中可能的作用机制。方法采用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素（STZ）30mg/kg的方法建立2型糖尿病肾病大鼠模型,并以正常大鼠为对照组。将造模成功的糖尿病肾病大鼠模型再随机分为3组：糖尿病肾病组（DN组,n=6）,空载体转染组（DP组,腹腔注射脂质体＋pIRES2-EGFP,200μg/次,每周两次）和脂联素转染组（DA组,腹腔注射脂质体＋pIRES2-EGFP-gAd,200μg/次,每周两次）。10周后处死大鼠测肾组织羟自由基、丙二醛（MDA）含量,光镜观察肾脏病理改变。结果与正常对照组比较,模型组各组大鼠肾组织抑制羟自由基能力降低（P〈0.01）,丙二醛增加（P〈0.05）;与DN、DP组大鼠比较,DA组大鼠肾组织抑制羟自由基能力升高,丙二醛减少,均有明显统计学意义（P〈0.05）。结论脂联素干预糖尿病肾病大鼠,可抑制肾脏羟自由基产生,使脂质过氧化物生成减少,具有一定的抗氧化能力,对糖尿病肾病可能有一定的保护作用。     

pIRES2-EGFP-gAd质粒载体构建及在大鼠肾脏的表达

背景：已有研究证实经腹腔注射基因转染肾脏是一种简便有效的实验方法。 目的：构建表达球形脂联素(gAd)的pIRES2-EGFP-gAd质粒,观察其在大鼠肾脏的表达。 方法：以pET/gAd 质粒为模板,PCR扩增目的片段,转化大肠杆菌,用EcoRⅠBamHⅠ双酶切后,与pIRES2-EGFP荧光质粒连接,重组构建pIRES2-EGFP-gAd质粒。将构建成功的pIRES2-EGFP-gAd质粒采用脂质体介导经腹腔注射正常大鼠体内,于注射24,48,96 h和7 d留取肾脏标本进行冰冻切片,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白在肾组织中的表达,同时采用Western bot检测肾组织绿色荧光蛋白的表达。 结果与结论：重组构建的pIRES2-EGFP-gAd载体经双酶切电泳分析及DNA测序证实无碱基突变。在腹腔注射脂质体/ pIRES2-EGFP-gAd转染复合物24 h,即可在肾小球肾间质检测到绿色荧光,注射48 h,荧光进一步增强,之后逐渐减弱,至注射7 d时,荧光强度明显减弱。Western bot检测的绿色荧光蛋白的表达结果与冰冻组织切片结果一致。说明脂质体能够介导pIRES2-EGFP-gAd真核载体在大鼠肾脏表达。     

脂联素对高糖诱导系膜细胞活性氧和内皮一氧化氮合成酶产生的影响

氧化应激在糖尿病肾病(DN)发病中起重要作用[1].脂联素是脂肪细胞分泌的一种特异性蛋白质,具有抗炎、改善胰岛素抵抗、抗动脉粥样硬化、降血糖、降血脂及抗氧化作用.研究发现脂联素与DN关系密切,其血浆浓度随.肾功能不全进展而增加,原因可能是为减轻内皮和血管损伤的正反馈调节[2,3].因此,我们推测脂联素可能通过抑制氧化应激而对DN发挥保护作用,并通过本研究进一步明确脂联素抗糖尿病微血管病变的机制.     

脂联素与糖尿病肾病

脂联素（adiponectin,ADPN）是脂肪细胞分泌的一种特异性蛋白质，具有改善胰岛素抵抗、抗炎、抗动脉粥样硬化、降血糖、保护血管内皮等作用。研究发现ADPN与糖尿病肾病关系密切，进展期糖尿病肾病患者尿脂联素和血脂联素水平增加，但发病机制尚不清楚。     

继发性甲状旁腺功能亢进症的研究进展

继发性甲状旁腺功能亢进症(secondary hyperparathyroidism,SHPT)是慢性肾脏病(CKD)的常见并发症,与骨痛、骨折、肌肉功能、心血管疾病、性功能、免疫功能、瘙痒症及钙化等有关,影响患者的生存率和生存质量[1]. 1 对SHPT发病机制的研究 在细胞外高磷、低钙及血清骨化三醇明显降低的持续影响下,甲状旁腺素(PTH)的合成和分泌增加.同时,成纤维细胞生长因子23(FGF-23)表达增加使肾脏残留的1-羟化酶的表达下调,导致骨化三醇缺乏.近年来对磷调节分子机制的研究表明FGF-23和其受体FGFR1在其中起重要作用[2].FGF-23是一种激素,是骨细胞和成骨细胞生成的产物,由高磷和骨化三醇刺激产生.FGF-23与FGFR1相结合并使其活化,后者仅在与Klotho跨膜蛋白同时表达,即作为Klotho-FHF受体复合物时才发挥其功能.     

丹红注射液治疗早中期慢性肾衰竭的临床观察

目的:观察丹红注射液治疗早中期慢性肾衰竭的疗效.方法:将早中期慢性肾衰竭患者随机分为两组.对照组给予常规治疗.治疗组在常规治疗基础上加丹红注射液,疗程2周.观察治疗前后血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、肾小球滤过率(glomerular filtra-tion rate,GFR)指标.结果:治疗后,两组患者血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、肾小球滤过率(GFR)均有不同程度降低,治疗组明显优于对照组(P<0.05).结论:丹红注射液可改善早中期慢性肾衰竭患者的肾功能,有效延缓慢性肾衰竭的进展.     

水孔蛋白1与腹膜透析超滤的关系

水孔蛋白1（AQP1）是最早发现的水通道蛋白,其分布及分子结构确保了对水的精确选择性,符合计算机模拟腹膜＂三孔模型＂中超小孔的特征。超滤衰竭（UFF）是长期腹膜透析（PD）的一种并发症,是引起PD失败的主要原因之一。研究发现AQP1可介导PD时50%的超滤（UF）,其表达或功能降低可能与UFF有关。因此,研究AQP1与腹膜透析超滤的关系具有重要临床意义。     

急性单核细胞白血病并发急性肾功能衰竭一例报告

患者，男，17岁，2007年4月5日行骨髓检查后确诊为急性单核细胞白血病（M5型），于2007年8月1日第4次入院化疗。查体：T36.5℃，P80次／min，BP120／80mmHg（1 mmHg=0.133kPa），皮肤巩膜无黄染及出血点，浅表淋巴结不大，心肺腹部无明显异常，双下肢不肿。实验室检查：血常规：WBC 8.1×10^9／L，Hb 99g／L，RBC3.2×10^12／L，     

脂联素对糖尿病大鼠的肾脏保护作用及其抗氧化机制探讨

目的研究脂联素(ADPN)对糖尿病大鼠的肾脏保护作用及其相关的抗氧化机制。方法采用高糖高脂饮食配合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制2型糖尿病大鼠模型,可表达球形脂联素的pIRES2-EGFP-gAd质粒用脂质体介导经腹腔转染糖尿病大鼠模型体内。将32只Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病模型组(DM组)、ADPN干扰组(DA组)和空载体转染组(DP),分别给予相应处理8周后,观察血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、24h尿微量白蛋白排泄率(UAER)变化;留取肾组织切片观察光镜下的病理改变并测定肾组织ROS释放量的变化;免疫组化法和Western Blot测定内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)蛋白的表达。结果与正常对照组比较,DM模型组大鼠UAER显著上升,肾组织ROS释放量增加(P<0.05),DM、DA、DP各组之间尿蛋白无明显差异(P>0.05)。与DM组相比,DA组血糖和HbA1c有所下降,ROS释放明显减少(P<0.05)。光镜下DM组大鼠大部分肾小球系膜区增宽,基质大量增生,节段性基底膜增厚、部分肾小管上皮细胞空泡变性、脱落,肾小球内细胞数...     

pIRES2-EGFP-gAd质粒载体构建及在大鼠肾脏的表达

背景:已有研究证实经腹腔注射基因转染肾脏是一种简便有效的实验方法.目的:构建表达球形脂联素(gAd)的pIRES2-EGFP-gAd质粒,观察其在大鼠肾脏的表达.方法:以pET/gAd质粒为模板,PCR扩增目的片段,转化大肠杆菌,用EcoR Ⅰ BamH Ⅰ双酶切后,与pIRES2-EGFP荧光质粒连接,重组构建pIRES2-EGFP-gAd质粒.将构建成功的pIRES2-EGFP-gAd质粒采用脂质体介导经腹腔注射正常大鼠体内,于注射24,48,96 h和7 d留取肾脏标本进行冰冻切片,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白在肾组织中的表达,同时采用Western bot检测肾组织绿色荧光蛋白的表达.结果与结论:重组构建的pIRES2-EGFP-gAd载体经双酶切电泳分析及DNA测序证实无碱基突变.在腹腔注射脂质体/pIRES2-EGFP-gAd转染复合物24 h,即可在肾小球肾间质检测到绿色荧光,注射48 h,荧光进一步增强,之后逐渐减弱,至注射7 d时,荧光强度明显减弱.Western bot检测的绿色荧光蛋白的表达结果与冰冻组织切片结果一致.说明脂质体能够介导pIRES2-EGFP-gAd真核载体在大鼠肾脏表达.