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新生鼠胰岛干细胞分离、培养和分化的实验研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 探索新生鼠胰岛干细胞体外分离鉴定、培养以及体外分化的方法。方法 用胶原酶消化新生大鼠胰腺 ,将消化的组织碎片在pH7.4~ 7.6条件下经含血清RPMI 164 0及无血清RPMI164 0 (添加bFGF ,EGF ,N 2 )培养液中培养 ,观察形成类胰岛样细胞团的全过程。用胰岛素释放实验检测胰岛功能 ,免疫荧光法检测nestin的表达。结果 胰腺消化碎片培养 3 6h内 ,可见nestin阳性细胞贴壁 ,添加bFGF ,EGF ,N2后nestin阳性细胞快速增长 ,18~ 2 4d形成类胰岛样细胞团 ,并可表达胰岛素。结论 胰腺细胞中nestin阳性细胞具有胰岛干细胞特点 ,经体外培养可获得类胰岛样细胞团 相似文献
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目的 评价乳晕下亚甲兰注射检测乳腺癌哨兵淋巴结。 方法 2 0例早期乳腺癌患者应用亚甲兰乳晕下注射检测哨兵淋巴结。 结果 哨兵淋巴结检出率 95 % (19/ 2 0 )。预测腋窝淋巴结转移准确率为 94 7% (18/ 19)。 结论 乳晕下注射染料检测哨兵淋巴结为最佳途径 ,亚甲兰可以用于哨兵淋巴结检测。 相似文献
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目的探索新生大鼠胰腺nestin阳性细胞体外分离、培养并使之形成类胰岛样细胞团的方法。方法应用胶原酶消化新生大鼠胰腺,将消化的组织碎片培养形成类胰岛样细胞团后传代。免疫荧光细胞化学法检测贴壁细胞胰岛素、胰高血糖素及nestin的表达。RT-PCR检测培养1周的贴壁细胞nestin及细胞角蛋白(CK19)的表达。结果在pH 7.6条件下培养24-36 h有部分细胞贴壁生长,改用pH 7.4无血清RPMI 1640培养液培养18-24 d可形成类胰岛样细胞团,传代后可有单层细胞生长。培养24~36 h的贴壁细胞nestin呈阳性,但胰岛素、胰高血糖素阴性,形成的类胰岛样细胞团传代后24 h胰岛素、胰高血糖素呈阳性。培养1周的单层细胞经RT-PCR扩增获得nestin 片段,但未获得CK19相应的片段。结论类胰岛样细胞团传代培养后可表达胰岛素、胰高血糖素; 胰腺nestin阳性细胞具有胰岛干细胞的特点。 相似文献
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异位甲状腺癌是甲状腺癌的一种特殊类型,约占甲状腺癌发病率的0.3%~0.5%[1],临床上较少见.本院2010年收治肺异位甲状腺癌1例,2011年收治颈部异位甲状腺癌1例,本文结合这2例异位甲状腺癌的诊治经过,复习国内外文献报道资料,对此类疾病的诊治作相关分析. 相似文献
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目的 探讨乳腺癌手术腋窝淋巴结清扫时保留腋鞘的临床意义.方法 回顾性分析2004年1月至2008年1月施行并获得12个月随访的402例乳腺癌改良根治术患者的临床资料.按腋窝淋巴结清扫时保留腋鞘与否分为A、B两组,A组243例,B组159例.术后对两组患者腋窝皮下积液和上肢水肿情况进行观察随访.结果 A、B两组术后顽固性腋窝皮下积液发生率分别为5.3%(13/243)、10.7%(17/159),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);术后1、6、12个月上肢水肿严重程度与发生率分别比较,A组均显著低于B组(P<0.01).结论 乳腺癌改良根治术腋窝淋巴结清扫时探查腋鞘内或其周围无明显肿大和可疑转移淋巴结的情况下,保留腋鞘能够有效降低术后顽固性腋窝皮下积液和上肢水肿的严重程度与发生率,提高患者的生存质量. 相似文献
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目前 ,I型糖尿病的常规治疗方法是应用外源性胰岛素注射控制血糖。胰岛素注射不能完全控制血糖和远期并发症 ,因为常有血糖波动和低血糖发生 ,而且患者难免遭受注射所带来的不便和痛苦。全胰腺移植始于 2 0世纪 6 0年代初期 ,到 2 0 0 0年全球实施了近 1 0 0 0例手术[1 ] ,虽然患者移植后 1年生存率和移植功能存活率逐渐提高 ,但胰腺单独移植存活率低 ,只有与肾或其它脏器联合移植才能获得较高的成活率[2 ,3 ] 。尽管胰腺移植是一种有效的治疗方法 ,但要求条件高 ,损伤大 ,费用高 ,而且只有少数单位能够承担此项工作 ,难以普及。另外 ,还受… 相似文献
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目的探讨大肠癌误诊原因及减少误诊的措施。方法回顾性总结近10年来388例大肠癌病人的临床资料,对被误诊的156例(40.2%)病人的并存疾病和误诊病种进行统计分析。结果本组被误诊的大肠癌病人的并存疾病为肝肿瘤,胆囊结石伴炎症,急性阑尾炎,妇科盆肿腔瘤,斜疝,甲亢等。误诊病种有慢性结肠炎(42例)、痔疮(30例)、急性阑尾炎伴阑尾周围脓肿(12例)、阑尾周围脓肿(13例)、粘连性肠梗阻(13例)、妇科盆腔肿瘤(5例)等。误诊时间15天-3年。误诊原因:(1)被并存疾病的症状所掩盖;(2)未行直肠指诊、大便潜血试验、气钡灌肠和纤维结肠镜检查。结论应提高对大肠癌警惕性,按医疗操作规范行直肠指检,大便隐血试验,气钡结肠造影及结肠镜检。提高对高危人群随防监控。检测外周血中CK19、CK20。 相似文献
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成年大鼠非胰岛内Nestin阳性细胞的体外分离、培养及分化 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:建立成年大鼠胰腺非胰岛内Nestin阳性细胞的体外分离培养及分化的方法。方法:采用胰管内注入胶原酶消化法分离3只成年大鼠胰腺组织,并经含10%胎牛血清RPMI 1640液(pH 7.6)体外培养,36 h后弃去悬浮细胞及胰岛,改用无10%胎牛血清RPMI 1640液(pH 7.4)加bFGF、EGF及N2添加剂培养,18~22 d后收集新生类胰岛样细胞团并传代培养。挑选新分离的胰岛和新生类胰岛样细胞团每次各40个,共3次,采用131Ⅰ放射免疫法测定分离的胰岛及新生类胰岛样细胞团的胰岛素分泌量,并计算葡萄糖刺激指数(SI);免疫荧光细胞化学法检查贴壁细胞及传代后的新生类胰岛样细胞团Nestin阳性细胞的表达。
结果:胰管内注入胶原酶消化法可获得功能、形态良好的胰岛;分离后胰腺组织在pH 7.6的10%胎牛血清RPMI 1640液培养条件下,36 h内胰岛细胞不贴壁,贴壁细胞中大多数表达Nestin阳性细胞,无胰岛素和胰高血糖素表达,但Nestin表达不一,培养18~22 d可见新生类胰岛样细胞团出现,新生类胰岛样细胞团传代后仍可见Nestin阳性细胞。新分离的40个胰岛在含糖3.3、16.7 mmol•L-1培养液中胰岛素分泌量为(63.6±4.0)、(202.2±14.8)mIU•L-1;而新生的40个类胰岛样细胞团胰岛素分泌量为(3.5±0.2)、(3.3±0.2)mIU•L-1,差异有显著性(P<0.001)。
结论:胰管内注入胶原酶消化法可获得功能、形态良好的胰岛;在pH 7.6条件下可分离培养出成年大鼠胰腺非胰岛内Nestin阳性细胞,经无血清培养形成的类胰岛样细胞团,可传代培养,并表达胰岛素。胰腺非胰岛内Nestin阳性细胞具有胰腺干细胞特点。 相似文献