排序方式: 共有44条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
背景 恶性黑色素瘤是体表肿瘤中死亡率最高的恶性肿瘤,高度侵袭转移性是其重要的生物学特征之一,亦是其预后不良的主要因素。肿瘤转移相关因子RhoC可通过多种转移相关机制参与肿瘤的侵袭与转移,是控制肿瘤转移的分子开关,RhoC有望成为抑制肿瘤转移的重要靶位。目前应用RNAi技术靶向RhoC基因对黑色素瘤侵袭转移能力的影响尚未见报道。本研究拟利用RNAi技术,以慢病毒作为基因载体,以人黑色素瘤A375细胞作为研究对象,以转移相关基因RhoC作为靶基因,研究靶向RhoC基因慢病毒干扰载体的构建并检测对RhoC的沉默效应。
方法 根据RhoC编码区基因信息设计构建三条pGPU6/GFP/Neo-shRNA表达载体,通过检测其对A375细胞RhoC 的沉默效应筛选出最有效的靶序列。将RNAi效应最佳序列进行慢病毒包装构建形成靶向RhoC 的pLenti6.3-EGFP-453慢病毒表达载体,并感染A375细胞,进一步应用荧光定量PCR和Western blot检测对RhoC mRNA及蛋白表达的沉默效应,应用Transwell小室细胞侵袭实验检测 A375细胞侵袭能力。
结果 构建的三对shRNA表达载体分别为pGPU6/GFP/Neo-shRNA336、pGPU6/GFP/Neo-shRNA453及pGPU6/GFP/Neo-shRNA680,应用荧光定量PCR和Western blot检测转染人黑色素瘤A375细胞后靶基因RhoC mRNA和蛋白表达水平分别为1.47±0.26、1.13±0.16、1.39±0.11和70.98±9.21、50.67±6.06、65.77±4.06,RhoC453为最佳干扰序列。成功构建了靶向RhoC的pLenti6.3-EGFP-453慢病毒表达载体,经测序证实序列正确;将构建的pLenti6.3-EGFP-453慢病毒表达载体感染A375细胞,应用荧光定量PCR和Western blot检测RhoC mRNA和蛋白的表达水平分别为1.05?0.05、62.04?15.86,而阴性对照慢病毒组、正常对照组RhoC mRNA和蛋白分别为4.21±0.24、220.86±24.07和4.63±0.32、257.39±12.30,Transwell小室细胞侵袭实验结果显示pLenti6.3-EGFP-453慢病毒组穿膜细胞数为40.41±8.88,阴性对照慢病毒组、正常对照组分别为64.82±13.48和77.46±6.47,慢病毒表达载体组较对照组相比较差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论 成功构建的靶向RhoC基因的pLenti6.3-EGFP-453慢病毒表达载体可高效感染体外培养的人黑色素瘤A375细胞,并可显著抑制靶基因RhoC的表达和细胞的侵袭能力。 相似文献
2.
周围性面瘫是临床上常见的一种疾病,大多数经过内科治疗是可以治愈的,但对于少数内科治疗效果不佳者,最终尚需手术治疗。由于病因、病程等不同,手术时机、方式等尚有进一步探讨的必要。我们通过对不同病因、不同病程的4例患者进行了手术治疗,效果满意。通过我们的操作体会认为面神经吻合术为早期外伤性面瘫治疗的最佳选择,阔筋膜静态悬吊术对于晚期面瘫病例可改善部分症状,为恢复面瘫静态外观的有效方法,不失为可供选择的术式。 相似文献
3.
应用前额岛状皮瓣快速扩张法行鼻再造术 总被引:3,自引:0,他引:3
为探讨前额岛状皮瓣快速扩张法行鼻再造术的可行及手术方法和注意事项。手术分两期完成。Ⅰ期手术为额产和器埋置。 相似文献
4.
目的根据面神经的解剖特点探讨面中下部除皱术中面神经的保护。方法对16例行面中下部除皱患者,采用合适的分离平面及范围,且在术中对面神经进行主动保护。结果2例出现一过性面瘫后逐渐恢复,其余恢复顺利,随访6个月~2年效果满意。结论了解面神经各分支的分布及走行,同时在术中进行主动保护,这是除皱手术成功的基础。 相似文献
5.
目的:探讨局部皮瓣在唇缺损修复中的应用及效果。方法:本组共31例各种原因所致唇缺损病例,根据缺损的程度及部位,分别应用不同的局部皮瓣进行修复。唇缺损范围≤1/3唇长,行直接拉拢缝合并Z改形术;唇缺损范围1/3~1/2,应用唇复合组织瓣或对侧唇交叉瓣修复;下唇缺损范围1/2~2/3,应用同侧唇颊部旋转皮瓣修复。结果:所有病例皮瓣全部成活,唇部外观明显改善,效果满意。2例下唇缺损范围1/2~2/3者修复后患侧红唇组织厚度不足,其余病例上下唇比例基本协调,局部组织无明显畸形,术后功能良好。随访2月~4年,唇部外观无明显变形及功能障碍,无复发及死亡病例。结论:对于唇缺损的修复,应根据缺损的程度及部位等具体情况选择正确的局部皮瓣以利于恢复唇部的良好形态及功能。 相似文献
6.
背景:单侧唇裂一期修复术后往往继发不同程度的鼻畸形,根据不同畸形的特点,选择合适的自体软骨及生物材料可有效加强和恢复鼻部支架结构、矫正鼻部畸形。目的:探讨不同植入材料在单侧唇裂继发鼻畸形整复中的应用及效果。方法:纳入单侧唇裂修补36例,表现为不同程度的鼻部畸形,在行唇部相关手术的同时,对移位的鼻软骨及周围软组织进行有效松解及复位,并根据不同畸形的特点,应用自体鼻中隔软骨、耳甲软骨、肋软骨及Medpor外科种植体对患侧鼻翼基底部、鼻翼软骨、前鼻棘、鼻小柱及鼻尖部进行充填以加强和恢复鼻部骨及软骨支架结构。结果与结论:所有病例鼻部畸形明显矫正,患侧鼻翼基底部抬升,双侧鼻孔、鼻穹窿部基本对称,鼻小柱延长、偏斜纠正,鼻尖部形态满意。自体软骨供区无明显畸形出现。随访1个月~3年,2例患侧鼻翼较术后塌陷、鼻翼稍低平、鼻孔略宽于健侧,其余病例鼻外形维持良好,植入物无排斥反应、移位及外露。提示,在唇裂继发鼻畸形整复手术中,应用植入材料充填可有效加强和恢复鼻部支架结构,明显改善鼻部畸形,术中应根据不同畸形的特点选择合适的植入充填材料。 相似文献
7.
8.
目的研究中原地区正常青年女性有关腹部形态的参数,为腹壁成形术和脐的重建移位术提供参考。方法测量281例健康未婚未育17~20岁女性的身高、体重、腹部长径、横径及脐点位置,并对所测数据进行统计学分析。结果测量数据显示腹部长径、横径、剑突下缘至脐点、剑突下缘至腹部长径中间点距离分别是(37.93±2.15)、(36.98±2.71)、(21.10±1.80)、(18.96±1.08)cm。腹部长径与身高呈正相关;腹部横径及腹部长径/横径与体重呈正相关。脐点位置低于腹部长径中间点约2.1cm。结论腹部正面轮廓形态测量在腹壁、脐成形手术中具有一定的临床参考意义。 相似文献
9.
随着广大人民群众对美的需求不断增加,整形美容市场急剧扩大,存在大量医疗隐患,对整形美容专科医师进行继续医学教育已成为社会所需。整形美容专科医师继续医学教育既可为规范整形美容市场打下坚实的基础,也可为基层医院整形美容外科的建立提供有力保障。此次教学实践对整形美容专科医师继续医学教育中的理论知识、临床能力、科研能力、美学修养、医学人文素质的培养及考核制度等方面进行了初步探索。文章就整形美容专科医师继续医学教育中积累的宝贵临床教学经验进行了归纳总结,同时对遇到的问题进行了深刻反思,旨在更好地开展整形美容专科医师继续医学教育工作,使继续医学教育更加人性化、科学化、正规化,帮助专科培训医师由外科向整形外科顺利转型,进一步提高整形美容专科医师的医疗专业水平和医疗服务质量,使其更好地服务于美容医疗行业、服务于社会。 相似文献
10.
背景:近年来研究表明热休克蛋白90和凋亡抑制蛋白Livin在细胞的凋亡过程中扮演着非常重要的角色,而两者在病理性瘢痕形成过程中的作用研究至今鲜有报道。
目的:从基因和蛋白水平分别检测热休克蛋白90和凋亡抑制蛋白Livin在病理性瘢痕中的表达情况及两者之间的关系。
方法:分别采用RT-PCR方法和免疫组织化学方法检测热休克蛋白90和Livin在24例瘢痕疙瘩、26例增生性瘢痕、22例非病理性瘢痕和20例正常皮肤组织中的表达水平。
结果与结论:瘢痕疙瘩,增生性瘢痕中热休克蛋白90和Livin的阳性表达水平高于非病理性瘢痕及正常皮肤组织(P < 0.05)。病理性瘢痕中热休克蛋白90和Livin表达呈正相关(rs=0.436, P < 0.05)。RT-PCR检测结果与免疫组织化学结果基本一致。结果提示热休克蛋白90和Livin在病理性瘢痕的形成过程中可能起着重要作用,且二者之间可能具有协同作用。 相似文献