两种多克隆刺激条件下人诱导性Treg表型的多样性变化

目的:研究人诱导性调节性T细胞(iTreg)细胞表型的多样性变化,并比较PMA/Ionomycin和PHA两种多克隆刺激对人iTreg的诱导的异同。方法:用Ficoll密度梯度离心分离出人PBMC,空白对照组直接检测,其余则在细胞培养液(非刺激对照组)、PMA/Ionomycin溶液(PMA/Ionomycin刺激组)或PHA溶液(PHA刺激组)中培养16小时,以流式细胞仪检测CD4+CD25+FoxP3+CD127-、CD4+CD25+FoxP3+IL-2-、CD4+CD25+FoxP3+IL-10+、CD4+CD25+FoxP3+TGF-β+和CD4+CD25+FoxP3+IFN-γ+的表达。结果:空白对照组显示,约4%的CD4+细胞表达CD4+CD25+FoxP3+CD127-,即nTreg。PBMC在细胞培养液培养16个小时,iTreg的表达无明显变化,但经多克隆刺激后,各不同细胞表型的iTreg的表达明显上升(均P<0.01),表明多克隆刺激可以明显诱导人iTreg的产生。PHA对IL-2-和TGF-β+iTreg的诱导比PMA/Ionomycin强(P<0.01),但仅PMA/Ionomycin可以诱导产生CD4+CD25+FoxP3+IFN-γ+iTreg,而PHA不能诱导。刺激后产生的CD4+FoxP3+IFN-γ+PBL表达与CD25水平呈逆相关。结论:多克隆刺激可以诱导产生人iTreg,PMA/Ionomycin和PHA对人iTreg诱导的机制和程度不一样。多克隆刺激后产生的不同细胞表型反映了人iTreg的多样性变化。     

连续缝合和间断缝合吻合血管对动静脉内瘘的影响

目的探讨不同血管吻合方式（连续性血管吻合、间断性血管吻合）对动静脉内瘘术成功率的影响。方法将69例终末期慢性肾衰竭患者随机分成3组，连续缝合组、双侧间断缝合组、单侧间断缝合组，按不同的血管吻合方式进行手术，比较各组间内瘘成功率的差异。结果间断缝合组与连续缝合组内瘘成功率比较，差异具有统计学意义（P〈0．05）；双侧间断缝合组与单侧间断缝合组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论动静脉内瘘手术中，采取间断缝合法吻合血管比连续缝合法能获得更高的成功率，而双侧间断缝合法与单侧间断缝合法比较并无明显优势。     

中国肝癌肝移植的现状与医学伦理学思考

探讨中国肝癌肝移植的现状,包括受体的选择标准、疗效以及与其他常规治疗的比较,并思考由此而带来的伦理学问题。在我国目前大力发展肝移植的同时,我国卫生资源短缺且分配不均带来了大量尖锐的伦理学冲突。对于肝癌患者,临床医生是选择常规治疗、肝移植还是放弃治疗,已不简单是一个临床决策,其背后的医学伦理学问题值得深思。     

肾移植术后并发恶性肿瘤患者免疫抑制药方案的选择

［摘要］目的评估肾移植术后并发恶性肿瘤患者选择不同免疫抑制药方案的有效性和安全性。方法肾移植术后并发恶性肿瘤患者10例,在检查确诊恶性肿瘤后,将其免疫抑制药方案调整成以西罗莫司为基础免疫抑制的方案,观察肿瘤生长、复发情况,监测移植肾功能及排斥反应情况。结果所有患者随访至少1 a,其中9例病情稳定,1例患者因肿瘤扩散转移,于调整药物后7个月死亡;1例患者药物转换2个月后出现一次急性排斥反应,激素冲击治疗后恢复。结论对肾移植术后并发恶性肿瘤患者使用以西罗莫司为基础免疫的免疫抑制方案安全,有效。     

人天然型和诱导型CD4+CD25+FoxP3+CD127-Treg细胞表型多样性的比较

BACKGROUND: Regulatory T cells (Treg) are classified into two subsets, nature Treg (nTreg) and induced Treg (iTreg). Although there is consensus that CD4+CD25+FoxP3+CD127- is the widely accepted phenotype of Treg, it remains unclear what is the difference in phenotypes including cytokine patterns of nTreg and iTreg. OBJECTIVE: To understand and compare the plasticity of nTreg and iTreg and to search the exact mechanism of cytokine secretion in Tregs. METHODS: We investigated the frequency and cytokine pattern of CD4+CD25+FoxP3+CD127-nTreg in freshly separated peripheral blood mononuclear cells of five healthy individuals using 8-color fluorescence flow cytometry (FACSCanto II). Subsequently, after 9 days of allostimulation in mixed lymphocytes, the frequency and cytokine pattern of CD4+CD25+FoxP3+CD127-iTreg were determined and analyzed. RESULTS AND CONCLUSION: In fresh cells, (1.5±0.70)% of CD4+ T cells were CD4+CD25+FoxP3+CD127- nTregs. Almost all these cells expressed interferon (IFN)-γ-, interleukin (IL)-2- or transforming growth factor-β+, and partial cells expressed IL-10+ or IL-10-. After 9-day allostimulation, the number of CD4+CD25+FoxP3+CD127- iTreg expressing IFN-γ+, IL-2-, IL-2+, IL-10+ or TGF-β+ increased strongly. The main subsets of human nTregs were CD4+CD25+FoxP3+CD127-IFN-γ-IL-2-IL-10+TGF-β+ and CD4+CD25+FoxP3+CD127-IFN-γ-IL-2-IL-10- TGF-β+ T cells. The proportion of each subset in CD4+ T cells was (1.1±0.59)% and (0.39±0.16)%, respectively. Whereas the main subsets of human iTregs were CD4+CD25+FoxP3+CD127-IFN-γ+IL-2-IL-10+TGF-β+ and CD4+CD25+FoxP3+CD127-IFN-γ+IL-2+IL-10+TGF-β+. Human nTregs were characterized as IFN-γ-IL-2- double negative, producing IL-10 and TGF-β or only TGF-β without IL-10, and not proliferating in vitro. During the allostimulation in mixed lymphocytes, IFN-γ+ iTregs proliferated remarkably. One-third of IFN-γ+ iTreg expressed IL-2+, and two-thirds of IFN-γ+ iTregs expressed IL-2, both of which produce IL-2 and TGF-β. Our results imply that CD4+CD25+FoxP3+CD127- Treg are potentially immunosuppressive probably because of their mandatory TGF-β and optional IL-10 production.  中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程       

中国肝癌肝移植的现状与展望

肝癌行肝移植治疗的指征、效果和相关问题一直存在争论,国际上已经有数个通用的肝癌肝移植标准,如Milan标准、Pittsburgh标准、UCSF标准等等,中国的移植学家们也在纷纷探讨适合中国的肝癌肝移植标准.本文收集并分析近年来国内外的文献,结合本移植中心460例肝移植的病例,对肝癌的分期标准、晚期肝癌行肝移植的指征进行了探讨,笔者认为影响我国肝癌肝移植的主要因素有:供肝的来源、术后乙肝及肿瘤的复发及相关社会因素等.     

肾移植术后免疫抑制剂的选择

肾移植术后,为了预防可能发生的排斥反应,医生会选用各种免疫抑制剂以抑制人体的自身免疫力。在移植术后近期,免疫抑制剂方案的选择是否适当,在很大程度上将影响移植受者的人、肾存活。由于免疫抑制剂方案的选择完全遵循个体化治疗的原则,因此,如何选择合适的免疫抑制剂方案是每个移植医生必须面对的一大课题。各种免疫抑制剂方案的选择要基于以下两个大的方面：①疗效最佳、副作用最小,避免因免疫抑制过度导致感染、其他脏器功能损害等;②药物之间的相互作用。本文就临床常见免疫抑制剂的应用,浅谈一己之见,旨在抛砖引玉。     

亲属活体供肾移植治疗Alport综合征(附1例报道并文献复习)

目的:探讨亲属活体供肾移植治疗Alport综合征(AS)的安全性和治疗特点。方法:2004年7月为1例Alport综合征患者施行亲属活体供肾移植手术,术后对供、受者均随访1年7个月,分析亲属供肾移植治疗AS的特点以及评价活体供肾的安全性。结果:供者各项生命指标良好,肝肾功能无明显变化;受者术后肾功能恢复理想,随访期间未见AS复发及其他脏器功能的继续损害。结论:Alport综合征是一种临床上较少见的遗传性疾病。亲属活体供肾移植治疗AS是一种可供移植医生考虑的治疗手段,对于是否存在术后的AS复发尚有待更长期的临床观察。     

肝肾联合移植

肝肾联合移植是临床上实施数量较多的一种腹部器官联合移植。肝肾联合移植的适应证选择十分重要,目前临床上主要适用于PCLKD、PHI、HRS和终末期肝病合并肾损害或终末期肾病合并肝损害。肝肾联合移植中移植肝对同期移植的肾脏具有明显的免疫保护作用,其免疫保护机制目前尚不明确,主要的假说解释有抗原捕获学说、可溶性抗原释放学说、微嵌合学说。     

选择性5-HT2A受体拮抗剂沙格雷酯延缓大鼠移植动脉急性排斥反应后纤维化

目的 研究选择性5-羟色胺2A(5-HT2A)受体拮抗剂沙格雷酯延缓大鼠移植动脉急性排斥反应后纤维化的作用。方法 实验分为3组,同种移植对照组（供、受者分别为Wistar大鼠和SD大鼠）、同系移植对照组（供、受者均为SD大鼠）和实验组（供、受者分别为Wistar大鼠和SD大鼠）,建立大鼠腹主动脉移植急性排斥反应后纤维化模型。术后各组大鼠喂养条件相同,仅实验组大鼠每天给予沙格雷酯灌胃,25 mg/kg。术后第14天和第60天对移植动脉行病理组织学及免疫组织化学检测,观察移植动脉内膜增生情况以及增殖细胞核抗原(PCNA)和平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况。结果 所有移植手术均获成功。术后第14天时,同种移植对照组移植动脉出现典型的急性排斥反应改变。术后第60天,同种移植对照组、同系移植对照组和实验组内膜指数分别为(62.41±6.54)％、(0.94±0.33)％和(16.71±3.94)％,3组间内膜指数的两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05); PCNA和α-SMA细胞阳性率分别为(0.99±0.54)％和(0.79±0.33)％、(22.43±3.40)％和(23.70±2.78)％及(7.37±4.61)％和(8.21±3.11)％,3组间PCNA阳性率的两两比较及α-SMA阳性率的两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论 大鼠移植动脉急性排斥反应后可继发严重纤维化,沙格雷酯可显著延缓急性排斥反应后纤维化的发生、发展,其作用机制可能与下调PCNA和α-SMA的表达有关。