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【目的】 目前,间充质干细胞(MSC)治疗糖尿病足溃疡效果不佳,具体原因可能是高糖环境导致MSC增殖分化能力降低,并且诱导MSC产生大量炎症因子,导致溃疡局部组织微环境过度炎症。促红细胞生成素(EPO)是一种新型抗炎因子,我们将两者复合,探究EPO刺激的MSC促进糖尿病足溃疡愈合的效果以及其机制。 【方法】 在体实验,制备雄性糖尿病C57小鼠,随后结扎其后肢动脉,建立糖尿病足溃疡模型,随后将EPO刺激的MSC种植在新型生物材料上,将生物材料敷盖在C57小鼠的糖尿病足溃疡伤口上,观察伤口愈合效果并于第0、3、7、10天切取伤口皮肤组织并制备组织切片,采用免疫组织化学法,分别使用CD31、CD68单克隆抗体检测溃疡组织中的内皮/单核细胞。离体实验,培养MSC和人脐静脉内皮细胞(HUVEC),通过MTT法检测细胞增殖,通过划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移能力,通过酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测EPO刺激MSC后上清液中血管内皮生长因子(VEGF)以及肿瘤坏死因子(TNF-α)含量。 【结果】 在体实验证明实验组(EPO-MSC)溃疡愈合情况明显优于对照组(MSC组),并且实验组伤口组织新生血管多于对照组,免疫组织化学法证实实验组MSC分化成内皮细胞的比例多于对照组。体外实验证明促EPO能促进高糖环境中MSC分泌VEGF,促进内皮细胞生长和迁移,使其更好更快地形成血管。同时,EPO也可以减轻高糖环境对MSC的损伤,促进MSC增殖和迁移并且抑制高糖诱导MSC分泌炎症介质TNF-α。 【结论】 EPO刺激的MSC能有效促进糖尿病足溃疡愈合,其机制在于通过改善MSC局部微环境和抗炎症损伤来诱导血管再生进而促进糖尿病足溃疡愈合。 相似文献
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