离体外翻肠囊法研究蒙药塔布森-2中8个苯丙素类成分的肠吸收特性

目的：考察蒙药塔布森-2（tabson-2 decoction,TBD）中隐绿原酸、绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C、1,5-二咖啡酰奎宁酸、咖啡酸、3-羟基肉桂酸、二氢咖啡酸8个苯丙素类成分的肠吸收动力学特性。方法：采用大鼠外翻肠囊实验,利用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱联用仪（UPLC-MS/MS）检测肠吸收液中8个化学成分的含量,计算各成分在各肠段的累计吸收量、吸收速率常数和表观渗透系数。结果：在同一浓度下8个成分的最佳吸收部位基本为空肠或十二指肠,吸收方式为主动转运和被动扩散相结合。结论：肠道对TBD中8个苯丙素类成分均有肠吸收,空肠和十二指肠可能是其主要吸收部位。本研究可为TBD的药物临床开发提供一定的科学依据。     

蒙药塔布森-2中9种苯丙素类成分在Caco-2细胞中的吸收特性研究

目的 研究蒙药塔布森-2(Tabson-2 decoction,TBD)中苯丙素类成分在Caco-2细胞中的吸收特性,初步阐明TBD的口服吸收机制。方法 采用Caco-2细胞单层细胞模型,通过UPLC-MS/MS分析TBD在Caco-2细胞中的摄取成分,并建立UPLC-MS/MS分析方法测定TBD中吸收最好的9种苯丙素类成分原儿茶酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、1,5-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸C、咖啡酸、二氢咖啡酸、3-羟基肉桂酸在Caco-2细胞中的含量,分别考察时间、浓度和P糖蛋白抑制剂对各成分的吸收影响。结果 研究发现咖啡酸、二氢咖啡酸的总摄取量在0~180 min为上升趋势,未呈现饱和;3-羟基肉桂酸在90 min左右吸收恒定趋于饱和;隐绿原酸、1,5-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸C、新绿原酸、绿原酸、原儿茶酸的摄取量约从90 min开始,随时间的增加先下降后上升。与苯丙素类成分相比,加入P-糖蛋白抑制剂维拉帕米及环孢菌素A后对二氢咖啡酸的吸收产生了影响,说明二氢咖啡酸是P-糖蛋白底物。结论 TBD主要苯丙素类成分进入Caco-2细胞以被动扩散为主,主动转运为辅,且除二氢咖啡酸外其他8个成分的吸收过程不受P-糖蛋白的外排作用影响。     

蒙药塔布森-2对斑马鱼糖皮质激素性骨质疏松的改善作用

目的：探究蒙药塔布森-2(TBD)及其特征成分抗斑马鱼糖皮质激素性骨质疏松的作用。方法：随机将受精后3天（3 dpf）的斑马鱼幼鱼分为模型组、阳性药物组、空白组、TBD给药组、特征成分单体组（3-羟基肉桂酸、紫云英苷、绿原酸、咖啡酸、原儿茶酸）及配伍给药组。以25 g/mL泼尼松龙诱导斑马鱼糖皮质激素性骨质疏松模型,给药组分别给予低、中、高浓度药物;待幼鱼培养至7 dpf,采用茜素红S染色,正置光学显微镜观察拍照,记录并计算斑马鱼椎骨个数及脊椎硬骨染色面积。结果：泼尼松龙模型组显示造模成功;TBD高浓度组椎体个数及染色面积较模型组均显著增加（P<0.05,P<0.01）,呈一定的量效关系;单体特征成分及其配伍后可不同程度增加椎体个数及染色面积,其中高浓度配伍给药组较模型组椎体个数和染色面积显著增加（P<0.05）。结论：TBD可有效改善斑马鱼糖皮质激素性骨质疏松,其特征成分配伍后抗骨质疏松的作用优于各单体特征成分。     

斑马鱼骨质疏松模型的研究应用

骨质疏松症是由骨合成代谢和分解代谢之间的平衡改变引起的代谢性骨病,随着我国人口老龄化社会的到来以及不健康生活方式等因素的影响,骨质疏松症患病率呈增加趋势。导致骨质疏松症的病因多种多样,涉及到多种关键的生物学途径等。常用的几种骨质疏松症动物模型,都需要很长的时间来评估药物效果,耗时这一特征成为新药研发的主要障碍。斑马鱼是一种脊椎动物,非常适合于骨相关药物的研发实验,因为它具有许多特殊的优点,例如胚胎透明、骨骼发育快、鳞片再生快、与人类相关基因和信号通路高度同源等,这些是哺乳动物模型所没有的特征,近年来已被成功应用于骨质疏松的模型建立中。在实验中斑马鱼具有样品用量少、筛选快、准确率高、实验耗时短等优势,在药物活性成分或天然产物化合物的筛选等方面都具有显著优势,在骨质疏松防治新药研发中有良好的应用前景。本文将对骨质疏松症的研究现状、斑马鱼骨质疏松模型的建立及其应用进行综述,以便为骨质疏松症发病机制及抗骨质疏松症药物研究提供新的思路和方法。