慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化、乙肝肝癌患者Th1/Th2型细胞因子水平变化研究

目的分析慢性乙型肝炎(CHB)、乙肝肝硬化(LC)、乙肝肝癌(HCC)患者血清中Th1/Th2型细胞因子水平变化,为慢性乙型肝炎至肝癌的发生发展过程中的免疫变化研究提供线索,并为患者的临床治疗研究提供免疫学指标。方法选取2010年2月-2011年11月于首都医科大学附属北京佑安医院就诊的40例CHB患者、40例LC患者、53例HCC患者,用Luminex技术检测血清中Th1类细胞因子[白细胞介素(interleukin,IL)-12、干扰素(interferon,IFN)-γ和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α]水平及Th2类细胞因子(IL-4、IL-6和IL-10)水平,并将25例健康志愿者作为正常对照组进行比较。结果除TNF-α外,CHB组、LC组和HCC组Th1类IL-12、IFN-γ和Th2类IL-4、IL-6、IL-10细胞因子水平均低于正常对照组;CHB组中大部分Th1类和Th2类细胞因子都高于LC组和HCC组;HCC组中TNF-α细胞因子水平要高于CHB组、LC组。结论 CHB、LC和HCC患者体内Th1/Th2细胞因子分泌水平受到抑制,Th1/Th2平衡发生漂移,对HBV病毒的清除作用受到抑制。TNF-α在肝癌发生过程中发挥着重要作用。     

两步和三步法分离样本资源库抗凝血单个核细胞和血浆效果比较

目的比较两步和三步法分离外周血单个核细胞(PBMC)和血浆的效果。方法对送至样本资源库的16例抗凝血标本分别采用两步法和三步法分离PBMC及血浆,并对2种不同处理方法的分离效果进行比较。两步法为将抗凝血加入淋巴细胞分离液,离心后分别分离PBMC和血浆;三步法则先离心分离血浆后再加入淋巴细胞分离液,离心后分离PBMC。结果 2种处理方法处理后检测的活细胞数、总细胞数及活细胞比例结果相近,差异均无统计学意义(P0.05)。两步法血浆中细胞因子水平均低于三步法,其中25种细胞因子比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论两步法省时,操作少,在分离PBMC方面效果与三步法类似;但两步法在分离血浆方面会影响血浆细胞因子水平。     

急性HIV感染者外周血T淋巴细胞CD57抗原动态表达及临床意义分析

目的 研究CD57在HIV急性感染者外周血T淋巴细胞的动态表达情况及临床意义.方法 随机选取2006年11月-2009年12月期间确诊为HIV-1急性感染的17位患者为研究对象,15例健康体检者为对照组,收集HIV感染者1、3、6个月时间点及对照组外周血单个核细胞(PBMC),以流式细胞仪双色、三色分析法分别分析CD3+ CD57+T淋巴细胞、CD3+ CD4+ CD57+T淋巴细胞、CD3+CD8+CD57+T淋巴细胞的比例,并分析其与病毒载量、CD4+T细胞计数间的相关性.结果 在感染1、3、6个月外周血淋巴细胞中,CD57+T淋巴细胞比例分别为15.24％±1.49％、13.51％±2.45％及14.65％ ±1.83％,正常对照组CD57+T淋巴细胞比例为3.72％±0.56％,HIV感染1、3、6个月CD57+T淋巴细胞比例较正常对照组明显增高,差异有统计学意义(P均＜0.0001).在感染的1个月、3个月外周血中CD8+CD57+在淋巴细胞中的比例分别为7.79％ +2.10％、9.88％±2.36％,与对应时间点的病毒载量成正相关关系,R2分别为0.3700、0.3768,P值分别为0.0096、0.0088;与对应时间点CD4+T细胞计数成负相关关系,R2分别为0.3768、0.4235,P值分别为0.0215、0.0017.急性HIV感染1个月时间点,6例病情快速进展患者与11例病情非快速进展患者,CD8+ CD57+T细胞比例分别为11.20％±2.21％、6.16％±1.09％,CD4+ CD57+T淋巴细胞比例分别为2.79％ ±0.31％、1.40％±0.30％,病情快速进展患者CD8+CD57+T、CD4+CD57+T淋巴细胞比例均高于病情非快速进展组,P值分别为0.0338、0.0106.结论 HIV感染急性期CD57+T淋巴细胞比例增加,其中CD8+ CD57+T淋巴细胞百分比可反映HIV病毒载量变化及CD4+T淋巴细胞的计数情况,HIV急性感染早期CD57在淋巴细胞高表达提示病情进展迅速.     

HCV对HIV/HCV共感染患者病情进展的影响

目的探讨HCV对HIV/HCV共感染病情进展的影响。方法研究对象为2012年8月到北京佑安医院随访的HIV/HCV共感染者29例及HIV单独感染者20例。两组患者年龄、性别及HIV感染时间及感染方式、感染的HIV病毒亚型均具有可比性。外周血生化指标检测并采用瞬时弹性扫描仪FibroScan评估肝脏功能及纤维化程度,运用流式细胞技术检测外周血CD4+T、CD8+T细胞绝对计数。两组计量资料比较采用t检验,计数资料比较采用χ2检验。结果 HIV/HCV共感染组ALT、AST及TBil水平分别为(76.16±81.25)U/L、(87.66±71.32)U/L、(14.21±9.56)μmol/L,明显高于HIV单独感染组[(27.74±20.63)U/L、(45.65±16.95)U/L、(10.26±3.22)μmol/L],差异具有统计学意义(P值分别为0.004、0.005及0.046)。与HIV单独感染组相比,HIV/HCV共感染组Stiffness指数有升高的趋势,但差异无统计学意义(t=1.889,P=0.080)。HIV/HCV共感染组HIV病毒载量(拷贝/ml)的对数值为3.66±0.97明显高于HIV单独感染组的3.02±0.90(t=2.251,P=0.030)。HIV/HCV共感染组、HIV单独感染组CD4+T淋巴细胞计数及CD4+T/CD8+T细胞比例分别为(374.25±185.48)/μl及(0.33±0.17)、(496.45±230.98)/μl及(0.46±0.27),HIV/HCV共感染组CD4+T淋巴细胞计数及CD4+T/CD8+T细胞比例低于HIV单独感染组,差异具有统计学意义,P值分别为0.048、0.043。共感染组艾滋病发病率(27.59%)呈现出较HIV单独感染组(5%)高的趋势(P=0.063)。结论HCV促进HIV/HCV共感染者肝脏损伤,增强HIV复制,加剧机体免疫功能损伤,HCV可能加速HIV/HCV共感染者的病情进展。     

Th1/Th2类细胞因子在新型甲型H1N1流感重症患者不同预后转归中作用分析

目的 探讨细胞因子在新型甲型H1N1流感重症患者不同临床预后中作用。方法 2009年4月至2010年1月间北京佑安医院收治甲型H1N1流感重症患者28例（16例治疗痊愈,12例死亡）为研究对象,正常对照11例。Luminex技术检测血清中Th1/Th2细胞因子水平。结果 Th1类细胞因子中IL-2,IL-12 (P70),IFN-γ水平在死亡组明显低于治愈组及正常组,差异有统计学意义,P值均＜ 0.05。Th2类细胞因子中IL-4水平在死亡组明显低于治愈组及正常组,P=0.0012,0.031。结论 新型H1N1感染重症治愈患者、死亡患者Th1类细胞因子水平均呈下降趋势,死亡组患者下降更为明显,Th1类细胞因子水平的严重减低可能与重症患者预后不良相关。     

外周血趋化因子RANTES对肝细胞癌的诊断价值

目的探讨外周血调节活化正常T细胞分泌与表达因子（regulateduponactivationnormalTcellex．pressedandsecreted,RANTES）对乙肝病毒相关的肝细胞癌（HCC）的诊断价值。方法选择北京佑安医院2010年2月至2011年11月收治的慢性乙型肝炎患者35例、乙型肝炎肝硬化患者34例及乙肝病毒相关HCC患者47例。Luminex技术检测外周血清中趋化性细胞因子RANTES水平。结果HCC患者外周血RANTES水平[（23．27±21．16）ng/m1]明显高于慢性乙型肝炎[（7．81±4．06）ng／m1]及乙肝肝硬化患者[（5．36±6．13）ng／m1],3组比较差异有统计学意义（P〈0．001）。HCCⅡ期患者外周血RANTES水平明显高于I期患者,差异有统计学意义（31．94±25．94）ng／mlVS．（14．24±8．10）ng／ml,P=0．004]。RANTES预测慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化进展为HCC的阈值为7．85ng／ml,敏感性为93．5％,特异性为72．5％。结论HCC患者外周血中趋化因子RANTES水平明显增高,且HCCⅡ期患者RANTES水平明显高于I期患者．可作为乙肝病毒相关HCC诊断及病情评估的参考指标。     

乙型肝炎相关性肝癌患者血浆粒细胞集落刺激因子检测分析

目的探讨粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)对乙型肝炎(乙肝)相关性肝癌的诊断价值。方法采用Luminex液相芯片方法检测87例乙肝相关性肝癌患者(肝癌组)、40例慢乙肝患者(慢乙肝组)及25例健康对照组(对照组)血浆中G-CSF水平,评价G-CSF对乙肝相关性肝癌的诊断价值。结果肝癌组患者血浆G-CSF的平均值为(1152.23±458.57)pg/ml,明显高于慢乙肝组[(137.69±89.52)pg/ml]和健康对照组[(111.04±49.42)pg/ml],差异均有统计学意义(P均=0.000)。3组间G-CSF检测结果的差异有统计学意义(F=157.760,P=0.000)。慢乙肝组和对照组G-CSF水平的差异无统计学意义(P=0.333)。肝癌分期不同组间G-CSF水平的差异有统计学意义(F=2.495,P=0.037)。血浆G-CSF诊断乙肝相关性肝癌的ROC曲线下面积(AUC)为0.998,以G-CSF≥256.00pg/ml为阳性诊断界值,G-CSF诊断乙肝相关性肝癌的敏感性为98.9%,特异性为100.0%。结论乙肝相关性肝癌患者G-CSF呈高水平表达,G-CSF可作为诊断乙肝相关性肝癌的候选指标。     

cN0甲状腺微小乳头状癌中央区淋巴结转移风险分析及对手术的指导意义

目的分析cN0甲状腺微小乳头状癌（PTMC）发生中央区淋巴结转移的危险因素。方法收集200例cN0 PTMC病人的临床资料,包括性别、年龄、术前促甲状腺激素、BRAF基因突变与否、肿瘤直径、多灶性、单/双侧、是否合并慢性淋巴细胞性甲状腺炎、是否侵犯包膜,是否腺体外侵犯及术后病理。根据中央区淋巴结是否转移将病人分为淋巴结阳性组和淋巴结阴性组,分析cN0 PTMC发生中央区淋巴结转移的危险因素。结果单因素分析显示,年龄、肿瘤直径、多灶、侵犯包膜、腺体外侵犯、BRAF基因突变与PTMC病人发生中央区淋巴结转移具有相关性（P < 0.05~P < 0.01）。多因素logistic回归分析显示,年龄、肿瘤直径、多灶、侵犯包膜、BRAF基因突变阳性是中央区淋巴结转移的独立危险因素（P < 0.05~P < 0.01）。结论针对PTMC病人,如有年龄较小、肿瘤直径较大、多病灶、侵犯包膜、BRAF基因突变阳性的临床特征,中央区淋巴结转移的风险较高,即使术前评估中央区淋巴结为阴性,手术范围也应包含中央区淋巴结的清扫,减少癌症残留及复发的风险。     

单独感染HCV与HCV/HIV共感染患者外周血T淋巴细胞分化分析

目的 探讨单独感染HCV与HCV/HIV共感染患者外周血T淋巴细胞分化情况.方法 采集单独感染HCV患者(12例)、HCV/HIV共感染患者(27例)以及正常人群(13例)的外周静脉血,检测ALT、AST等生化指标;提取外周血单个核细胞(PBMC),通过流式细胞检测技术检测CD4+T和CD8+T细胞比例.结果 HCV/HIV共感染患者ALT水平[(53.08±9.78) U/L]显著高于单独感染HCV患者[(26.22±4.25)U/L],差异有统计学意义(P=0.0064).处于中期分化状态的CD4+T细胞,在正常人群中所占比例为(35.13±3.24)％,显著高于单独感染HCV患者[(9.01±3.70)％]和HCV/HIV共感染患者[(8.10±2.14)％],差异有统计学意义(P＜ 0.001).正常人群、单独感染HCV患者与HCV/HIV共感染患者晚期分化的CD4+T细胞所占比例分别为(2.52±2.54)％、(14.30±9.85)％及(15.23±11.58)％,正常人群晚期分化的CD4+T细胞比例显著高于单感染HCV与HCV/HIV共感染患者的比例,差异有统计学意义(P＜0.05),单独感染HCV与HCV/HIV共感染患者之间无差异.正常人群处于早期分化和中期分化的CD8+T细胞的比例分别为(42.73±2.08)％、(36.17±2.85)％,均显著高于单独感染HCV患者同期水平[(28.27±4.36)％、(13.15±4.23)％]及HCV/HIV共感染患者[(18.02±2.01)％、(16.60±3.06)％],差异均有统计学意义(P＜0.05);单独感染HCV患者的早期分化CD8+T细胞比例也显著高于HCV/HIV共感染患者,差异有统计学意义(P＜0.05).而处于晚期分化的CD8+T细胞,正常人群所占比例为(12.02±1.54)％,显著低于单独感染HCV患者[(49.30±3.85)％]及HCV/HIV共感染患者[(54.23±2.58)％],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 单独感染HCV及HCV/HIV共感染影响T淋巴细胞的分化状态;HCV/HIV共感染影响处于早期分化的CD8+T细胞比例.     

一种新的手术策略：完全经颏下单孔腔镜甲状腺癌侧颈部淋巴结清扫术

背景与目的 传统开放甲状腺癌侧颈部淋巴结清扫手术采用颈部“L形”或者“低领式长弧形”切口,手术创伤大且在颈部留下较大瘢痕。由于颈部操作空间小、解剖复杂,采用腔镜技术清扫侧颈部淋巴结难度亦较大。为此,笔者探索了一种新的手术策略—完全经颏下单孔腔镜甲状腺癌侧颈部淋巴结清扫术。本文通过介绍1例采用该术式行甲状腺癌侧颈部淋巴结清扫患者的资料,初步探讨该术式的可行性。方法 回顾分析1例中国科学技术大学附属第一医院甲乳外科2022年9月完成“完全经颏下单孔腔镜甲状腺癌侧颈部淋巴结清扫术”患者的临床资料。结果 手术时间4.1 h,术后第5天出院,无感染,无声音嘶哑,无低钙性手足麻木等并发症。患者颈部自然体位时手术切口瘢痕位于颏下凹陷处,相对隐蔽不易被发现,患者对颏下切口满意。结论 采用“颏下单孔”入路行腔镜下甲状腺癌侧颈部淋巴结清扫术安全可行,初步判断该技术具有创伤小、无明显术野盲区、切口瘢痕隐蔽等优势。