siRNA抑制外源绿色荧光蛋白在neuro-2a细胞株中的表达

目的：用RNAi技术抑制哺乳动物神经元中外源报告基因的表达，并探讨该过程中RNAi的时间及剂量效应，为利用RNAi技术研究神经元基因功能提供参考。方法：采用神经细胞来源的细胞系neuro-2a小鼠神经瘤细胞为模型，将外源绿色荧光蛋白（GFP）基因转染到neuro-2a细胞内，利用体外转录法合成siRNA，分为3个剂量组对其进行干扰。结果：Neuro-2a细胞可以被有效地转染，而且siRNA在neuro-2a细胞内可以有效发挥干扰作用。这种干扰作用呈现出一定的剂量效应。结论：RNAi技术可以成功用于neuro-2a细胞抑制基因的表达，这种对GFP表达规律及RNAi剂量效应的研究为利用RNAi技术研究神经元基因功能提供了一定的理论参考和依据。     

外源性磷酸肌酸对冠状动脉搭桥病人围术期免疫系统的影响

目的 观察用外源性磷酸肌酶（ＣＰ）对冠状动脉搭桥（ＣＡＢＧ）病人围术期补体及免疫球蛋白的变化,评价其对免疫系统的影响。方法 ２８例ＣＡＢＧ病人随机分为ＣＰ组１７例,对照组１１例,ＣＰ组于术前、后备用ＣＰ３～７ｄ,每天２ｇ静脉滴注,术中将ＣＰ加入心脏停搏液中,对照组椁前、中、后均不用ＣＰ。观察两组病人术前１周、麻醉诱导后、术中阻断升主动脉后５、３５、６５ｍｉｎ（１４例病人）、术毕、术后２４ｈ、术后１     

经上腔静脉逆行灌注脑保护的应用现状

中枢神经系统（ＣＮＳ）功能障碍仍是心血管外科，尤其是胸主动脉瘤手术的严重并发症之一。Ｕｓｕｉ［１］等人总结了４９个医院２２８例主动脉瘤手术的病人，其脑并发症高达２０．２％（４６／２２８）。因此，各种脑保护措施的研究对减少术后并发症、提高手术成功率具有重要的临床意义。逆行性脑灌注（ｒｅｔｒｏｇｒａｄｅｃｅｒｅｂｒａｌｐｅｒｆｕｓｉｏｎ—ＲＣＰ）是一种较新的脑保护措施。本文简要综述ＲＣＰ、特别是经上腔静脉（ＳＶＣ）的ＲＣＰ的发展、研究和临床应用现状。一、ＲＣＰ的发展经ＳＶＣ的ＲＣＰ首先是由Ｍｉｌｌ…     

亲缘群体单体型推断的研究进展

随着高通量的基因分型技术的出现,越来越多的单核苷酸多态性( single nucleotide polymorphism,SNP)可被检测。基因组研究中,单体型分析已被运用到SNP位点与复杂性状的关联分析中。现有的单体型推断方法包括基于非亲缘群体的方法,DNA pool样本方法和系谱资料方法。不过家庭及亲缘数据可为单体型推断提供很重要的信息,利用这些信息进行单体型推断会增加准确性。如今对亲缘群体单体型推断的算法和软件已有很多报道。该文的目的是回顾这些算法、软件以及它们的优缺点和适用的群体类型,同时探讨仍然存在的问题和面临的挑战。     

微阵列数据的常用元分析方法

微阵列技术被越来越广泛地应用于生物学的各个领域,但一般实验样本量较小,造成分析结果可靠性不高.在模式生物和人方面,因为技术平台相同、研究目的相同或者相似,而使很多单独研究可以整合起来进行统一分析.元分析可以有效地将相似实验的结果进行合并,增加统计功效.本文介绍了在微阵列分析中常用的元分析方法,并对各种方法的优缺点简要概述.     

小干扰RNA抑制neuro-2a细胞内源β位淀粉样前体蛋白裂解酶1基因的表达

目的:分析小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)抑制neuro-2a细胞内源β位淀粉样前体蛋白裂解酶1基因(Beta-site APP cleaving enzyme protein,BACE1)的表达情况。方法:实验于2004-12/2006-06在中山大学中山医学院和上海交通大学农业与生物学院完成。①用脂质体将EGFP基因表达载体pEGFP-C1 Vector和体外转录合成的针对EGFP基因的小干扰RNA(siEGFP)分别或同时转染neuro-2a细胞,在倒置荧光显微镜下计算EGFP在neuro-2a细胞中的表达率。②将体外转录合成的siBACE1-1,siBACE1-2,siBACE1-3转染neuro-2a细胞,干扰24,48,72h后分别用Real time RT-PCR定量分析siBACE1对内源BACE1基因表达的抑制率和干扰的时效性。结果:①外源EGFP基因转染neuro-2a细胞后,43%neuro-2a细胞高表达EGFP蛋白。通过转染siEGFP则可有效抑制EGFP基因表达。②3个干扰位点的siBACE1对BACE1基因表达有不同的抑制效率,siBACE1-3使BACE1m RNA表达水平下降60%,siBACE1-1为13%,siBACE1-2对BACE1 mRNA无明显的抑制作用。③siBACE1抑制内源BACE1基因的表达与干扰时间相关,siBACE1干扰24h、48h后BACE1 mRNA的表达与正常组无明显差异(P>0.05),但干扰72h后,siBACE1-3和siBACE1-1均使BACE1 mRNA表达量下降。结论:体外转录合成的siBACE1能有效抑制neuro-2a细胞内源BACE1基因表达,其抑制率与BACE1基因的干扰位点和干扰时间相关。     

冠状动脉搭桥围手术期糖代谢的变化研究

通过观察冠心病（ＣＡＤ）患者围术期糖代谢的变化趋势,探讨ＣＡＤ患者在应激反应下的胰岛素抵抗（ＩＲ）状态。１．资料与方法：１９９８年４月～１９９８年６月,随机选择３４例心脏手术患者,ＣＡＤ组２８例,其中未合并糖尿病者２４例,为Ａ１组,合并非胰岛素依赖性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）４例,为Ａ２组,风湿性心脏病（ＲＨＤ）６例均未合并糖尿病为对照Ｂ组。常规体外循环预充及转流,整个手术过程及围术期不使用外源性胰岛素。各组患者均于术前１周、手术麻醉诱导后（术前）、ＣＰＢ阻升主动脉后１０分钟（术中１）及间隔３０分钟（…     

婴幼儿深低温停循环下的脑损伤研究进展

<正>近20年来,婴幼儿先天性心脏病术后的病死率显著下降,而中枢神经系统(CNS)的并发症相比之下就显得极为重要。深低温停循环技术(DHCA)是在治疗儿童复杂心血管畸形手术中广泛采用的一种体外循环(CPB)方法。近年来有关DHCA术后CNS特别是脑并发症的研究报道亦渐增多。兹对脑损伤的机制及脑保护问题作一综述。     

经下腔静脉逆行灌注腹腔脏器保护作用的研究进展

经下腔静脉逆行灌注腹腔脏器是作为全身逆行灌注（ｗｈｏｌｅｂｏｄｙｒｅｔｒｅ－“ｇｇｇｄｅＰｅｒｆｕｓｉｏｎ，ＷＢＲＰ）的一部分，最早由Ｕｅｄａ［’ｊ提出的。全身逆行灌注是在体外循环（ＣＰＢ）的深低温停循环（ＤＨＣＡ）基础上产生的，其定义有多种，Ｙａｓｕｕｒａ。’］等以ｔｏｔａｌｂｏｄｙｒｅｔｒｏｇｒａｄｅｐｅｒｆｕｓｌｏｎ－ＴＢＲＰ称之，Ｍａｔａｌａｎｉｓ［’］等认为重要器官逆行灌注（ｖｉｔａｌｏｒｇａｎｒｅｔｒｏ－ｇｇｇｄｅＰｅｒｆｕｓｌｏｎ，ＶＯＲＰ）这一名词更恰当。因为人体脑、脊髓、肝脏及…