HIF-2与肾细胞癌研究进展

近来新发现的缺氧诱导因子2(hypoxia inducib le factor 2,HIF-2),其作用与肾细胞癌有密切关系,目前研究显示其在肾细胞癌发病过程中起重要的作用。本文就目前国外对缺氧诱导因子2与肾细胞癌关系的研究进行综述。     

紧密连接蛋白11在非梗阻性无精子症患者睾丸组织中的表达

目的:分析紧密连接蛋白11(CLAUDIN-11)在非梗阻性无精子症(NOA)患者不同生精障碍类型的睾丸组织中的表达情况,探讨其临床意义。方法:62例NOA患者按不同病理类型分为精子发生能力低下(HS)组和唯支持细胞综合征(SCO)组,其中HS组30例,SCO组32例。免疫组化法检测CLAUDIN-11在睾丸组织中的表达,实时荧光定量PCR检测CLAUDIN-11 mRNA的表达变化,化学发光法检测生殖激素在两组间的差异。结果:免疫组化结果显示,CLAUDIN-11在HS组的表达主要分布于靠近生精小管管壁的支持细胞胞质,在SCO组的表达定位混乱。实时荧光定量PCR结果显示,CLAUDIN-11 mRNA在SCO组表达高于HS组,分别为0.013±0.002、0.008±0.001(t=10.616,P0.01)。血清LH和FSH在HS组和SCO组患者中差异显著[(3.62±1.34)IU/L vs(4.96±3.10)IU/L,(5.36±2.80)IU/L vs(10.65±9.18)IU/L,P均0.05]。结论:CLAUDIN-11在睾丸支持细胞上的表达上调,可能在NOA患者睾丸生精功能障碍的发生和发展中起重要作用。     

无症状肾上腺偶发瘤46例临床分析

目的提高无症状肾上腺偶发瘤的诊断和治疗水平。方法对46例无症状肾上腺偶发瘤病例的临床资料进行分析研究。结果46例无症状肾上腺偶发瘤患者年龄25—76岁,平均51岁;良性肿瘤43例（93．4％）,恶性肿瘤3例（6．6％）;无分泌功能肿瘤21例（45．6％）,有分泌功能肿瘤13例（28．2％）;行开放手术切除20例（43．4％）,腹腔镜手术切除23例（50％）,未手术3例（6．6％）。结论对无症状肾上腺偶发瘤应联合应用影像学和实验室检查以明确诊断;大多数无症状肾上腺偶发瘤应行手术治疗,小于2cm者可长期随访。     

F16微通道与标准通道经皮肾镜取石术临床疗效比较

目的探讨F16微通道与标准通道经皮肾镜取石术在临床治疗中的效果差异。方法选取2017年7月至2019年10月安徽省宁国市人民医院收治的上尿路结石患者110例,根据治疗方法分为微通道组55例(采用F16微通道经皮肾镜取石术)和标准组55例(采用标准通道经皮肾镜取石术)。对比两组的手术时间、出血量、术后即刻结石清除率、4周后的结石清除率、手术并发症发生率;于手术前、术后24h检测尿液肾损伤分子-1(kidney injury molecule 1,KIM-1)、皮质醇(cortisol,Cor)、去甲肾上腺素(noradrenaline,NE)、肾上腺素(epinephrine,E)水平。结果微通道组患者的手术时间长于标准组,差异有显著性(P<0.05),微通道组患者的手术出血量、住院时间、并发症发生率低于标准组,差异有显著性(P<0.05);两组的术后即刻结石清除率、4周后的结石清除率差异无显著性(P>0.05)。两组患者术前KIM-1、Cor、E、NE差异无显著性(P>0.05);微通道组术后24h的KIM-1、Cor、E、NE测定值均低于标准组,差异有显著性(P<0.05);两组患者术后24h的KIM-1、Cor、E、NE测定值较术前均显著增高差异有显著性(P<0.05)。结论采用F16微通道经皮肾镜取石术与标准通道经皮肾镜取石术的结石清除率效果差异无显著性,但是前者的创伤更小,术后引起患者应激反应及肾功能损伤程度更轻。     

人反义血管内皮生长因子基因载体构建及对肾细胞癌血管内皮生长因子表达的影响

目的:构建反义血管内皮生长因子基因表达载体,观察其对肾癌细胞血管内皮生长因子表达的影响.方法:实验于2006-07/2007-03在郑州大学第三附属医院实验中心完成.①实验材料:质粒pcDNA3.1(-),宿主菌DH5α,肾癌细胞株786-0.②实验过程:克隆人血管内皮生长因子基因,将反义血管内皮生长因子基因定向克隆于质粒pcDNA3.1(-)表达载体,酶切鉴定;转染人肾癌细胞,并分别命名为反义血管内皮生长因子组和空载体组,未转染细胞命名为对照组;G418筛选阳性克隆.③实验评估:反转录-聚合酶链反应方法检测血管内皮生长因子mRNA的表达,免疫组织化学法检测血管内皮生长因子基因的蛋白表达,流式细胞术检测细胞周期,四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长情况.结果:①成功构建反义血管内皮生长因子基因表达载体.②反义血管内皮生长因子组血管内皮生长因子mRNA的表达受到抑制,明显低于空载体组和对照组血管内皮生长因子mRNA的表达(P＜0.01),空载体组血管内皮生长因子mRNA的表达没有受到影响.③反义血管内皮生长因子组的血管内皮生长因子蛋白表达明显降低,明显低于空载体组和对照组(P＜0.01),空载体组和对照组血管内皮生长因子蛋白的表达差异无显著性.④反义血管内皮生长因子组细胞生长减慢,G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,反义血管内皮生长因子组细胞生长明显减慢.结论:成功构建血管内皮生长因子的pcDNA3.1(-)反义基因表达载体,人反义血管内皮生长因子基因可明显降低肾癌细胞血管内皮生长因子基因在转录和翻译水平的表达,抑制肾癌细胞生长,为肾癌基因治疗提供一定的实验依据.     

RNA干扰对前列腺癌PC-3细胞血管内皮生长因子表达的研究

目的:构建前列腺癌血管内皮生长因子(VEGF)RNA干扰(RNAi)真核表达载体,并研究RNAi对前列腺癌VEGF表达的影响。方法:合成VEGFRNAi片段,将RNAi片段定向克隆于RNAi表达载体,测序鉴定;RNAi表达载体转染人前列腺癌PC-3细胞,Western印迹法检测VEGFRNAi表达载体对VEGF蛋白表达的影响,MTT法检测转染VEGFRNAi表达载体对细胞生长的抑制作用。结果:成功构建VEGFRNAi真核表达载体;VEGFRNAi组VEGF蛋白的表达明显降低,显著低于空载体组和未转染的对照组;前列腺癌PC-3细胞24、48、72h的生长抑制率分别为23.5%、33.5%、40.8%。结论:VEGFRNAi可以抑制前列腺癌PC-3细胞蛋白的表达和抑制细胞生长,为前列腺癌的生物治疗提供一定的实验基础。     

RNA干扰缺氧诱导因子2对肾癌786-0细胞的影响

目的：研究RNA干扰缺氧诱导因子2（HIF-2）对肾癌786-0细胞的影响。方法:合成HIF-2 RNAi片段，将RNAi片段定向克隆于RNAi表达载体，测序鉴定；转染人肾癌786-0细胞, RT-PCR、Western 印迹法检测HIF-2 RNAi表达载体对HIF-2基因表达的影响，MTT法检测转染HIF-2 RNAi表达载体对细胞生长作用，裸鼠种植肿瘤观察RNA干扰组对肿瘤生长的影响。结果:RNA干扰组HIF-2mRNA的表达受到抑制，明显低于空载体组和对照组HIF-2mRNA的表达(P<0.01),空载体组HIF-2mRNA的表达没有受到影响；RNA干扰组的HIF-2蛋白表达明显降低，明显低于空载体组和对照组(P<0.01)，空载体组和对照组HIF-2蛋白的表达无显著差异；RNA干扰组细胞生长减慢,RNA干扰组肿瘤体积和瘤重均小于空白组(P<0.01)。结论:RNA干扰HIF-2可以抑制肾癌786-0细胞HIF-2的表达和抑制细胞生长，减慢裸鼠肿瘤的生长；为肾癌的生物治疗提供一定的实验基础。     

人反义血管内皮生长因子基因载体构建及对肾细胞癌血管内皮生长因子表达的影响☆

目的： 构建反义血管内皮生长因子基因表达载体，观察其对肾癌细胞血管内皮生长因子表达的影响。 方法：实验于2006-07/2007-03在郑州大学第三附属医院实验中心完成。①实验材料：质粒 pcDNA3.1(－)，宿主菌DH5α，肾癌细胞株786-0。②实验过程：克隆人血管内皮生长因子基因，将反义血管内皮生长因子基因定向克隆于质粒pcDNA3.1(－)表达载体，酶切鉴定；转染人肾癌细胞，并分别命名为反义血管内皮生长因子组和空载体组，未转染细胞命名为对照组；G418筛选阳性克隆。③实验评估：反转录-聚合酶链反应方法检测血管内皮生长因子mRNA的表达，免疫组织化学法检测血管内皮生长因子基因的蛋白表达，流式细胞术检测细胞周期，四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长情况。 结果：①成功构建反义血管内皮生长因子基因表达载体。②反义血管内皮生长因子组血管内皮生长因子mRNA的表达受到抑制，明显低于空载体组和对照组血管内皮生长因子mRNA的表达(P < 0.01),空载体组血管内皮生长因子mRNA的表达没有受到影响。③反义血管内皮生长因子组的血管内皮生长因子蛋白表达明显降低，明显低于空载体组和对照组(P < 0.01)，空载体组和对照组血管内皮生长因子蛋白的表达差异无显著性。④反义血管内皮生长因子组细胞生长减慢，G1期细胞比例增加，S期细胞比例减少,反义血管内皮生长因子组细胞生长明显减慢。 结论：成功构建血管内皮生长因子的pcDNA3.1(－)反义基因表达载体，人反义血管内皮生长因子基因可明显降低肾癌细胞血管内皮生长因子基因在转录和翻译水平的表达，抑制肾癌细胞生长，为肾癌基因治疗提供一定的实验依据。     

RNA干扰缺氧诱导因子2对肾癌细胞周期和凋亡的影响

研究表明肾细胞癌主要表达缺氧诱导因子2(HIF-2),其主要参与血管生成、糖酵解等调节,在肿瘤生长过程中具有较重要作用[1].我们通过构建HIF-2RNA干扰真核表达载体转染入肾癌细胞中,观察HIF-2 RNA干扰对肾癌的HIF-2表达的影响,观察其对肾癌细胞周期和细胞凋亡的影响.     

缺氧诱导因子-1与前列腺癌研究进展

缺氧诱导因子-1(HIF-1)与前列腺癌存在密切的关系。研究表明HIF-1在前列腺癌中不但与血管生成因子、增殖与存活因子、葡萄糖转运以及糖分解酶等有关,而且与p53、p21、信号转导通路等有关。通过对HIF-1的深入研究将对前列腺癌的诊断与治疗提供新的思路。现对HIF-1的结构、功能及与前列腺癌关系进行综述。