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1.
生存素基因突变体诱导胃癌细胞有丝分裂障碍的实验研究 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 观察生存素基因突变体质粒(Cys84Ala)对胃癌细胞有丝分裂过程中细胞动力学行为的影响。方法 应用基因重组技术构建Cys 84 Ala,以脂质体转染的方法将质粒DNA转入胃癌细胞株,应用免疫组化法检测胃癌组织中生存素基因表达,流式细胞仪检测胃癌细胞凋亡及细胞周期,Western blot检测胃癌细胞中多聚ADP核糖聚合酶(PARP)和细胞色素C蛋白的表达,免疫荧光染色检测有丝分裂危象情况。结果 Cys84Ala可通过抑制野生型生存素基因的功能诱导胃癌细胞凋亡,增加caspase-3活性,促进PARP裂解和细胞色素C的释放,亦可导致胃癌细胞发生有丝分裂障碍而死亡。结论 cys84Ala能通过不同的途径诱导胃癌细胞凋亡和有丝分裂危象,并有可能成为胃癌治疗的一个候选基因。 相似文献
2.
涂水平 《国外医学:消化系疾病分册》1993,13(1):13-17
单克隆抗体单独应用和单克隆抗体导向核素,药物,毒素,脂质体等治疗消化系肿瘤在动物实验中取得满意结果,在临床试验中也获一定疗效,但仍有不少问题需要解决,本文介绍了单克隆抗体治疗消化系肿瘤的现状和影响治疗效果的几个主要因素及其解决途径。 相似文献
3.
4.
背景:肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体(TRAIL)可特异性诱导肿瘤细胞凋亡,但部分肿瘤细胞对TRAIL不敏感甚至耐药。目的:探讨X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)是否可增加TRAIL诱导的肝癌细胞株凋亡的敏感性。方法:重组人TRAIL(rhTRAIL)因子分别加入3株肝癌细胞株SMMC7721、HepG2和Bel-7404中培养,联合或不联合相同感染复数(MOI)的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1和对照空病毒Ad5/F35-Null。作用48h后,以MTT法检测细胞活力,以Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率。结果:随着TRAIL浓度的增加,3株肝癌细胞株的细胞活力均不同程度降低。TRAIL与Ad5/F35-XAF1联合作用后,其细胞活力显著低于单独TRAIL组,而Ad5/F35-Null组细胞活力与单独TRAIL组无明显差异。与空白对照组和Ad5/F35-Null组相比,TRAIL组和Ad5/F35-XAF1组3株肝癌细胞株的凋亡率均显著增加。TRAIL与Ad5/F35-XAF1联合作用后,细胞凋亡率显著高于Ad5/F35-XAF1组或TRAIL组。结论:XAF1可明显增加TRAIL诱导的肝癌细胞凋亡的敏感性,两者联合应用对诱导不同肝癌细胞凋亡具有协同作用。 相似文献
5.
本文采用Iodogen法将鼠抗人胃癌单克隆抗体RSF9(IgM)予以131I标记,研究RSF9在荷人胃癌裸鼠中的定位和显像能力。结果表明,RSF9在体内能特异性地与肿瘤组织结合,T/NT比值随时间延长逐渐升高,96hT/NT比值均大于2.5,瘤/血比值为2.69,肿瘤定位指数达5.18,SPECT得到清晰的肿瘤图像。RSF9具有良好的体内导向定位能力。IgM型单抗也可用于肿瘤显像。 相似文献
6.
目的利用携带35型腺病毒纤毛的嵌合型5型腺病毒载体系统Ad5/F35构建XAF1基因重组腺病毒,体内外感染人肝癌细胞SMMC7721并使XAF1基因有效表达。方法将真核表达质粒pcDNA3.1-XAF1和穿梭质粒pDC316用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切、筛选、测序获得重组穿梭质粒pDC316-XAF1。将测序正确的pDC316-XAF1和骨架质粒pBHG-fiber5/F35用Lipofectamine2000共转染HEK293细胞,进行细胞内同源重组,得到重组腺病毒Ad5/F35-XAF1。予终点稀释法测定重组腺病毒的感染滴度。用同样的方法得到携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的报告病毒Ad5/F35-EGFP。建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠移植瘤模型,将Ad5/F35-XAF1和Ad5/F35-EGFP重组腺病毒分别感染人肝癌细胞株SMMC7721和瘤内注射;荧光显微镜观察EGFP在细胞和移植瘤冰冻切片中的表达;RT-PCR和Westrenblot法检测XAF1的mRNA和蛋白在细胞和移植瘤组织的表达。结果重组腺病毒Ad5/F35-EGFP感染肝癌细胞和瘤内注射后,予荧光显微镜均可见细胞和冰冻切片中呈现绿色荧光;Ad5/F35-XAF1感染肝癌细胞和瘤内注射后,XAF1mRNA和蛋白表达均显著高于对照组和报告病毒组。结论成功构建重组腺病毒Ad5/F35-XAF1和Ad5/F35-EGFP。该腺病毒载体可携带目的基因在人肝癌细胞株SMMC7721体内和体外进行有效表达。 相似文献
7.
肿瘤是一种多基因疾病,其发生、发展涉及多条信号通路中多种基因的调控。细胞凋亡异常是肿瘤形成及耐药的重要机制,而诱导凋亡已成为治疗肿瘤的主要方法之一。凋亡抑制蛋白家族(inhibitor of apototic proteins,IAPs)是近年来受到普遍关注的蛋白因子,且都具有高度保守的杆状病毒凋亡抑制因子重复序列的结构域,可作用于凋亡信号通路中重要的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白(Caspases)级联反应的起始或效应阶段,调节Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9功能.从而明显抑制细胞凋亡。 相似文献
8.
硬膜外麻醉所用局麻药中常加肾上腺素,本文对注药后血钾及血糖的变化进行观察,并探讨对心电的影响。材料与方法本文选年龄19~52岁,术前心血管及实验室检查正常的37例择期手术病人,男18例,女19例。下肢手术15例,腹部手术22例。均未用术前药,入手术室后静滴复方氯化钠溶液约80ml/h。病人随机分为两组(A组21例、B组16例)。按常规硬膜外穿刺给药。A组用利多卡因(4.34±0.503mg/kg)及肾上腺素(4.34±0.53μg/kg);B组仅用利多卡因(4.40±0.507mg/kg)。 相似文献
9.
10.
胃癌单克隆抗体—羟基喜树碱免疫偶合物抗肿瘤实验研究 总被引:1,自引:1,他引:0
本文报道鼠抗人胃癌单克隆抗体RSF9与羟基喜树碱交联制备HCPT-RSF9偶合物,偶合物中每分子抗体可引入13±4.2分子的药物,而抗体活性保持85%以上。体外细胞毒结果显示偶合物对胃癌靶细胞的杀伤力(IC50为17.5μg/ml)明显优于离药物(IC50为80μg/ml),对非靶细胞的毒性很弱(IC50>100μg/ml),明显低于游离药物(IC50为76μg/ml),提示该偶合物具较强的选择性 相似文献