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目的:建立原代人卵巢颗粒细胞(hGCs)的分离培养方法,观察其生物学特性。方法:取卵日,收集hGCs,分为对照组(DMEM培养基)和实验组(DMEM培养基∶卵泡液=1∶1)进行培养。比较2组hGCs的生长状态和雌激素分泌情况。利用RT-qPCR检测Nanog、Oct4、Sox2的表达,应用流式细胞术检测CD44、CD73、CD45的表达。结果:hGCs培养24 h贴壁良好,细胞间伸出伪足。对照组和实验组分别在培养14 d和21 d后出现凋亡。实验组雌激素的分泌显著增加,第9天出现高峰,第21天显著下降。培养第7天实验组Oct4和Nanog mRNA表达显著增加。培养7 d后,CD44、CD73表达阳性, CD45表达阴性。结论:该方法简单、有效,可获得大量hGCs。培养基中添加卵泡液有益于hGCs的生长,增加培养天数。同时hGCs可分泌雌激素并具有一定的干细胞特性。 相似文献
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卵胞质内精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)是目前治疗男性不育最有效的方法,但在ICSI周期中仍然有1%~3%的受精失败发生。近年来逐渐发展起来的卵母细胞辅助激活(assisted oocyte activation,AOA)技术在改善ICSI后受精失败患者的妊娠结局方面取得了较为明显的效果,有望成为治疗男性不育的重要辅助手段。本文综述了卵母细胞激活机制领域的研究成果,揭示了精子中的PLCξ蛋白引起卵母细胞内Ca2+震荡进而触发激活的机制,介绍了目前对ICSI受精失败患者精子激活能力的检测与诊断方法,以及不同卵母细胞辅助激活技术如电激活,Ca2+载体和Sr Cl2等激活技术的研究现状,并总结了这些技术在安全性方面所获得的证据,在此基础上对AOA技术今后的发展方向和前景作了探讨。 相似文献
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目的比较他达拉非不同治疗方案对手淫取精困难患者的临床效果。方法选取本中心2012年1月~2013年5月收治的取精困难患者48例,将患者分为A、B组,每组各24例。A组患者取卵前1个月每日给予5 mg他达拉非,B组患者取卵日给予20 mg他达拉非。两组患者在取卵前1个月均配合手淫取精训练。比较两组患者取卵当日的取精成功率。结果 A组成功取精17例,取精成功率为70.83%,B组成功取精10例,取精成功率为41.67%,两组比较,差异有统计学意义(P=0.042)。结论对于取精困难患者,长期小剂量他达拉非治疗联合手淫取精训练可有效提高其取卵当日的取精成功率。 相似文献
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子宫内膜容受性异常导致胚胎着床失败是复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)和胚胎反复种植失败(recurrent implantation failure,RIF)的重要原因。子宫内膜容受性的建立是多种细胞因子、化学分子参与的一个复杂的生理过程,其机制尚不明确。胚胎着床过程中... 相似文献
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目的探讨卵巢颗粒细胞中NIMA相关蛋白激酶7(NEK7)和Nod样受体蛋白3(NLRP3) mRNA表达量与多囊卵巢综合征(PCOS)患者炎症指标的相关性及其预测价值。方法选取2018年8月至2019年3月来山西省儿童医院/山西省妇幼保健院生殖中心就诊的30例PCOS患者为研究组和同期由于男方因素或输卵管因素就诊的34例非PCOS不孕症患者为对照组。取卵日收集行IVF/ICSI-ET患者的卵泡液和颗粒细胞,检测卵泡液中炎症因子白介素(IL)-1β、IL-18的表达以及颗粒细胞中NEK7、NLRP3 mRNA的表达,并将NEK7、NLRP3的mRNA表达量与各指标进行相关性分析。最后应用受试者工作特征曲线(ROC)分析NEK7、NLRP3 mRNA对PCOS的预测价值。结果研究组体重指数(BMI)和获卵数显著高于对照组,且LH、LH/FSH、睾酮(T)水平亦显著高于对照组(P均<0.05)。研究组卵泡液中炎症因子IL-1β、IL-18的表达显著高于对照组,卵巢颗粒细胞中NEK7、NLRP3 mRNA的表达亦显著高于对照组(P均<0.05)。相关性分析结果显示,研究组患者卵巢颗... 相似文献
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目的 探讨双酚A(BPA)日常生活暴露与男性性功能的关系。方法 选取2014年9月至2015年4月在山西省妇幼保健院生殖中心门诊部因不孕不育就诊的男性作为研究对象,收集其一般人口学特征、性功能状况资料和空腹静脉血标本。应用德尔菲专家评分法计算性功能总得分,采用高效液相色谱法测定研究对象血清BPA水平。采用Spearman秩相关、秩和检验,多因素logistic回归分析进行BPA水平、影响因素、性功能指标之间的关联性及趋势分析。结果 共纳入353名研究对象,总体性功能异常率为45.0%,性欲低下(47.3%)为性功能异常的主要类型。研究对象血清BPA浓度范围为0.38~21.93 ng/ml,中位数5.79 ng/ml。血清BPA水平与总体性功能、性欲、勃起能力、射精力度均呈负相关,与早泄呈正相关。按BPA水平的四分位数分组,以低浓度组(0.38~3.79 ng/ml)为参照进行关联性分析,发现BPA水平增高可增加性功能障碍的发生风险。结论 性欲低下是男性性功能障碍的主要类型,日常暴露于较高水平的BPA可能增加男性性功能障碍。 相似文献
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目的寻找适合研究人类生殖的免疫荧光方法。方法对蛋白激酶C(PKC)在人卵母细胞、受精卵、种植前胚胎及皮质颗粒进行免疫荧光染色。结果激光共聚集显微镜可以显示PKC在人GV、MI和MⅡ期卵母细胞及受精卵中的位置,并随着细胞的不同时期分布不同。在多精受精的胚胎中,免疫荧光显微镜可以清楚地显示PKC及细胞核在卵裂球的位置。使用A23187处理卵母细胞后,激光共聚集显微镜从表面可以观察到呈新月型点状分布的皮质颗粒。结论通过改进的免疫荧光法可以获得理想的实验结果。 相似文献
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目的观察辅助激活技术对辅助生殖技术中受精低下或失败患者成熟卵母细胞的激活效果及其胚胎发育情况。方法回顾性分析2014年10月至2016年10月在山西省儿童医院妇幼保健院生殖医学中心助孕治疗、至少有1次ICSI受精失败或受精低下(受精率30%),再次行ICSI助孕时采用成熟卵母细胞激活处理的12名患者资料。12名患者共收集105枚成熟卵母细胞,全部采用钙离子载体A23187联合6-甲基氨基嘌呤(6-DMAP)进行激活处理,观察卵母细胞激活后的原核形成及胚胎发育情况。结果激活周期的受精率及卵裂率分别为63.81%(67/105)和88.06%(59/67),较既往周期的受精率[23.96%(23/96)]和卵裂率[69.57%(16/23)]均显著升高(P0.05);激活周期中可移植胚胎及优质胚胎数量较既往周期均显著提高,分别为(3.02±2.51)vs.(1.41±0.58)枚和(1.70±1.36)vs.(0.31±0.52)枚(P0.05);既往ICSI受精低下或失败的12例患者中,卵母细胞激活处理后5例患者获得临床妊娠。结论辅助激活技术可以改善ICSI受精失败或受精低下患者的受精率及胚胎发育质量。 相似文献
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