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目的:获得一种新型靶向人Frizzled7(Fzd7)蛋白的人源化抗体。方法:首先用重组人Fzd7蛋白(rh Fzd7)免疫BALB/c小鼠,获得鼠源抗Fzd7抗体(SHH002),并用生物膜层干涉技术(biolayer interferometry,BLI)检测SHH002的亲和力;测序获得SHH002可变区序列(V区),通过与Human Germline序列库比对选择人源化设计模板,利用Discoverystudio软件对SHH002进行人源化设计,获得人源化抗Fzd7抗体SHH002-hu,并对SHH002-hu的纯度和亲和力进行验证,最后通过MTT实验初步验证其抗肿瘤活性。结果:杂交瘤筛选技术获得高亲和力(亲和力常数KD <1. 0×10-12mol·L-1)鼠源抗Fzd7抗体SHH002; SHH002 V区序列比对Human Germline序列库,选择同源性最高的IGHV1/IGKV1作为人源化设计模板,保留对抗体结构稳定性起关键作用的鼠源氨基酸,将非关键的位点突变为人源氨基酸,获得人源化程度高达98%的人源化抗体SHH002-hu;分子排阻色谱(SEC-HPLC)... 相似文献
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目的探讨超声引导右美托咪定复合罗哌卡因竖脊肌平面阻滞对胸腔镜手术患者疼痛的控制效果。方法选取我院2017年6月至2018年9月择期胸腔镜手术的90例患者为研究对象,按照数字表法随机分为右美托咪定组(D组)、罗哌卡因组(R组)和对照组(C组),每组30例。三组均在术前行超声引导T5横突竖脊肌平面(Erector spinae plane,ESP)阻滞,D组给予1μg/kg右美托咪定复合0.4%罗哌卡因共25 ml,R组给予0.4%罗哌卡因25 ml,C组给予等量生理盐水,三组术后均连接静脉镇痛泵。记录三组患者术中血液动力学指标变化,术后静息时、咳嗽时VAS评分,记录三组患者镇痛药用量、镇痛泵有效按压次数与实际按压次数比(D_1/D_2)及不良反应。结果与C组相比,D组和R组胸腔镜置入前后血流动力学变化更为平稳;三组术后2、6、12、24、36、48 h静息VAS评分和咳嗽VAS评分变化差异有统计学意义(P<0.05),D组变化更平稳,镇痛效果较好;与R组和C组比较,D组患者术后48 h舒芬太尼用量显著减少(P<0.05),D_1/D_2显著增高(P<0.05)。D组术后恶心发生率低于R组、C组,术后呕吐发生率显著低于C组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论胸腔镜手术术前超声引导右美托咪定复合罗哌卡因ESP阻滞,术中血流动力学更平稳,术后患者疼痛控制的效果更好,并发症更少,值得临床推广。 相似文献
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目的 探究下调LINC01296的表达对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)进展的影响,以及LINC01296调控miR-1255b-5p在NSCLC发生发展中的分子机制。方法 培养6种NSCLC细胞系;实时荧光定量聚合酶链反应法检测LINC01296在NSCLC细胞系以及在48例患者样本中表达水平的高低;细胞计数试剂盒-8法检测稳转细胞株的细胞增殖情况;克隆形成实验检测细胞的生长以及增殖状况;划痕实验检测细胞的迁移情况;FITC-Annexin-V法检测细胞凋亡;动物实验,包括裸鼠尾静脉和皮下瘤注射,观察癌细胞的转移以及成瘤情况;双荧光素酶报告基因实验验证LINC01296与miR-1255b-5p之间存在靶向结合关系。 结果 LINC01296在NSCLC中高表达;LINC01296基因敲低抑制NSCLC细胞生长、迁移;LINC01296敲低抑制体内瘤体的生长和转移;LINC01296与miR-1255b-5p的之间存在海绵吸附作用;LINC01296与miR-1255b-5p的表达呈负相关。结论 LINC01296作为NSCLC的促癌分子,通过抑制miR-1255b-5p的表达水平,促进了NSCLC的发展。 相似文献