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目的观察外源性雌激素受体β1(ERβ1)基因转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞后对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达和细胞增殖能力的影响。方法应用脂质体法将ERβ1真核表达质粒转染至乳腺癌MDA-MB-231细胞中(pcDNA3.1-ERβ1转染组),另分别设空载体组和未转染组作为对照,分别用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测各组细胞中ERβ1h、TERT mRNA和蛋白表达的变化;流式细胞仪观察细胞凋亡率的变化;细胞生长曲线观察转染后细胞增殖能力的改变。结果 pcDNA3.1-ERβ1转染组MDA-MB-231细胞中ERβ1 mRNA表达量为0.449±0.077,明显高于未转染组的0.153±0.035(P=0.001)或空载体组的0.160±0.020(P=0.000);相应的ERβ1蛋白表达量为0.847±0.065,亦明显高于未转染组的0.356±0.050(P=0.001)或空载体组的0.390±0.030(P=0.000)。pcDNA3.1-ERβ1转染组MDA-MB-231细胞中hTERT mRNA表达量为0.127±0.020,明显低于未转染组的0.283±0.025(P=0.001)或空载体组的0.283±0.049(P=0.002);相应的hTERT蛋白表达量为0.147±0.023,也明显低于未转染组的0.783±0.025(P=0.001)或空载体组的0.802±0.019(P=0.002)。细胞生长曲线提示,从第3天开始pcDNA3.1-ERβ1转染组细胞的增殖能力较未转染组明显减弱(P<0.05);流式细胞仪结果显示,pcDNA3.1-ERβ1转染组的细胞凋亡率为(6.15±0.94)%,明显高于未转染组的(1.41±0.42)%(P=0.001)。结论 ERβ1可能通过下调hTERT基因表达抑制乳腺癌细胞的增殖。 相似文献
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