肿瘤U1 snRNA蛋白互作图谱及特征分析

目的 利用CHIRP-MS技术系统地鉴定肿瘤细胞中U1 snRNA的互作蛋白，并建立U1snRNA高通量互作蛋白图谱，研究U1 snRNA在肿瘤细胞中新的生物学功能和分子调控机制。方法 通过带生物素标记的U1 snRNA探针捕获与U1 snRNA结合的互作蛋白，并分别取部分样品纯化蛋白和RNA，通过qPCR与跑胶银染确认探针富集效果，然后利用高效液相色谱-质谱联用技术鉴定获取的蛋白，最后利用生物信息学的方法进行GO、KEGG、蛋白复合体富集分析和PPI分析。结果 我们共鉴定到了135个高可靠的U1 snRNA结合蛋白，其中包括60个已知的和75个新的U1 snRNA结合蛋白。通路富集等生物信息学分析显示U1 snRNA协同调控RNA剪接、胞内运输、定位、端粒和表观遗传等多个生物学过程。蛋白互作网络分析揭示ESWR1等肿瘤相关蛋白可能介导了U1 snRNA的肿瘤调控功能。结论 本研究在国际上首次建立了U1 snRNA互作蛋白图谱，揭示了U1 snRNA在肿瘤细胞中的多种生物学功能，为进一步研究U1 snRNA参与肿瘤发生发展以及肿瘤预防和治疗提供了理论基础。     

15例新型冠状病毒肺炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的 分析新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者外周血白细胞分类及T淋巴细胞亚群的变化特征.方法 以收治的11例COVID-19确诊病例轻型/普通型患者(轻型/普通型COVID-19组)、4例重型/危重型患者(重型/危重型COVID-19组)、27例疑似病例(疑似组),22名健康体检者(对照组)为观察对象,回顾性分析...     

间歇性缺氧通过内质网途径诱导滋养层细胞凋亡

目的 分析间歇性缺氧对人绒毛膜滋养层细胞(HTR8/SVneo)内质网应激及凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法 选用人绒毛膜滋养层细胞(HTR8/SVneo),间歇性缺氧-24 h组和间歇性缺氧-48 h组分别进行24 h和48 h的间歇性缺氧处理,空白对照组始终置于常氧中培养。观察间歇性缺氧对细胞凋亡与增殖,以及内质网应激相关分子、细胞凋亡相关蛋白、细胞周期相关蛋白和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。结果 与空白对照组比较,间歇性缺氧组CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、激活转录因子6(ATF6)、X-盒结合蛋白1(XBP-1)mRNA和蛋白表达水平显著增加,早期凋亡率显著增加,Caspase-3蛋白、多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)mRNA和蛋白表达水平显著增加,HIF-1αmRNA和蛋白表达水平显著增加,并随缺氧时间延长而增加(P<0.05);与空白对照组比较,间歇性缺氧可显著抑制HTR8/SVneo细胞增殖,并随缺氧时间延长而细胞活力降低(P<0.05);与空白对照组比较,间歇性缺氧组细胞周期蛋白D1(C...     

血常规指标及比值变化在新型冠状病毒肺炎和流感患者鉴别诊断中的价值研究

目的　探究血常规指标及其比值变化在新型冠状病毒肺炎（COVID-19）和流感患者的诊断及鉴别诊断中的临床应用价值。方法　选取2020年1月至2022年1月,在四川绵阳地区确诊的25例COVID-19患者、207例甲型流感病毒感染者（甲流）和240例乙型流感病毒感染者（乙流）血常规数据,其中男237例、女235例,年龄14～77岁,回顾性分析3组的中性粒细胞计数（NC）、淋巴细胞计数（LC）、白细胞计数（WBC）和单核细胞计数（MC）,并计算淋巴细胞/单核细胞比值（LMR）、血小板/淋巴细胞比值（PLR）和中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）,探讨上述参数对COVID-19和流感的诊断价值。采用方差分析、LSD检验、Tamhane检验。结果　COVID-19组NC、MC、WBC和NLR指标分别为（3.52±1.33）×10⁹/L、（0.46±0.16）×10⁹/L、（5.50±1.46）×10⁹/L、（3.05±2.04）,均明显低于甲流组的（5.52±2.32）×10⁹/L、（0.62±0.25）×10⁹/L、（7.47±2.55）×10⁹/L、（5.51±3.82）,LMR指标为（3.37±1.72）,略高于甲流组的（2.24±1.34）,差异均有统计学意义（均P<0.05）;COVID-19组MC和NLR明显低于乙流组,LMR略高于乙流组（均P<0.05）;甲流组NC、PLT、WBC和NLR明显高于乙流组,差异均有统计学意义（均P<0.05）。绘制受试者工作特征曲线（ROC）分析显示,NLR对甲型、乙型流感的诊断特异度和灵敏度均最高,其诊断甲型流感的特异度为88.2%、灵敏度为81.2%,诊断乙型流感的特异度为91.2%、灵敏度为65.0%。结论　血常规指标及比值变化能较好辅助诊断、鉴别诊断COVID-19和流感患者,其中NLR对流感诊断特异度和灵敏度最高,LC、NLR、LMR和PLR对COVID-19的诊断有重要临床意义,MC、NLR、LMR是鉴别诊断COVID-19和流感的重要指标。     

石家庄地区PM2.5诱导A549细胞凋亡的分子机制研究

目的 探讨石家庄地区PM2.5染尘A549细胞对细胞凋亡的影响及其分子机制.方法 PM2.5作用于体外培养的A549细胞后,检测细胞存活率、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)水平,细胞凋亡及凋亡相关基因的表达水平.结果 PM2.5暴露可显著降低A549细胞存活率和MMP水平,且两者间存在相关性(R2 =0.749,P=0.037).同时,PM2.5作用24 h可诱导A549细胞发生凋亡,并观察到凋亡相关基因p53、EZH2和Sox2ot的表达上调.结论 短期暴露于PM2.5后,lncRNA Sox2ot可能通过激活转录因子EZH2,与抑癌基因p53共同参与调控细胞线粒体功能,进而诱导细胞凋亡进程.     

高通量互作蛋白组图谱研究揭示U6 snRNA在肿瘤细胞中多维度调控mRNA加工成熟过程

目的 采用ChIRP技术纯化肿瘤细胞中内源U6 snRNA（简称U6）互作蛋白,结合高灵敏度液相色谱-质谱联用技术对所获得的互作蛋白组进行鉴定,系统揭示U6参与肿瘤细胞中新的生物学功能和分子调控机制。方法 合成含生物素标记的U6特异性探针,利用分子杂交技术特异捕获经甲醛交联的内源U6与互作蛋白形成的复合物,并结合高灵敏度质谱分析技术鉴定出U6互作蛋白组。利用生物信息分析手段分析U6在肿瘤细胞中的功能。结果 通过严格的筛选本研究最终鉴定到135个特异的内源U6互作蛋白。GO、KEGG、蛋白复合体富集分析和PPI分析显示U6除了与mRNA前体剪接加工等相关蛋白发生相互作用外,还参与了mRNA从产生到转录后调控等一系列生物学过程,包括参与mRNA转录调控、囊泡运输、成熟mRNA的出核转运、mRNA降解、RNA定位、转录后调控等过程。结论 我们的研究在国际上首次系统揭示了肿瘤细胞U6的相互作用蛋白组图谱,通过对该图谱的分析表明U6多维度地参与了mRNA生物学发生的全过程调控,为U6参与肿瘤发生发展的功能和机制研究提供了全新的方向和思路。