重组鸡Igλ轻链真核细胞分泌表达及其单克隆抗体的制备与鉴定

目的: 构建重组载体pcDNA-λ并在COS7细胞分泌表达鸡Igλ轻链, 制备抗鸡Igλ轻链的单克隆抗体(mAb).方法: PCR扩增带有信号肽的鸡Igλ轻链基因, 限制性酶切消化后, 定向克隆于真核表达载体pcDNA3, 构建具有6×His标签、分泌表达的重组载体pcDNA-λ.重组载体转染COS7细胞后, SDS-PAGE分析真核表达载体pcDNA-λ在COS7细胞的分泌表达.用2×106个雏鸡B淋巴细胞免疫BALB/c小鼠, 取脾细胞与骨髓瘤细胞融合, 分别采用细胞免疫荧光和间接ELISA筛选阳性杂交瘤克隆.结果: 成功构建分泌表达鸡Igλ轻链的重组载体, SDS-PAGE分析表明在COS7细胞上清有目的蛋白的分泌表达.杂交瘤细胞经筛选与鉴定, 获得2株分泌抗鸡Igλ轻链mAb的杂交瘤细胞株, Western blot检测到该mAb对重组鸡Igλ轻链的反应性.结论: 构建了重组表达载体pcDNA-λ并在COS7细胞上清分泌表达了重组鸡Igλ轻链.并用淋巴细胞杂交瘤技术成功筛选出抗鸡Igλ轻链mAb.为深入研究鸡Igλ轻链的结构与功能奠定了基础.     

降糖药物在肝硬化合并糖尿病患者中应用的临床证据

<正>卵巢癌（ovarian cancer,OC）是女性第七位常见的恶性肿瘤,同时在癌症死亡原因中排名第八。最新统计显示,2020年美国OC的死亡病例数约14000,其死亡率居妇科恶性肿瘤之首,严重威胁女性生命健康。OC起病隐匿,发现时多属晚期以及预后较差是其公认的特点。目前针对OC的治疗方式以手术切除病灶和铂类药物化疗为主,尽管手术方法与化疗方案不断改进,仍有部分患者会产生耐药、复发进而死亡,导致OC的5年生存率低于45%[1]。     

癌症基因组学相关数据管理与应用探析

目的：梳理美国癌症基因组图谱计划（The Cancer Genome Atlas,TCGA）相关数据的收集、整理、组织、共享及应用情况,为建立及完善国家级大型的开放癌症基因组学相关数据资源提供参考。方法：系统调研TCGA计划的数据管理相关机构工作流程、数据共享利用等方面的解决方案和最佳实践。 结果：TCGA计划通过多中心合作,建立了组织样本采集、处理、质量控制、序列测定、特征分析、数据共享与研究应用等全链条的癌症基因组图谱数据管理流程,从所属癌症、数据类型、处理水平等角度对数据进行精细分类,并针对汇总数据和个体数据分别采取开放存取和受控访问两种共享机制,研究者们利用其共享数据开展了相关癌症特征基因的突变、扩增和缺失、以及受影响的信号通路等多方面研究。 结论：癌症基因组图谱计划的实践探索可为大规模癌症基因组学相关研究计划的实施提供数据管理方面的经验借鉴与参考。     

儿科住院医师科研能力培养的研究

住院医师规范化培训作为医学生毕业后教育的重要组成部分,在医学人才培养中起着承上启下的重要作用。它的培养水平与医院的整体医疗、教学和科研水平密切相关［1‐2］。住院医师规范化培训的目的是培养牢固掌握基本理论知识、临床实践技能,并具备教学、科研能力及独立工作能力的高素质综合型医学人才［3‐4］。     

自拟乳验方治疗肝郁痰凝型乳腺增生症临床研究

目的:研究自拟乳验方联合他莫昔芬治疗肝郁痰凝型乳腺增生症(HMG)临床疗效。方法:将78例肝郁痰凝型HMG患者随机分为治疗组和对照组,每组各39例,对照组给予他莫昔芬治疗,治疗组在对照组基础上加用自拟乳验方治疗。1个月经周期为1疗程,治疗2疗程后观察中医证候积分(乳房疼痛、乳房肿块大小、乳房肿块质地)、雌二醇(E_2)、孕酮(P)、泌乳素(PRL)水平的变化及不良反应发生情况。结果:2组临床疗效对比,差异有显著性(P0.05);治疗后2组乳房疼痛积分、乳房肿块大小积分及乳房肿块质地积分均降低,但治疗组改善优于对照组(P0.05);治疗后2组患者血清E_2、PRL水平均降低,P水平均升高,但治疗组改善E_2、P、PRL分泌的疗效优于对照组(P0.05);治疗组较对照组的不良反应发生率低。结论:自拟乳验方联合他莫昔芬治疗具有明显改善乳房疼痛及乳房肿块的作用,并能有效调节患者血清性激素水平,不仅疗效确切,还可降低西药他莫昔芬的不良反应发生。     

一株红树内生真菌BY5的鉴定及生物活性研究△

目的对分离自红树植物海马齿(Sesuvium portulacastrum)的1株内生真菌BY5进行鉴定,并对其发酵产物的生物活性进行研究。方法采用形态学、28SrDNA序列对红树内生真菌BY5进行鉴定;采用滤纸片琼脂扩散法、自由基清除法(DPPH、·OH和ABTS+)和MTT法对其发酵液上清乙酸乙酯抽提物的抗菌、抗氧化和抗肿瘤活性进行研究。结果菌株BY5的菌落形态和显微形态与曲霉属的基本相同,其28SrDNA序列与塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)的相似度达100%,确定该菌株为塔宾曲霉;其发酵液上清乙酸乙酯抽提物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌有较强抑制作用;对DPPH自由基、·OH自由基和ABTS+自由基具有较强清除作用(0mg/mL相似文献   

米诺环素对缺血性脑卒中血脑屏障重塑的影响及其机制

目的探索米诺环素（minocycline,MC）对大鼠局限性脑缺血再灌注后血脑屏障（blood-brain barrier,BBB）重塑及神经保护的作用机制及影像可视化。方法48只SD大鼠随机分为4组：早期给药组、晚期给药组、生理盐水组及假手术组,每组12只。其中早期给药组于手术后即刻尾静脉注入MC（3 mg/kg）;晚期给药组于拔线后恢复再灌注6 h后大鼠尾静脉注入MC（3 mg/kg）;生理盐水组于再灌注即刻注入相同体积的生理盐水;假手术组除了不插入线栓外,其余处理同生理盐水组。再灌注24 h后进行神经功能评分,并采用HE、免疫组化、Western blot、免疫荧光及磁共振成像等方法观察MC对脑缺血再灌注后BBB重塑的影响及影像学改变。结果缺血再灌注24 h后各组神经功能缺损评分差异有统计学意义（P<0.001）,其中生理盐水组神经功能缺损评分高于给药组;早期给药组神经功能缺损评分低于晚期给药组。磁共振图像显示各组最终梗死体积差异有统计学意义（P<0.001）。早期给药组及晚期给药组梗死体积显著小于生理盐水组,早期给药组小于晚期给药组,假手术组未显示梗死灶。给药组脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、CD11b的表达低于生理盐水组,且早期给药组低于晚期给药组;给药组脑组织中转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10、YM1、RECA-1、PDGFR-β的表达高于生理盐水组,且早期给药组高于晚期给药组。给药组血清中IL-1β、IL-6和TNF-α含量低于生理盐水组,且早期给药组低于晚期给药组。Western blot结果显示给药组IL-1β、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、TNF-α的表达低于生理盐水组,且早期给药组低于晚期给药组;给药组claudin-5、occludin、ZO-1、IL-10、TGF-β和YM1的表达高于生理盐水组,且早期给药组高于晚期给药组。结论MC可有效减轻缺血再灌注损伤促发BBB重塑,立即给药对神经功能障碍的改善作用更明显。     

执行《中国药典》2010年版中药材与饮片标准所遇到的问题及建议

《中国药典》作为国家监督管理药品质量的法定技术标准,是药品生产、经营、管理和检验的法定依据。《中国药典》2010年版已实施三年多了,对保证药品质量,规范药品标准起到了重要作用。笔者在日常检验中,发现中药材和饮片有些质量标准的制定不尽合理,有些标准的制定尚未考虑人力、物力及操作可行性。就以下问题谈几点商榷意见和建议,供再版时参考。     

国医大师卢芳治疗自身免疫性疾病经验

介绍国医大师卢芳诊治自身免疫性疾病的治则、观点、临床经验,及中医药在自身免疫性疾病治疗中的研究.卢老治疗此类疾病,遵循辨病与辨证"双辨相结合"的总原则,认为这一类疾病的癥结为"热、毒、血瘀",并自拟验方抑免汤治疗.本文将从辨病到辨证,审症到诊断,立法到组方,方义到个药,宏观到微观,介绍并阐释中医药治疗自身免疫性疾病作用...     

经颅直流电刺激联合镜像神经元康复训练系统治疗颅脑损伤后青年抑郁患者的疗效

目的观察经颅直流电刺激联合镜像神经元康复训练系统治疗颅脑损伤后青年抑郁患者的疗效。方法选取2019-02—2020-03于甘肃省康复中心医院神经康复科住院的颅脑损伤后青年抑郁患者51例,按照随机数表分为2组,观察组26例在常规康复训练的基础上接受经颅直流电刺激(tDCS)联合镜像神经元康复训练系统(MNST-V1.0)治疗,对照组25例在常规康复训练的基础上接受经颅直流电刺激(tDCS)治疗。分别于治疗前和治疗4周后采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、抑郁自评量表(SDS)、贝克抑郁量表(BDI)、改良Barthel指数(MBI)对2组疗效进行评估。结果观察组和对照组治疗4周后HAMD、SDS、BDI及MBI评分均较治疗前明显改善,差异有统计学意义(P0.05)。2组治疗前HAMD、SDS、BDI及MBI评分比较,差异无统计学意义(P0.05),但治疗4周后观察组HAMD(11.4±5.3)分、SDS(42.1±6.5)分、BDI(10.7±3.9)分及MBI(75.15±12.91)分均较对照组明显改善,差异有统计学意义(P0.05)。结论经颅直流电刺激联合镜像神经元康复训练系统对颅脑损伤后青年抑郁患者的疗效显著。