双氢青蒿素对SLE小鼠巨噬细胞mRNAm6A甲基化的影响研究

目的探讨双氢青蒿素对系统性红斑狼疮（SLE）小鼠巨噬细胞mRNAN6-腺嘌呤（m6A）甲基化修饰水平的影响。方法从SLE小鼠腹腔中获取腹腔巨噬细胞,在体外用双氢青蒿素刺激巨噬细胞。采用DotBlot法检测巨噬细胞mRNAm6A甲基化修饰水平,分别采用RT-PCR、Westernblot法检测巨噬细胞m6A甲基化转移酶（METTL3）、m6A去甲基化修饰酶（ALKBH5和FTO）的mRNA和蛋白表达水平,m6A-qRT-PCR法检测TLR7和TLR9mRNAm6A甲基化修饰水平。结果与空白对照比较,60滋mol/L双氢青蒿素刺激来源SLE小鼠的巨噬细胞后,巨噬细胞mRNA的m6A甲基化修饰水平显著降低（P＜0.05）;巨噬细胞的METTL3mRNA和蛋白水平均明显上调（均P＜0.05）,而ALKBH5的mRNA和蛋白水平均明显下调（均P＜0.05）,且呈现双氢青蒿素浓度依赖;同时双氢青蒿素刺激后TLR7和TLR9mRNAm6A修饰水平降低（均P＜0.05）,进而抑制TLR7和TLR9的蛋白表达（均P＜0.05）。结论双氢青蒿素可能通过调控巨噬细胞mRNAm6A甲基化修饰水平抑制TLR7、TLR9蛋白表达的机制发挥治疗SLE的作用。     

桑桂通痹剂对胶原诱导关节炎小鼠病理形态学及血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶3的影响

目的观察桑桂通痹剂对胶原诱导关节炎（CIA）模型小鼠踝关节血管翳数目、关节炎指数及血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶3（MMP-3）的影响,探讨其作用靶点。方法将50只DBA／1J小鼠随机分为正常纽、模型组、桑桂通痹剂组、甲氨蝶呤组、雷公藤多甙片组,除正常组之外,其余各组使用II型胶原诱导小鼠造成CIA模型,桑桂通痹剂组、甲氨蝶呤组、雷公藤多甙片于造模后开始给药,共计28d。按评分法评价关节炎指数,病理观察小鼠踝关节血管翳数目,免疫组化法检测VEGF、MMP-3蛋白表达。结果桑桂通痹剂组可降低模型小鼠的关节炎指数;减少由滑膜细胞和毛细血管增生所形成的血管翳数目,VEGF、MMP-3表达也有所降低。结论桑桂通痹荆可能是通过抑制VEGF、MMP-3表达,减少模型小鼠的关节炎指数和血管翳数目,从而起到治疗作用。     

葛根素注射液对糖尿病KKAy小鼠肾小管上皮细胞的影响

 目的：观察葛根素治疗糖尿病小鼠肾间质纤维化（renal interstitial fibrosis,RIF）过程中肾小管上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白表达的变化,为临床药物治疗糖尿病RIF提供实验依据。方法：将16只2型糖尿病模型KKAy小鼠随机分为模型组（n=8）和葛根素注射液治疗组（n=8）。8只C57BL/6J小鼠作为正常组。用药组小鼠14周龄开始以腹腔注射的方式给药,观测小鼠日常状态及血糖变化,于24周龄处死小鼠,取肾脏分别观察肾组织病理形态学变化,免疫组织化学法检测小鼠肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin, α-SMA)、转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGF-β1）和转化生长因子β I型受体（TGF-β-RI）蛋白的表达。结果：形态学观察可见模型组发生明显的纤维化改变,而经葛根素注射液治疗后,小鼠肾间质基质轻度增多,病变较轻微。治疗组KKAy小鼠肾组织中较模型组小鼠肾组织中α-SMA、TGF-β1和TGF-β-RI蛋白的表达减少。结论：葛根素注射液可在一定程度上减少α-SMA的表达,抑制KKAy小鼠肾脏组织中TGF-β1和TGF-β-RI蛋白表达,阻断并逆转EMT的过程,延缓肾间质纤维化的发生和发展。     

“虚实结合”模式在病理实验教学中的应用与评价

在高等医学教育体系中,病理学实验侧重病变器官、组织的形态学观察。随着虚拟技术的发展,依靠虚拟技术建立的数字化教学平台在高校实验教学中的应用越来越广泛,并逐渐引入病理实验教学中。本研究阐述了病理实验教学模式的发展变化,通过调查问卷的形式,就学生对数字化教学平台的满意度、对教学模式的支持度进行了调查研究,旨在进一步促进病理实验教学模式的融合,激发学生兴趣,提高教学质量,加快教学改革。     

青年教师在中医院校病理学教学中的几点体会

随着我国中医高等教育改革的深入发展和招生规模的不断扩大,病理学课时相对减少,而教师工作负荷明显加大.如何让学生正确认识病理学在中西医结合中的作用,在有限的时间内更好地掌握学科知识,如何提高教学质量,笔者作为青年教师,就这些问题谈谈在教学中的一些体会.     

中医院校免疫学实验教学中存在的问题与改革

免疫学实验教学是医学免疫学教学中重要的组成部分,然而免疫学实验教学内容往往落后于理论教学与实际科研应用.目前免疫学实验教学中存在传统教学模式阻碍实验教学的发展、学科课时设置少、实验内容陈旧、实验经费不足、教学内容单一等问题.提出改变传统的教学模式、增加免疫学实验课课时、改善实验条件、引入高质量的影视教材,运用多媒体技术、加大学生独立完成的力度、重视课后总结分析等改革设想.     

黄芪甲苷联合葛根素对高糖诱导的H9c2细胞内质网应激及相关凋亡因子的影响

目的：探讨黄芪甲苷联合葛根素对高糖诱导的H9c2细胞内质网应激及其凋亡相关因子的影响。方法：将对数生长期的H9c2细胞随机分为对照组、甘露醇对照组、高糖组、高糖+4-苯基丁酸（4-phenylbutyric acid,4-PBA）组、毒胡萝卜素（thapsigargin,TG）组、高糖+黄芪甲苷+葛根素组;CCK-8法检测H9c2细胞活力;Western blot检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）表达。RT-qPCR及Western blot检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、肌醇酶1α(inositol-requiring enzyme 1α,IRE1α)、调控X盒结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)、转录因子C/EBP同源蛋白（C/EBP homologous protein,CHOP）、p53上调凋亡调节因子（p53 up-regulate modulato...     

加味生脉饮注射液对内毒素休克大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-１β和核转录因子-κB 含量的影响

目的:观察加味生脉饮注射液对内毒素休克肺组织TNF-α、IL-1β和NF-κB表达的影响。方法:静脉注射脂多糖(LPS,8.00mg·kg^-1)造成内毒素休克模型,用加味生脉饮注射液作干预治疗,酶联免疫吸附法检测上述因子在假手术组、模型组、加味生脉饮组、阳性对照组等各组大鼠肺组织内的表达。结果:模型组肺损伤较重,TNF-α、IL-1β和NF-κB含量明显升高（P<0.05）;加味生脉饮组和阳性对照组肺损伤较轻,TNF-α、IL-1β和NF-κB含量明显降低（P<0.05）。结论:加味生脉饮注射液能减轻内毒素休克时肺损伤和TNF-α、IL-1β和NF-κB表达,提示该药对内毒素休克肺损伤的保护作用可能是通过调控NF-κB通路过度激活而实现。     

中医院校免疫学实验教学中存在的问题与改革

免疫学实验教学是医学免疫学教学中重要的组成部分,然而免疫学实验教学内容往往落后于理论教学与实际科研应用。目前免疫学实验教学中存在传统教学模式阻碍实验教学的发展、学科课时设置少、实验内容陈旧、实验经费不足、教学内容单一等问题。提出改变传统的教学模式、增加免疫学实验课课时、改善实验条件、引入高质量的影视教材,运用多媒体技术、加大学生独立完成的力度、重视课后总结分析等改革设想。     

黄芪注射液联合葛根素注射液对糖尿病肾病KKA~y小鼠78kD-葡萄糖调节蛋白的影响

目的观察黄芪注射液联合葛根素注射液对糖尿病肾病KKAy小鼠78k D-葡萄糖调节蛋白(GRP78)表达的影响,为中医药治疗糖尿病肾病提供实验依据。方法雄性KKAy小鼠饲养至12周龄时随机分为模型组和黄芪注射液联合葛根素注射液治疗组;同龄雄性C57BL/6J小鼠作为正常对照组。观察小鼠日常状态,并于16周龄处死小鼠,取血清检测空腹血糖、尿素、肌酐、甘油三酯、总胆固醇,并取肾脏观察肾组织病理形态学变化,免疫组织化学法检测小鼠肾组织中GRP78的表达。结果模型组小鼠空腹血糖、尿素、肌酐、甘油三酯、总胆固醇较对照组明显升高(P0.01);治疗组小鼠空腹血糖、尿素、肌酐较模型组降低(P0.05或P0.01)。形态学观察可见模型组小鼠肾小管上皮细胞胞浆出现空泡;经治疗后,肾小球、肾小管结构完整,病变不明显。免疫组化显示治疗组GRP78表达较模型组明显减少(P0.01)。结论黄芪注射液联合葛根素注射液可在一定程度上抑制KKAy小鼠肾组织中GRP78表达,减轻内质网应激,保护2型糖尿病KKAy小鼠的肾功能。