The changes of sphingolipid profiles post ischemia–reperfusion injury in the rat liver

Hepatic ischemia-reperfusion (I/R) injury occurs in many clinical procedures, including liver transplantation, hepatic trauma, and liver resection. The molecular mechanisms responsible for hepatic I/R damage however remain unknown. There is increasing evidence that sphingholipids, in particular ceramide, play a role in stress and death receptor-induced hepatocellular death, contributing to the progression of several liver diseases including liver I/R injury. In order to further define the role of sphingolipids in hepatic I/R, systemic analysis of sphingolipids after reperfusion is necessary. In the present study, we investigated the lipidomic changes of sphingolipids in a rat model of warm hepatic I/R injury, by delayed extraction matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (DE MALDI-TOF-MS). The total amounts of ceramide and sphingomyelin and the intensity of most kinds of spingolipids, mainly sphingomyelin, significantly increased 1 hr post-reperfusion (p<0.05) and reached peaks at 6 hrs post-reperfusion (p<0.01) compared to controls. Six new forms of ceramide and sphingomyelins appeared 6 hrs post-reperfusion, (m/z) 537.8, 555.7, 567.7, 583.8, 683.5, 731.4. Interestingly, a ceramide- monohexoside (m/z) 804.4 (CMH[d18:1C22:1+Na]+) also increased post-reperfusion and correlated with extent of liver injury after reperfursion. Three main forms of sphingolipids, ceramide, sphingomyelin and ceramide- monohexoside, are related to hepatic I/R injury and provide a new perspective in understanding the mechanism(s) responsible for hepatic I/R injury.     

超声造影肝脏影像报告与数据系统在甲胎蛋白阴性肝细胞癌高危患者中的应用

目的 研究超声造影肝脏影像报告与数据系统2017版（CEUS LI-RADS v2017）在甲胎蛋白（AFP）阴性的肝细胞癌（HCC）高危患者肝局灶性病变中的应用价值。方法 回顾性分析2018年1月至2021年10月在我院行CEUS检查的AFP阴性HCC高危患者108例（134个结节）,采用CEUS LI-RADS v2017对结节进行分类,以组织病理学结果或增强影像学检查和随访结果为金标准,计算CEUS LI-RADS对AFP阴性患者HCC和肝内其他恶性肿瘤（OM）的诊断敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、准确率、受试者工作特征曲线下面积（AUC）。结果 AFP阴性HCC较OM小（P＜0.001）。CEUS LR-5类、LR-4类、LR-3类对AFP阴性HCC的阳性预测值分别为88.37%、47.06%、12.9%。LR-5类诊断AFP阴性HCC的敏感性、特异性、准确率和AUC分别为73.07%、 93.90%、85.82%和0.87。LR-M类诊断OM的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、准确率和AUC分别为90.91%、97.32%、86.96%、98.20%、96.27%和0.94。结论AFP阴性HCC较OM小,CEUS LI-RADS v2017对AFP阴性HCC诊断特异性较高而敏感性较低,对OM有较好的诊断价值。     

miR-181a靶向作用CARF基因抑制胰腺癌细胞凋亡

目的：探讨miR-181a与CARF基因是否存在靶向关系,并研究其在调节胰腺癌细胞增殖凋亡过程中的作用。方法：利用Real-time PCR检测胰腺癌组织细胞中miR-181a的表达水平,通过miR-181a拮抗剂下调胰腺癌细胞中miR-181a浓度,并用MTT检测其细胞增殖能力变化。建立包含CARF基因3’-UTR序列的PGL-3载体,结合双荧光素酶报告基因系统验证CARF基因是否存在miR-181a的作用靶点,然后通过激动剂及拮抗剂调节胰腺癌细胞中miR-181a浓度,用Western blot检测相应细胞CARF基因蛋白表达情况。结果：miR-181a在胰腺癌组织/细胞中的表达水平明显高于正常胰腺组织/细胞（P＜0.05）。转染miR-181a拮抗剂可显著下调胰腺癌细胞中miR-181a的表达,并使其增殖能力明显下降（P＜0.05）。双荧光素酶报告基因系统提示miR-181a与包含CARF基因3’-UTR序列的载体共转染,可明显下调荧光素酶活性,且下调水平与miR-181a剂量呈负相关（P＜0.05）;CARF蛋白表达情况和胰腺癌细胞中miR-181a水平呈显著负相关（P＜0.05）。结论：miR-181a在胰腺癌细胞中存在高表达,通过下调CARF靶基因促进细胞增殖而推动胰腺癌的发展。     

弓形虫RH株微线体蛋白MIC3基因的克隆与表达

目的 克隆和表达弓形虫微线体蛋白MIC3基因。方法 从弓形虫RH株分离总的RNA,反转成cDNA.根据MIC3基因序列,设计合成一对引物,用聚合酶链式反应（PCR）方法从弓形虫cDNA中扩增MIC3基因片段,插入pGEM-T载体,并转化大肠杆菌Top10,经PCR、双酶切、测序验证后,将MIC3基因片段定向亚克隆到载体pET-28a中构建原核表达重组质粒pET-28a-MIC3,重组子在E.coli BL21中经IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果 从弓形虫RH株cDNA中扩增出792bp大小的MIC3基因片段并诱导表达27 300 Mr的重组MIC3蛋白。结论 成功构建和表达了弓形虫pET-28a-MIC3重组质粒,为弓形虫病诊断抗原和疫苗的研究奠定了基础。     

弓形虫RH株微线体蛋白MIC3基因的克隆与表达

目的 克隆和表达弓形虫微线体蛋白MIC3基因。方法 从弓形虫RH株分离总的RNA,反转成cDNA.根据MIC3基因序列,设计合成一对引物,用聚合酶链式反应(PCR)方法从弓形虫cDNA中扩增MIC3基因片段,插入pGEM-T载体,并转化大肠杆菌Top10,经PCR、双酶切、测序验证后,将MIC3基因片段定向亚克隆到载体pET-28a中构建原核表达重组质粒pET-28a-MIC3,重组子在E.coli BL21中经IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果 从弓形虫RH株cDNA中扩增出792bp大小的MIC3基因片段并诱导表达27 300 Mr的重组MIC3蛋白。结论 成功构建和表达了弓形虫pET-28a-MIC3重组质粒,为弓形虫病诊断抗原和疫苗的研究莫定了基础。     

超声造影肝脏影像报告与数据系统对甲胎蛋白阴性患者肝脏局灶性病变恶性风险的预测价值

目的 探讨超声造影肝脏影像报告与数据系统2017版（CEUS LI-RADS v2017）对甲胎蛋白（AFP）阴性患者肝脏局灶性病变（FLL）恶性风险的预测价值。方法 选取我院行CEUS检查的108例AFP阴性FLL患者的134个结节,其中肝细胞癌（HCC）52个,非HCC恶性肿瘤（OM）22个,良性病灶60个。采用CEUS LI-RADS v2017对结节进行分类,以组织病理学结果或增强影像学检查和临床随访结果为金标准,计算CEUS LI-RADS v2017对AFP阴性患者FLL恶性风险的预测效能;绘制受试者工作特征曲线分析其曲线下面积（AUC）。结果 LR-5与LR-4、5诊断AFP阴性HCC的敏感性、特异性分别为73.08%和88.46%、93.90%和82.93%,差异均有统计学意义（均P<0.05）;AUC分别为0.84和0.86,二者比较差异无统计学意义。LR-M诊断OM的敏感性、特异性和AUC分别为90.91%、97.32%和0.94。结论 CEUS LI-RADS v2017对AFP阴性患者FLL恶性风险有一定的预测价值;其中LR-5预测HCC的特异性高而敏感性...     

2011年我国网络直报棘球蚴病病例分析北大核心CSCD

目的分析2011年中国疾病预防控制中心疫情监测信息管理系统中棘球蚴病报告病例的相关信息。方法运用SPSS 16.0软件,对2011年中国疾病预防控制中心疫情监测信息管理系统的棘球蚴病报告病例进行统计学分析。结果 2011年我国棘球蚴病报告病例3 225例,其中,死亡病例1例,有效病例3 013例。发病居前3位的是新疆(41.5%,1 251/3013)、甘肃(16.9%,509/3 013)和青海(12.0%,363/3 013)。各年龄组均有发病,31～40岁组报告病例数所占比例最高(20.7%,625/3 013),男女病例之比为1:1.01。高发职业为农牧民。结论 2011年中国棘球蚴病网络直报病例主要分布在新疆、甘肃、青海、宁夏、四川、内蒙古和西藏等7省(区),棘球蚴病在中国西部地区依然流行较广。     

中药熏洗+针刺联合马应龙麝香痔疮膏治疗痔疮的疗效分析

目的 观察中药熏洗+针刺联合马应龙麝香痔疮膏治疗痔疮疗效.方法 将80例患者依据随机数字法分为两组各40例.对照组马应龙麝香痔疮膏,2 g肛缘涂抹,2 g肛内挤入,早晚各1次.治疗组中药熏洗联合针刺.中药熏洗方,水煎2000 mL,趁热熏蒸,药液温度降至40℃左右坐浴30 min,早晚各1次;针刺,患者会阳、承山、大肠...     

术中自体血回输与细菌污染

输血作为一种有效的治疗手段普遍应用于临床，但血源不足成为一个突出矛盾，同时因输血而引起的疾病传播、溶血反应、过敏反应、免疫反应等并发症日益受到关注。因此，如何有效利用病人自己的血进行输血治疗——即自体输血，越来越受到人们的青睐。早在1818年Blundell就曾为1例产后大出血的妇女回输了收集的自身血液而获得了成功。经过近一个半世纪的发展，直到20世纪70年代第4代红细胞回收仪-Haemonetics Cell Saver的问世，自体血回输开始在全球范围内得到广泛应用，并取得了相当好的临床治疗效果。然而，根据美国CDC的统计，1998—2000年间全美共有34例病人因自体血回输造成严重细菌感染，其中9例病人最终死亡。因此，明确有细菌污染的手术中，由于可能引起人为的细菌传播而导致败血症，自体血回输一直被视为禁忌。究竟现今的术中自体血回输（intraoperative autotransfusion，IOAT）技术能否有效地清除污染血液中的细菌，以及采取何种方法来实现，是值得研究的问题。     

肝癌代谢重编程相关基因富集分析及ATP柠檬酸裂解酶表达的临床意义

目的 筛选参与肝细胞癌（HCC,简称肝癌）肿瘤进展的代谢重编程相关基因,明确HCC组织标本中ATP柠檬酸裂解酶（ACLY）表达情况,并纳入GEO数据,分析其与HCC临床病理指标的相关性及其在HCC生存预后中的作用。方法 下载TCGA数据库中的HCC表达数据,将50对癌组织与癌旁配对组织样本纳入差异表达基因分析,获得全基因表达谱列表;设置差异表达基因纳入标准,获得差异表达基因列表;通过GSEA、GO及KEGG三种富集方法筛选获得共同的HCC代谢重编程相关基因。采用qRT-PCR检测ACLY在临床组织标本中的表达情况。下载GSE14520数据集并将隶属GPL3921平台的221例生存数据完整的基因芯片表达数据和临床数据纳入研究,通过生存分析、Cox回归分析和临床相关性研究明确ACLY与HCC预后的关系。结果 通过基因富集分析筛选获得26个HCC代谢重编程相关基因。临床标本检测显示ACLY在癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P＜0.05）。相关性分析表明ACLY表达与TNM分期、CLIP分期和AFP相关（P＜0.05）;生存分析显示ACLY的表达与HCC总体生存率相关（P＜0.05）,并与HCC无复发生存有相关性趋势（P=0.05）。Cox回归分析表明ACLY的表达水平与HCC总体生存和术后无复发生存率相关（P＜0.05）。结论 本研究获得了26个HCC代谢重编程相关基因,其中ACLY的异常表达与HCC分期显著相关;ACLY的表达水平与HCC预后显著相关,是HCC总体生存的独立风险因素。