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目的制备抗疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体,鉴定其与组织抗原MDIi的反应性。方法以PCR扩增获得MDIi序列构建原核表达载体pET-32a/MDIi,转化大肠杆菌进行表达;对表达产物鉴定后,免疫小鼠制备抗MDIi多克隆抗体;间接ELISA测定抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性,间接ELISA检测抗体与疣鼻栖鸭组织MDIi的反应强度。结果成功构建了pET-32a/MDIi原核表达载体,诱导表达了相对分子质量(Mr)约40 000的包涵体形式的MDIi重组蛋白,免疫小鼠获得效价为1∶128 000的特异性多克隆抗体,抗体与疣鼻栖鸭组织中的MDIi反应滴度为1∶32 000。结论成功制备了高效价的特异性抗MDIi多克隆抗体,抗体与组织抗原有较强的免疫反应性。 相似文献
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目的探索鸡和疣鼻栖鸭Ia-相关的恒定链(CIi和MDIi)的交叉免疫原性。方法用间接ELISA检测抗CIi小鼠血清与原核表达MDIi的反应性、抗MDIi小鼠血清与原核表达CIi的反应性;通过荧光免疫组织化学法鉴定抗CIi小鼠血清与疣鼻栖鸭脾组织MDIi的荧光反应强度、抗MDIi小鼠血清与鸡肝组织CIi的荧光反应强度。结果抗MDIi小鼠血清与原核表达CIi的反应滴度为1∶8000,抗CIi小鼠血清与原核表达MDIi的反应滴度为1∶16 000;采用抗MDIi小鼠血清、抗CIi小鼠血清进行免疫荧光组织化学染色,均能检测异种鸟类组织内的Ii抗原,但荧光染色强度均弱于同种鸟类Ii抗原组织的荧光反应强度。结论 CIi和MDIi具有交叉免疫原性,CIi和MDIi的序列保守性是形成共同抗原表位的分子基础,从免疫学角度揭示了鸟类Ii的高度保守性。 相似文献
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目的:狐狸是短日照季节性单次发情动物,精子的发生有明显的阶段特异性。本研究是为了探明季节变化对狐狸精子发生的影响。方法:以未发情期(2014年9月28日)、睾丸发育初期(2014年11月29日)和睾丸发育成熟期(2015年1月27日)的银狐各2只为研究对象,称量双侧睾丸的质量和体积,采用酶联免疫吸附实验检测睾丸中睾酮的含量。并利用组织切片技术分析曲细精管中各类生精细胞的组成及比例。结果:9月、11月和次年1月银狐睾丸的质量分别为(0.896±0.002)g、(3.365±0.081)g、(5.241±0.100)g;体积分别为(1.215±0.036)cm3、(5.558±0.794)cm3、(14.112±2.854)cm3;睾酮含量分别为(0.211±0.060)μg/g、(2.040±0.202)μg/g、(3.240±0.432)μg/g。从9月至次年1月银狐睾丸质量、体积以及睾酮含量均逐渐增加,组间差异具有统计学意义(P均<0.05)。切片上单个曲细精管横截面中生精细胞的组成和数量随着时间的推移逐渐增加呈现季节变化,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:狐狸的精子发生呈现典型的季节性,在皖北采集公狐精液的最佳时间为1月20日左右。本研究为探究银狐的繁殖特性及提高银狐的人工授精率奠定了基础。 相似文献
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目的分析脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶(L-PGDS)与精浆其他参数之间的关系,探讨L-PGDS在男性生殖系统中的作用。方法分析92份精液中的精子密度、精子活力、L-PGDS浓度、酸性磷酸酶活力以及α-葡萄糖苷酶活力。依据精子密度,将标本分为3组:正常组(精子密度>20×106/ml)、寡精子组(精子密度<20×106/ml)及无精子组(精子密度为0)。彩色精子质量分析系统测定精子密度及活力,双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测精浆内的L-PGDS浓度,分光光度计测定α-葡萄糖苷酶活力。结果正常组、寡精子组以及无精子组患者精浆L-PGDS浓度依次降低,差异显著(P<0.001)。L-PGDS的浓度与α-葡萄糖苷酶、精子密度及精子活力呈正相关,相关系数(r)分别为0.426、0.813和0.380。结论精浆L-PGDS浓度可作为少精子症的辅助诊断指标。 相似文献
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