载脂蛋白CI与肾母细胞瘤疾病分期的相关性分析

目的 探讨载脂蛋白CI与肾母细胞瘤疾病分期的关系。方法 选取2010年8月至2022年2月赣南医学院第一附属医院收治的肾母细胞瘤患儿50例设为研究组,另选取门诊体检健康儿童20名设为对照组。两组均在晨起时空腹采集血液样本,并取研究组手术切除或穿刺活检的新鲜标本,应用ELISA法测定血清载脂蛋白CI水平,应用免疫组化法测定研究组的瘤体组织载脂蛋白CI水平。比较研究组与对照组、研究组不同疾病分期患者血清及组织载脂蛋白CI表达水平,分析血清及组织载脂蛋白CI表达水平与肾母细胞瘤疾病分期的相关性。结果研究组血清载脂蛋白CI水平高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。研究组不同疾病分期患儿血清及瘤体组织载脂蛋白CI水平比较,差异有统计学意义（P<0.05）,Ⅱ期患儿血清及瘤体组织载脂蛋白CI水平高于Ⅰ期患儿,Ⅲ期患儿血清及瘤体组织载脂蛋白CI水平高于Ⅱ期患儿,Ⅳ期患儿血清及瘤体组织载脂蛋白CI水平高于Ⅲ期患儿,Ⅴ期患儿血清及瘤体组织载脂蛋白CI水平高于Ⅳ期患儿,差异有统计学意义（P<0.05）;相关性分析显示,血清及瘤体组织载脂蛋白CI水平与肾母细胞瘤疾病分期呈正相关（P...     

DNMT1和DNMT3b基因干扰对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察DNA甲基转移酶1(DNMT1)和DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)基因干扰对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响.方法 利用LipofectamineTM 2000转染DNMT1和DNMT3b小分子干扰RNA (siRNA)至胰腺癌BxPC-3细胞.实验共分5组:DNMT1干扰组(转染DNMT1-siRNA)、DNMT3b干扰组(转染DNMT3b-siRNA)、双重干扰组(转染DNMT1+ DNMT3b-siRNA)、阴性对照组(转染negative-siRNA)和空白对照组(转染脂质体).转染48 h后,应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法和Western blot法分别检测细胞中DNMT1、DNMT3b mRNA和蛋白的表达水平;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞体外增殖活力;流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 与空白对照组和阴性对照组比较,各干扰组的DNMT1和(或)DNMT3b mRNA及蛋白表达量均显著降低(P＜0.01).DNMTI干扰组和双重干扰组的细胞生长抑制率分别为30.9％和28.3％,均显著高于DNMT3b干扰组的14.5％ (P＜0.01),而DNMT1干扰组和双重干扰组之间差异无统计学意义(P＞0.05).空白对照组、阴性对照组、DNMT1干扰组、DNMT3b干扰组和双重干扰组的细胞凋亡率分别为3.74％、5.07％、44.46％、24.20％和39.24％,各干扰组的细胞凋亡率均比对照组显著增加(P＜0.01),DNMT1干扰组与双重干扰组的细胞凋亡率均显著高于DNMT3b干扰组(P＜0.01),而DNMT1干扰组与双重干扰组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 DNMT1和(或)DNMT3b基因表达下调后,能抑制胰腺癌BxPC-3细胞生长,并能诱导细胞凋亡.DNMT1单干扰的抑癌作用优于DNMT3b单干扰,DNMT1和DNMT3b双重干扰无明显的协同效应.     

Foxp3 mRNA在肝癌外周血中的表达及肝动脉化疗栓塞对其表达的影响

目的 探讨肝癌患者外周血单核细胞中叉头状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA表达量的变化.方法 分别收集30例肝癌患者肝动脉化疗栓塞(TACE)化疗前、化疗后1周外周血标本和14例健康人群及14例慢性乙肝患者的外周血标本,以GADPH为内参采用RT-PCR方法对外周血单核细胞Foxp3 mRNA表达水平进行检测.结果 Foxp3 mRNA表达水平在健康对照组、慢性乙肝组及肝癌TACE术前组间比较,差异有统计学意义(P＜0.01);健康对照组Foxp3 mRNA表达水平明显低于慢性乙肝组及肝癌TACE术前组,差异有统计学意义(P＜0.01),慢性乙肝组Foxp3 mRNA表达水平明显低于肝癌TACE术前组,差异有统计学意义(P＜0.01),肝癌TACE术后组中Foxp3 mRNA表达水平明显低于肝癌TACE术前组,两者比较差异有统计学意义(t=48.3,P＜0.01).结论 肝癌患者外周血单核细胞Foxp3 mRNA表达明显高于慢性乙肝组及健康对照组,说明Foxp3 mRNA表达的变化与肝癌的发生及发展有关.肝癌患者行TACE化疗后Foxp3 mRNA表达量明显下降,说明TACE可影响肝癌患者机体的免疫功能.     

RNA干扰沉默Cyclin D1基因对胰腺癌AsPC-1细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨以细胞周期蛋白（Cyclin）D1为靶基因的RNA干扰对胰腺癌AsPC-1细胞增殖和凋亡的影响,为胰腺癌的靶向治疗提供依据。方法用含有10％FBS的DMEM培养液在37℃、5％CO2培养箱中常规培养AsPC-1细胞,至对数生长期后接种于96孔培养板中,随机分为实验组、阴性对照组、空白对照组,并采用Lipo-fectamine^TM 2000脂质体分别转染Cyclin D1-小干扰RNA（siRNA）、阴性对照siRNA、脂质体,48h时收集细胞。应用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测细胞中Cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测细胞体外增殖活力,流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡率（AI）。结果与空白对照组和阴性对照组相比,实验组Cyclin D1 mRNA和蛋白表达均明显下调,细胞生长速度明显减慢,G0／G1细胞比例显著增大、S期细胞比例则明显降低、AI显著升高（P均〈0．01）。结论Cyclin D1-siRNA能通过沉默靶基因表达抑制AsPC-1细胞生长、改变细胞周期分布、诱导细胞凋亡,可作为胰腺癌基因治疗的一个有效靶点。     

巨噬细胞抑制因子-1作为血清肿瘤标志物对胰腺癌的临床诊断价值

目的 探讨巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)作为血清肿瘤标志物对胰腺癌的临床诊断价值.方法 采用酶联免疫法( ELISA)检测35例胰腺癌和30例胰腺良性疾病及30例健康对照者的血清MIC -1水平,并与CA19-9作比较.结果 胰腺癌患者的血清MIC -1水平[(1 589.8±838.5)pg/mL]显著高于胰腺良性疾病者[(400.6±104.3)pg/mL]及健康对照者[(386.1±145.5) pg/mL](均P＜0.01),而胰腺良性疾病者与健康对照者之间差异无统计学意义(P＞0.05).MIC -1检测诊断胰腺癌的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和受试者操作特征曲线下面积( AUC)分别为85.7%,93.3%,93.8%,84.9%和0.973,分别高于CA19-9的对应值74.3%,90.0%,89.6%,75.0%和0.862.两者联合检测对胰腺癌诊断的敏感性为91.4%,特异性为83.3%.在胰腺良性疾病患者中,MIC -1阳性率显著低于CA19-9阳性率(3.3%vs.26.7%,P＜0.05);伴有黄疸者的CA19-9阳性率显著高于无黄疸者(55.6% vs.14.3%,P＜0.05),而有无黄疸对MIC -1阳性率无明显影响(P＞0.05).结论 血清MIC -1对胰腺癌的综合诊断能力优于CA19-9,有望成为胰腺癌新的血清肿瘤标志物.     

胰十二指肠切除术后出血18例临床分析

目的探讨胰十二指肠切除(pancreaticoduodenectomy,PD)术后出血的原因和防治。方法回顾性分析2001年1月~2010年4月该院施行的279例PD术的临床资料。术后出血的诊断采用国际胰腺外科研究协作组(ISGPS)的胰腺切除术后出血(PPH)定义及分级标准。结果 18例(6.5%,18/279)发生术后出血,其中消化道出血6例,腹腔内出血12例;早期出血6例,迟发性出血12例;轻度5例,重度13例;B级11例,C级7例。出血时间为术后1h～20d,中位时间为5.5d。再手术10例(55.6%,10/18),死亡4例(22.2%,4/18)。结论及时而果断的再手术是处理PD术后并发出血的一个重要手段。精细熟练的操作、严密吻合、彻底止血及有效预防胰瘘、腹腔感染等并发症的发生是减少术后出血的关键。     

RNA干扰DNMT1基因对胰腺癌细胞BxPC-3增殖的影响及相关机制

目的:探讨RNA干扰DNMT1基因对胰腺癌细胞BxPC-3增殖的影响及相关机制.方法:利用Lipofectamine TM2000转染DNMT1-siRNA至胰腺癌细胞BxPC-3.实验共分为3组:实验组(转染DNMT1-siRNA)、阴性对照组(转染negative-siRNA)和空白对照组(转染脂质体).转染48h后,应用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测细胞中DNMT1 mRNA和蛋白的表达水平;MTT法检测细胞体外增殖活力;FCM法检测细胞凋亡;甲基化特异性PCR法(MSP)检测抑癌基因p16、RASSF1A和ppENK的启动子甲基化状态.结果:与空白对照组和阴性对照组相比,实验组的DNMT1 mRNA及蛋白表达量均显著降低(P<0.01);实验组细胞增殖明显受到抑制(P<0.05),细胞凋亡率明显增加(44.46%±5.98%vs3.74%±1.02%vs5.07%±1.16%,P<0.01).空白对照组与阴性对照组的p16、RASSF1A和ppENK基因甲基化阳性,而实验组的p16和ppENK基因甲基化阴性,RASSF1A基因部分甲基化.结论:DNMT1基因表达下调后,能抑制胰腺...     

沉默DNMT1和DNMT3b基因对胰腺癌BxPC-3细胞p16|RASSF1A基因启动子甲基化的影响

目的:探讨沉默DNMT1和DNMT3b基因对胰腺癌BxPC-3细胞p16,RASSF1A基因启动子甲基化的影响。方法:将胰腺癌BxPC-3细胞分为5组:DNMT1干扰组(转染DNMT1-siRNA),DNMT3b干扰组(转染DNMT3b-siRNA),双重干扰组(转染DNMT1+DNMT3b-siRNA),阴性对照组(转染阴性siRNA)和空白对照组(转染脂质体)。转染48 h后,应用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测细胞中DNMT1和DNMT3b的mRNA及蛋白的表达水平;甲基化特异性PCR法检测p16和RASSF1A基因启动子甲基化。结果:与空白对照组和阴性对照组比较,各干扰组目的基因的mRNA及蛋白表达量均明显降低(均P<0.01)。空白对照组与阴性对照组p16和RASSF1A基因甲基化阳性;DNMT1干扰组和双重干扰组p16基因甲基化阴性,RASSF1A基因部分甲基化;DNMT3b干扰组p16基因部分甲基化,RASSF1A基因甲基化阳性。结论:DNMT1单干扰对胰腺癌BxPC-3细胞p16和RASSF1A基因的去甲基化作用优于DNMT3b单干扰,DNMT1和DNMT3b双重干扰无明显的协同效应;提示DNMT1是胰腺癌去甲基化治疗的一个有效靶点。     

胰腺癌血清肿瘤标志物的研究现状

胰腺癌的发病率在世界范围内呈逐年上升趋势,其早期诊断困难,手术切除率低,5年生存率仅为5%左右.改善胰腺癌不良预后的关键在于早期诊断和根治性切除.检测血清肿瘤标志物有助于胰腺癌的诊断、预后判断和治疗监测.尽管有一定的局限性,CA19-9仍是目前临床最常用的胰腺癌血清肿瘤标志物.近年来随着分子生物学技术的发展,不断有新的候选胰腺癌血清肿瘤标志物被发掘,如MIC-1、M2-PK、OPN和RCASl等.本文简要综述了胰腺癌血清肿瘤标志物的研究现状和进展.     

囊膜破裂型脐膨出并脱出肠管扭转嵌顿伴回肠闭锁的诊治及文献复习

目的 总结囊膜破裂型脐膨出(ruptured omphalocele,RO)的诊治经验.方法 回顾性分析赣南医学院第一附属医院收治的1例RO并脱出肠管扭转嵌顿伴回肠闭锁患儿临床资料,同时检索PubMed、Springer Link、Google Scholar、中国生物医学文献数据库、中国知网、万方和维普数据库,对关键...