P4501A1基因Thr~(461)→Asn~(461)及Ile~(462)→Val~(462)突变载体的构建

目的构建P4501A1基因cDNAThr461→Asn461及Ile462→Val462突变载体,为进一步研究CYP1A1的功能和致癌机制奠定基础。方法根据人CYP1A1基因(GeneBankNM-000499)cDNA序列设计通用引物Pm3/Pm4和突变引物Pt15/Pt16;Pt17/Pt18,内含酶切位点和突变位点,先用Pm3/Pt16,Pm3/Pt18组成两对引物,以pGEM-T-CYP1A1质粒为模板进行第一轮扩增,获得上游1397bp片断,再用Pt15/Pm4,Pt17/Pm4组成两对引物以10ngpGEM-T-CYP1A1质粒为模板进行第二轮扩增,得到下游177bp片断。然后用Pm3/Pm4做引物以第一、第二轮扩增产物为模板进行第三轮扩增,获得的1·5kb扩增产物用1%琼脂糖凝胶分离并回收纯化,将纯化的PCR产物与pMD-T载体连接后转化大肠埃希菌DHα5感受态细胞,挑单克隆扩增、质粒抽提后进行酶切和测序鉴定。结果三轮PCR扩增得到的1·5kb片断,经内切酶BamHI和SalI消化和T7p和SP6通用引物进行双向测序,证实克隆的目的片段与GeneBank中人CYP1A1基因cDNA的序列同源性为99·9%,且包含两个设计的突变位点Asn461、Val462。结论本实验成功地构建了含突变位点Asn461、Val462的CYP1A1基因cDNA的片断。     

三氯乙烯对接触工人神经行为功能影响的初步研究

目的：了三氯乙烯（TCE）低浓度、长时间的暴露条件下对暴露人群的早期影响。方法：运用WHO推荐的神经行为功能测试组合（WHO－NCTB）对我国南方某市一区65名TCE作业工人及115名对照工人进行了神经行为功能测试,同时测定研究对象尿中TCE的代谢产物三氯乙酸（TCA）的含量。结果：接触工人车间空气中TCE平均浓度为90．8mg/m^3,接触工人班后尿TCA平均值为52．1mg/g肌酐;接触组NCTB测试项目中数字译码、简单反应时的标准差、优势手提转敏捷度、目标追踪错误数及总数得分显著差于对照组,通过等级相关分析,发现接触组班后尿TCA水平与目标追踪正确数、总数呈显著负相关;与情感问卷中困惑－迷茫项、目标追踪错误数呈显著正相关。结论：长时间接触较低浓度TCE早期可对暴露者神经行为功能产生明显影响,主要表现在短时间记忆力、注意力降低、手运动速度下降,手－眼运动协调性和稳定性差,并有一定的消极情感状态改变;尿TCA水平与以上改变呈一定的剂量－反应关系。     

摩托车驾驶员神经行为功能状态的研究

从事交通运输作业的司机可接触到化学污染物 (一氧化碳、氮氧化物、铅等 )及物理性有害因素 (噪声、振动 ) ,对人体可造成多方面的影响。摩托车驾驶员是接触交通污染最为直接的人群之一。我们采用世界卫生组织推荐的神经行为核心测试组合 (ＮＣＴＢ)检查了摩托车驾驶员的神经行为功能 ,初步探索这些有害因素综合作用对神经行为的影响。对象与方法　 (1)研究对象 :随机选取参加驾驶证年检的摩托车驾驶员 6 1名为观察组 ,其中男性 47名 ,女性 14名 ,年龄 2 1～ 6 2岁 ,平均年龄为 32 48;将观察组按驾驶工龄划分为≤ 5年和 >5年组。另以某厂 6…     

油墨生产工人神经行为功能影响的研究

目的　探讨油墨生产操作工人长时间职业性接触多种有机溶剂后 ,对其神经行为功能的影响。方法　采用WHO推荐的神经行为核心测试组合 (NCTB) ,对 69名油墨操作工人和 72名对照者的情绪状态 (POMS)、简单视觉运动反应时、数字广度、圣他·安娜提转敏捷度、数字译码、Benton视觉保留、目标追踪测试Ⅱ等进行测试并对测试结果进行比较分析。结果　油墨车间空气多种有机溶剂浓度中位数均低于国家有关标准 ;除数字广度一项外 ,暴露组大多数测试项得分与对照组相比差异无显著意义 ;有机溶剂暴露时间长短与各测试项目得分无明显关系。结论　同时职业性接触多种低浓度有机溶剂的油墨工人 ,其神经行为功能未见明显影响     

204例肺结核患者耐药情况调查与分析

目的　调查肺结核患者对 4种抗结核药物 (S ,H ,R ,E)的耐药情况。方法　对广州市胸科医院 2 0 4例肺结核患者耐药情况进行回顾性调查。结果　 2 0 4例肺结核患者中 ,初治患者 14 3例 ,复治患者 6 1例。肺结核患者总耐药率为 4 4 . 7% ;不同年龄组的耐药率差异无显著性 (P >0 . 0 5 ) ;复治患者耐药率 80 . 6 %高于初治患者2 2 4 % (P <0 .0 5 ) ;4种抗结核药物的耐药率由高到低依次为 :H(36 . 2 % ) ,R(31. 9% ) ,S(2 4 .5 % )和E(7. 4 % ) ;初治和复治患者耐 1种、耐 2种、耐 3种及耐 4种药物的耐药率分别是 :6 . 9% ,5 . 2 % ,3 4 % ,6 . 9%和 19. 4 % ,2.7 8% ,8 3% ,2 5 % ,同时对H ,R耐药的MDR -TB发生率为 2 4 . 5 %。结论　临床抗结核药物耐药情况依然严重 ,且耐药趋于对主要一线抗结核药物和对多种药物耐药 ,应加强肺结核病的治疗管理工作 ,积极探索耐药性结核病的治疗和控制的新方案。     

巢式PCR法构建人细胞色素P4501A1基因cDNA全长T载体

目的构建含限制性内切酶位点KpnI,XhoI的人细胞色素氧化酶(CYP1A1)基因cDNA全长的pGEM -T载体。方法从培养的MCF-7细胞中抽提总RNA并根据人细胞色素P4501A1(CYP1A1,GeneBank NM- 000499)开放阅读框设计两对引物,采用巢式-PCR方法扩增CYP1A1 mRNA全长,凝胶分离并回收扩增的DNA片断,与T载体连接后转化大肠埃希菌DH5α,挑选3个阳性克隆,扩增培养后抽提重组质粒并进行PCR及酶切鉴定, 再行测序分析。结果重组质粒PCR扩增得到1568 bp的片段,KpnI,XhoI限制性内切酶消化质粒证实目的片断成功插入至载体,测序分析也进一步证明了目的片段与GeneBank中CYP1A1 mRNA的序列同源性为99.9%。结论该实验成功地构建了含CYP1A1基因cDNA全长区域的T载体克隆,巢式-PCR是一种简便、特异、灵敏的方法, 可用于基因的检测和载体的构建。     

CYP1A1基因cDNA全长的T载体克隆及序列分析

目的构建含KpnI、XhoI双酶切位点的人细胞色素(CYP1A1)基因cDNA全长的pGEM-T载体,为以后的亚克隆和毒理学研究提供实验材料。方法从培养的人乳腺癌细胞(MCF-7)中抽提总RNA,RT-PCR扩增CYP1A1基因cDNA全长,与pGEM-T载体连接后转化DH5α,筛选阳性克隆,抽提重组质粒并进行PCR及酶切鉴定,再行测序分析。结果重组质粒pGEM-T-1A1 PCR后获得了1 568 bp产物,酶切鉴定证实目的片段成功插入至pGEM-T,测序分析也进一步证明了目的片段与GeneBank中CYP1A1mRNA的序列同源性为99.9%。结论成功地构建了含CYP1A1基因cDNA全长区域的T载体。     

某高校二次供水水质卫生状况的调查

饮用水的卫生安全直接影响着人们的健康。目前绝大多数建筑的三楼及以上的供水为二次供水方式。随着高层建筑蓄水池的推广,方便了广大居民,但由于早期对二次洪水卫生的疏忽,引致了水质量的下降（１－３）。因此,对于国家制定了《二次供水卫生管理办法》。为了解某校区内高层建筑二次供水存在的问题,给二次供水卫生管理提供决策依据,我们对其进行了调查。１对象与方法１．１调查对象 在某校区内随机抽取有顶层蓄水池的高楼１２幢,采集顶层水池水（下称水池水）１０份;随机采集经顶层水池输送到各用户的末梢水（下称末梢水）１２份及…     

精安胶囊对大鼠精子质量的影响

目的 :探讨精安胶囊对大鼠精子质量的影响 ,为临床安全使用提供依据。　方法 :80只SD雄性大鼠 ,随机分为低剂量组 ( 5 5 7 1mg/kg) ,中剂量组 ( 5 5 71mg/kg) ,高剂量组 ( 114 2 0mg/kg)和阴性对照组 ( 2 0g/L淀粉 )共 4组 ,每组 2 0只 ,连续给药 6 0d后处死 ,取一侧附睾分析精子计数、活率和形态 ,实验数据运用方差、χ2 检验、Kruskal Wal lis检验进行统计学分析。　结果 :各剂量组精安胶囊对大鼠的精子密度、活率和形态有不同程度的影响。低剂量组精子密度显著增加 (P <0 .0 1) ,高剂量组精子密度和活率降低 ,且与阴性对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。低剂量组精子形态异常率降低 ,中、高剂量组升高 ,但无统计学意义 (P >0 .0 5 )。　结论 :低剂量精安胶囊可改善精子质量 ,高剂量精安胶囊可能对精子产生一定的损伤