白细胞介素13对胆管成纤维细胞TGF-β1/Smads通路表达的影响及地塞米松的干预作用

目的:探讨白细胞介素13(IL-13)对胆管成纤维细胞转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads通路活性的影响及地塞米松(Dex)的干预作用。方法:分离、培养兔胆管成纤维细胞并鉴定后分别给予IL-13、IL-13联合不同浓度的Dex(0.01、0.05、0.25 mg/mL)干预48 h,以无处理的胆管成纤维细胞为空白对照,分别用CCK-8细胞计数法测定各组细胞增殖水平;real-time PCR检测各组细胞TGF-β1、Smad3及Smad4基因mRNA表达;Western blot检测各组细胞TGF-β1及Smad4蛋白表达。结果:与空白对照组比较,在IL-13干预48 h后,胆管成纤维细胞增殖明显加速、TGF-β1、Smad3及Smad4 mRNA表达均明显上调,TGF-β1、Smad4蛋白表达明显上调(均P0.05),而Dex对IL-13引起的上述变化有明显的抑制作用,并呈一定的浓度依赖趋势(部分P0.05)。结论:IL-13能增加胆管成纤维细胞TGF-β1/Smads通路的活性,削弱该通路的活化可能是Dex抑制良性胆道狭窄形成的机制之一。     

地塞米松对兔胆道成纤维细胞P311/TGF-β1/α-SMA通路表达的影响

目的：研究地塞米松(dexamethasone,DEX）对兔良性胆道狭窄（benign biliary stricture,BBS）模型胆管成纤维细胞（model fibroblast,MF）中P311/转化生长因子－β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）/α-平滑肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）通路表达的影响。方法：取2只家兔正常胆管培养正常胆管成纤维细胞（normal bile duct fibroblasts,NF）,对2只家兔采用切开再吻合方法建立BBS模型并获取MF,进行细胞鉴定后分组为：NF、MF、MF+不同浓度的DEX（0.02,0.1及0.5 mg/mL）组,各组给予对应浓度的DEX干预48 h,CCK-8细胞计数法测定各组细胞增殖水平;qRT-PCR检测各组细胞P311、TGF-β1及α-SMA 基因mRNA表达水平;Western blot检测各组细胞TGF-β1及α-SMA蛋白表达水平。结果：①各组细胞A值：NF为0.331±0.002,MF组为0.533±0.005,MF+DEX 0.02组为0.487±0.003,MF+DEX 0.1组为0.434±0.004,MF+DEX 0.5组为0.381±0.004。②各组细胞P311 mRNA值：NF组为1.000 0±0.024 8,MF组为4.146 3±0.037 1,MF+DEX 0.02组为3.789 9±0.056 8,MF+DEX 0.1组为3.566 1±0.148 1,MF+DEX 0.5组为2.945 8±0.165 4。③各组细胞TGF-β1 mRNA值NF组为1.000 0±0.034 6,MF组为2.647 9±0.048 5,MF+DEX 0.02组为1.929 7±0.054 8,MF+DEX 0.1组为1.678 2±0.080 2,MF+DEX 0.5组为1.676 2±0.036 9。④各组细胞α-SMA mRNA值：NF组为1.000 0±0.056 0,MF组为4.025 7±0.065 9,MF+DEX 0.02组为3.644 9±0.196 4,MF+DEX 0.1组为2.712 9±0.102 4,MF+DEX 0.5组为2.320 7±0.031 2。⑤各组细胞TGF-β1蛋白值：NF组为0.999 6±0.046 3,MF组为2.096 3±0.029 3,MF+DEX 0.02组为1.781 8±0.040 4,MF+DEX 0.1组为1.531 4±0.032 5,MF+DEX 0.5组为1.384 0±0.035 7。⑥各组细胞α-SMA蛋白值：NF组为1.000 8±0.051 4,MF组为3.231 4±0.116 0,MF+DEX 0.02组为2.875 3±0.078 0,MF+DEX 0.1组为2.262 8±0.059 8,MF+DEX 0.5组为1.940 8±0.093 7。在DEX干预48 h后,MF增殖明显受到抑制,细胞P311、TGF-β1及α-SMA基因mRNA及蛋白表达明显下调（均P<0.05,0.1～0.5 mg/mL）,呈现浓度依耐性。结论： DEX抑制BBS形成的作用机制之一可能与它对MF中P311/TGF-β1/α-SMA通路的调控有关。     

精准肝切除术对原发性肝癌患者免疫功能及血清炎性因子的影响

目的 探讨精准肝切除治疗对原发性肝癌患者免疫功能、炎性因子及远期疗效影响。 方法 回顾性分析2011年8月至2013年12月原发性肝癌于贵州省医行肝叶切除术的患者临床资料,根据手术方式分为精准肝切除术组和Pringle 法阻断快速肝切除的对照组各41例。对照组用电刀在距肿瘤边缘1~2 cm 作一预切除线,行Pringle 法阻断快速肝切除。精准肝切除术组采用术中超声定位肿瘤附近的主要肝静脉支,用电刀在肝表面标记其主要走向。采用超声刀、水刀等逐步由浅及深、由前向后逐步将肝组织离断。比较两组免疫功能、炎性因子、并发症等指标。 结果 术后3 d,观察组CD3+、CD4+/CD8+、NK含量均明显高于对照组[(60.46±5.82 比 55.28±5.13)%,1.12±0.11 比 1.03±0.09,(8.69±1.24 比 7.33±1.15) pg·mL-1](t=4.275,4.055,4.149,P<0.05);血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)含量明显低于对照组[(15.46±2.27 比 20.38±3.56) ng·mL-1,(20.36±3.18比25.78±4.26) mg·L-1,(117.52±12.38 比131.67±13.49) pg·mL-1](t=7.461,6.528,4.948,P<0.05);随访1年,观察组胸腔积液胸腔感染、腹腔感染、肺部感染、肝功能衰竭、胆漏、术后出血的发生率均明显低于对照组( 2.44% 比 19.51%,2.44% 比 26.83%,2.44% 比 21.95%,0.00% 比26.83%,2.44% 比 19.51%,2.44% 比 14.63%)(χ²=6.117,9.762,7.289,2.704,6.117,3.904,P<0.05,P<0.001)。 结论精准肝切除术有助于保护原发性肝癌患者机体免疫功能,缓解术后炎性反应,减少并发症,促进患者康复。     

豚鼠不全性胆道梗阻早期Oddi括约肌功能的变化

目的:观察豚鼠胆道不全性梗阻后早期Oddi括约肌(SO)肌电活动及压力的变化。方法:16只英国短毛豚鼠随机均分假手术组与模型组,分别行假手术与制作胆总管不全性梗阻模型,期间测定胆总管直径;术后1周,再次检测两组胆总管直径、肝功能指标、SO肌电活动与动力学指标。结果:术后假手术组胆总管直径无明显改变(P0.05),而模型组较术前明显增大(P0.05)。与假手术组比较,模型组血清胆红素、肝酶水平明显升高(均P0.05);SO快波幅度和慢波振幅显著降低(均P0.05),但快波和慢波频率无统计学差异(均P0.05);SO基础压明显升高,但SO峰压明显降低(均P0.05),而SO收缩频率无统计学差异(P0.05)。结论:不全性胆总管梗阻可使豚鼠SO快、慢波振幅降低,SO基础压升高、收缩峰压降低,这可能是胆道不全性梗阻时易诱发急性胆源性胰腺炎的重要机制之一。     

TNF-α对兔胆管成纤维细胞P311/TGF-β1/α-SMA通路的影响及川芎嗪的干预作用

目的:探讨TNF-α对兔胆管成纤维细胞P311/TGF-β1/α-SMA通路的影响及川芎嗪的干预作用。方法:分离、培养正常家兔胆管成纤维细胞并鉴定,将胆管成纤维细胞分别给予TNF-α、TNF-α联合不同浓度的TMP(0.08、0.4、2.0 mg/m L)干预48 h,以无处理的胆管成纤维细胞为空白对照,用CCK-8法检测细胞增殖水平;real-time PCR检测细胞P311、TGF-β1、α-SMA m RNA表达;Western blot检测细胞TGF-β1、α-SMA蛋白表达。结果:与空白对照比较,胆管成纤维细胞经TNF-α处理后,增殖明显增强,P311、TGF-β1、α-SMA m RNA以及TGF-β1、α-SMA蛋白表达明显上调(均P0.05);TMP对TNF-α的上述效应有抑制作用,并且呈现浓度依耐趋势,其中0.4、2.0 mg/m L的TMP有明显作用(均P0.05)。结论:TNF-α可能通过调控P311/TGF-β1/α-SMA信号通路促进胆管成纤维细胞增殖,TMP能抑TNF-α对该通路的活化,故可能对良性胆道狭窄有防治作用。     

地塞米松抑制胆管瘢痕成纤维细胞的体外研究

研究地塞米松（DEX）对体外培养的兔胆管瘢痕模型成纤维细胞（MF）中I 型胶原、结缔组织生长因子（CTGF）及第10 号染色体丢失的张力蛋白同源的磷酸酶基因（ PTEN）表达的影响。方法对家兔采用切开再吻合方法复制胆管瘢痕模型并获取MF,经细胞鉴定后对MF 给予不同浓度的DEX（0.00、0.01、0.05 和0.25 mg/ml）干预48 h,活细胞计数法试剂盒测定各组细胞增殖水平;实时聚合酶链反应检测各组细胞I 型胶原、CTGF和PTEN mRNA表达水平;Western blot检测各组细胞I 型胶原和PTEN 蛋白表达水平。结果在DEX 干预48 h后,MF增殖受抑制,细胞I 型胶原、CTGF mRNA 和蛋白表达下调,PTEN mRNA 和蛋白表达上调（p <0.05）,呈浓度依耐性。结论DEX可能具有抑制胆管瘢痕及良性胆道狭窄形成的作用,其机制之一可能与MF 中I 型胶原、CTGF 及PTEN的调控有关。     

腹腔镜下胆总管探查一期缝合术并胆管内双J管内引流术的临床研究

目的探讨腹腔镜下胆总管探查取石、一期缝合并胆管内双J管内引流术的可行性和临床疗效。方法回顾性分析该院2008年9月～2011年7月收治的19例胆总管直径大于8mm的胆总管结石患者施行腹腔镜下胆囊切除、胆总管切开、胆道镜取石、胆管内双J管内引流术,总结该术式的适应证、操作技术及临床疗效,并将之与其他术式进行比较分析。结果 19例患者中18例手术获成功,1例中转开腹,术中取尽结石,术后未发现胆漏、胆管狭窄或残余结石。胆管内双J管17例于术后5～7d在胃镜下拔出,2例在术后1周内随大便自行排出。结论对于胆总管直径大于0.8cm,胆囊结石合并胆总管结石的病例,腹腔镜下胆总管切开探查取石、胆总管一期缝合、双J管内引流术是可行的,能缩短住院时间,降低医疗费用。