CLINICAL SIGNIFICANCE OF THE DETECTION OF MINIMAL RESIDUAL DISEASE IN CHILDHOOD B-ALL BY FLOW CYTOMETRY

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人表皮生长因子对牛角膜内皮细胞增殖和细胞周期的影响

目的 观察表皮生长因子(EGF)对牛角膜内皮细胞增殖和细胞周期的影响.方法 采用体外培养的牛角膜内皮细胞,在培养液中分别添加不同浓度的人表皮生长因子(hEGF),加药后第3、7天采用MTT法,在酶标仪492 nm波长处测定吸光度值观测细胞增殖,并记录细胞形态变化.将体外培养的牛角膜内皮细胞分为二组,常规DMEM培养液组和含50 ng/mL EGF的DMEM培养液组,培养3、7天后,应用流式细胞仪检测细胞周期各阶段G1、S、G2期分布.结果 与对照组相比,不同浓度EGF组对牛角膜内皮细胞增殖有促进作用且与浓度相关,其中10 ng/mL和100 ng/mL组作用强于1 ng/mL组.EGF加入后3 d,对照组S期细胞24.5%,G2-M期细胞0.08%,加药组S期细胞24.6%,G2-M期细胞0.06%.与对照组相比较,各期细胞分布大致相等,无显著差异.加入7 d后对照组S期细胞20.8%,G2-M期细胞0.41%,加药组S期细胞18.2%,G2-M期细胞1.55%,细胞分布发生明显变化.结论 EGF促进体外培养的牛角膜内皮细胞增殖,并使体外培养的牛角膜内皮细胞的细胞周期发生变化,S期细胞比例下降.     

儿童期急性白血病免疫分型诊断新方案的临床应用

目的 建立一种胞膜与胞浆抗原相结合、特异与敏感标志相结合的三色流式细胞术检测方法，研究儿童期急性白血病的免疫表型特点。方法 用CD45／SSC双参数点图区分白血病细胞和正常血细胞后，先用系列特异和敏感指标确定白血病细胞的系列来源，然后根据不同系列来源进一步检测。结果 CD45／SSC能明确区分白血病细胞和正常血细胞。胞浆抗原cCD79a、cCD3和MP0分别是B-ALL、T-ALL和AML的特异性抗原，且能够覆盖白血病分化的各阶段。CD19和CD7分别是B-ALL和T-ALL的系列敏感抗原。这两类抗原的结合在确定急性白血病的系列来源时特异、敏感、可靠，避免了仅用胞膜标记时因抗原跨系表达而获得可疑结果。结论 该方案可提高儿童期白血病免疫分型诊断的准确性，对患者的预后进行评估，是一种值得推广的免疫分型方案。     

尼索地平对单硝酸异山梨酯在小鼠体内组织分布的影响

目的考察尼索地平对单硝酸异山梨酯在小鼠体内组织分布的影响。方法 30只健康昆明种小鼠,♂,随机分成2组,分别为单独给药组和联合给药组,HPLC测定组织中单硝酸异山梨酯的浓度。结果小鼠组织中单硝酸异山梨酯浓度在给药后0.083 h为小肠>胃>心>肝>肾,给药后0.5 h为胃>小肠>肾>心>肝。胃中最大浓度出现时间因给药方案不同而异:单独给药组在给药后0.5 h单硝酸异山梨酯浓度最大,联合给药组在给药后0.083 h浓度最大。胃中单硝酸异山梨酯最大浓度,2组具有显著性差异(P<0.05)。结论尼索地平对单硝酸异山梨酯在小鼠组织中的分布具有一定影响。     

跟腱外露创面的显微外科治疗

目的 探讨应用显微外科技术,采用多种皮瓣修复跟腱外露创面的临床效果. 方法 以足底内侧皮瓣、足跟外侧皮瓣和腓肠神经营养血管皮瓣转移修复跟腱外露11例. 结果 11例皮瓣全部成活,术后随访8～ 24个月,平均14个月,皮瓣色泽,弹性良好,外形不臃肿,8例皮瓣恢复了痛觉,3例腓肠神经营养血管皮瓣恢复了保护性感觉,供区直接缝合7例,余4例供区植皮全部成活,供区无明显疼痛. 结论 对于跟腱外露创面采用局部岛状皮瓣转移修复,可获得良好的临床效果.     

抗Xa因子活性室间质量评价调查品制备及应用

目的 制备抗Xa因子活性室间质量评价（EQA）调查品,评估上海地区临床实验室抗Xa因子活性检测能力。方法 将肝素缓冲液和离心后的新鲜冰冻血浆按不同比例混合,配制成2个浓度水平的调查品,分装冻存。依据《标准物质的定值——通用原则和统计原理》和《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》要求对调查品的均匀性和稳定性进行评价。将自制的抗Xa因子活性EQA调查品发放至上海市14家医院临床实验室,分析各实验室抗Xa因子活性测定结果。结果 自制EQA调查品均匀性良好（F<3.02）。复融稳定性结果显示,调查品在室温条件下可稳定5 h;短期稳定性结果显示,调查品在2～8℃条件下可稳定保存14 d。14家临床实验室2个水平调查品检测结果的变异系数（CV）分别为11.97%和9.85%。结论 自制的抗Xa因子活性EQA调查品均匀、稳定,可用于评估上海地区临床实验室抗Xa因子活性检测能力。     

上海市医疗机构临床检验质量指标调查结果与分析

目的通过分析上海地区医疗机构临床实验室基本情况和15项质量指标,初步了解上海地区临床实验室现状,为进一步改进上海地区临床实验室质量及制定相应的管理规范提供依据。方法通过发放调查表收集临床实验室基本情况和15项质量指标信息。调查数据采用Microsoft Excel 2016软件进行整理,采用SPSS 20.0软件进行统计分析。将13项以率表示的质量指标转换为西格玛(σ)度量值进行评价,并与全国质量指标所反映的总体质量水平进行比较。结果实验室间比对率总体水平为3σ,其余指标总体水平均达到最低可接受水平(3σ)。13项以率表示的质量指标σ水平均高于全国同期。急诊检验前标本周转时间(TAT)控制在15～50 min,常规检验前标本TAT为70～80 min;实验室内平均标本TAT免疫专业最长,分别为常规检验492 min和急诊检验223 min。结论室内质控项目开展率、实验室间比对率等指标有待改进。临床实验室应加强信息化建设,提升实验室信息系统(LIS)性能,保障数据采集的简便性和可靠性。     

儿童急性淋巴细胞白血病患者肝癌缺失基因1启动子的异常甲基化

目的 分别采用甲基化特异性PCR(MSP)检测儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)患者肝癌缺失基因1(deleted in liver cancer-1,DLC-1)启动子的甲基化水平,探讨DLC-1启动子甲基化用于判断儿童ALL预后的临床价值.方法 选择34例ALL患者骨髓,5例正常骨髓和T淋巴细胞白血病细胞系6T-CEM,分别采用MSP和焦磷酸测序法检测DLC-1启动子甲基化,并采用荧光定量PCR检测5-aza-2'-deoxycytidine处理6T-CEM细胞前后DLC-1的表达.结果 经MSP检测,21例ALL患者骨髓中存在DLC-1甲基化,而在正常骨髓中未发现该基因甲基化.采用焦磷酸测序法检测的结果与MSP法完全一致,而焦磷酸测序法能对DLC-1启动子上的CG位点甲基化进行定量,DLC-1基因的甲基化与年龄、性别、WBC计数、FAB分类、免疫学分型、临床分型等临床病理学参数无显著相关性(P＞0.05).DLC-1基因甲基化阳性的18例获得完全缓解的ALL患者中有14例在12个月内复发,而甲基化阴性的12例获得完全缓解的ALL患者仅4例复发.采用5-aza-2'-deoxycytidine在体外处理DLC-1甲基化细胞6T-CET后,可使DLC-1恢复表达,且呈剂量依赖性.结论 从儿童ALL患者中检测到DLC-1启动子存在高频率的异常甲基化,DLC-1甲基化对预测儿童ALL复发具有一定意义.同时证明焦磷酸测序法是一种敏感、简单,并能对DLC-1启动子甲基化进行定量检测的新方法.     

兔眼结膜上皮标记保留细胞的研究

目的检测兔眼结膜上皮细胞对5’-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)的标记保留情况,为进一步探索结膜上皮干细胞的定位提供依据。方法实验1组为短期标记保留实验,采用一次性兔腹腔注射BrdU50mg/kg,不同时间间隔免疫组织化学法分析兔眼各部位结膜组织BrdU标记保留细胞。实验2组为长期标记保留实验,连续7d每日注射BrdU50mg/kg,观察6周后兔结膜上皮的BrdU标记阳性细胞。结果实验1组于1、3、5、7d,BrdU标记阳性细胞数量的高峰位置从睑皮肤黏膜交界处向穹隆部移行,所有切片的睑皮肤黏膜交界处均可见较多的BrdU标记阳性细胞。实验2组的结膜上皮BrdU标记阳性细胞主要保留在睑皮肤黏膜交界处。结论短期和长期标记保留实验说明兔眼睑皮肤黏膜交界处可能含有兔结膜上皮干细胞。     

食道调搏术257例临床应用体会

食道心房调搏电生理学（Tran sesophageal at rial pacing，TEAP）是20世纪80年代兴起的一项新技术，具有安全、可靠、简便、有效的特点，由于投入少，治疗费用低廉，容易掌握，且能解决很多心血管疑难问题，因此适合在基层医院推广。我院1995年1月～2003年1月对257例患者进行了食道调搏电生理检查及治疗，现报道如下。