真核表达BMP4成熟肽及其对iPS细胞的分化抑制作用(英文)

目的研究BMP4因子在诱导型干细胞(iPS细胞)培养过程中的作用和起作用的相关通路。方法通过RT-PCR的方法从小鼠的胎盘组织中扩增BMP4成熟肽,并且在其N末端连接IgK分泌肽,此融合的片段克隆至pPYCAG载体上。重组质粒pPYCAG-IgK-BMP4转染至293T17细胞中并进行嘌呤霉素的筛选。通过细胞免疫荧光和Western blot方法鉴定出表达BMP4的阳性克隆。为进一步检测上清中BMP4的生物活性,iPS细胞培养于含BMP4因子的细胞培养上清和LIF因子中,连续培养3代,并进一步观察细胞表型、三胚层细胞的分化潜能和多潜能相关基因的表达水平。结果 Smad1被分泌至上清中的BMP4磷酸化。当培养基中含BMP4同时加入LIF因子后,可以有效抑制iPS细胞分化。在此种方法培养3代后,不仅iPS细胞的表型可以有效维持,iPS细胞中多潜能相关的基因表达水平也未受到影响,同时这些iPS细胞仍具有向三个胚层分化的能力。结论 BMP4可高效表达在真核细胞中,有效地使培养iPS细胞保持其多向分化潜能。     

周围神经损伤后细胞凋亡与中药保护作用的实验研究进展

随着现代分子生物学、组织工程学、细胞生物学、基因组学的成熟和普及,以及计算机软件的开发与应用,周围神经损伤的基础研究有了较大的发展,目前普遍认为周围神经损伤引起的神经细胞死亡的主要形式是细胞凋亡。本文就近年来对于周围神经损伤后细胞凋亡与保护的实验研究进展做一综述。     

一种颈椎后纵韧带细胞的原代培养方法

目的建立颈椎后纵韧带成纤维细胞的体外培养方法。方法采用组织块培养法培养小鼠颈椎后纵韧带细胞,行HE染色,光镜及电镜观察;采用免疫细胞化学法对其进行鉴定。结果倒置相差显微镜下观察细胞呈梭形,胞质近中央处有椭圆形胞核,细胞呈放射状、漩涡状等走行形式。HE染色见细胞为长梭形,胞核为淡蓝色,胞质为粉红色。透射电镜下见胞质内有较为丰富的粗面内质网和高尔基体,线粒体呈卵圆形,常染色质丰富,异染色质靠近核膜,有核仁。免疫细胞化学鉴定表达波形蛋白,角蛋白表达为阴性。结论在体外可成功培养出颈椎后纵韧带成纤维细胞,第3-5代体外培养细胞是细胞实验的最佳选择。     

乳腺癌多周期化疗累积毒性致周围神经病变的案例分析

药物累积毒性是用药剂量过大或用药时间过长,在体内蓄积而逐渐发生的毒性反应,可损害肝、肾、神经、内分泌等器官功能,对患者的危害较大,影响治疗结局。肿瘤患者治疗疗程较长,多药序贯治疗易导致累积毒性反应。周围神经病变是其毒性反应的一种,发生后需停止相关药物,但周围神经病变仍可能继续恶化,这一过程被称为“滑行”现象。鉴于这一现象的危害性,应对药物所致周围神经病变进行关注。本文对乳腺癌术后（Ⅳ期）多周期化疗累积毒性致周围神经病变的病例进行分析总结,建议临床建立周围神经病变用药风险评估体系,采取防治措施。     

中药能量包在60例四肢骨折患者围手术期胃肠道管理中的应用

目的 探讨中药能量包在四肢骨折患者围手术期胃肠道管理中的应用效果。方法 选取2021年3月—2022年3月在厦门市中医院骨二科接受四肢骨折手术患者120例,采用随机数字表法分为观察组与对照组各60例,对照组术前予以常规禁食禁水,观察组在术前晚上22:00、次日术前6 h、术后6 h经少量饮水无不适后口服中药能量包各1次,比较2组术前0.5 h、术后2、6 h口渴、饥饿、恶心、呕吐发生率和术前24 h、术前0.5 h、术后6 h焦虑自评量表（SAS）评分以及出院时围手术期胃肠道管理满意率。结果 观察组术前0.5 h和术后2 h、6 h口渴、饥饿、恶心、呕吐发生率均低于对照组及术前24 h观察组（P<0.05）;术前24 h 2组SAS评分比较差异无统计学意义（P>0.05）,术前0.5 h和术后6 h观察组SAS评分显著低于对照组及术前24 h观察组（P<0.05）;观察组围手术期胃肠道管理满意率为95.00%,明显高于对照组的35.00%(P<0.05)。结论 四肢骨折手术患者围手术期口服中药能量包,可显著改善患者因为较长时间的禁食禁饮出现的口渴、饥饿、恶心、呕...     

活血定眩丸的毒理学研究

目的观察动物口服活血定眩丸的急性毒性和长期毒性反应。方法以最大浓度、最大体积的活血定眩丸灌服小鼠，测定1日最大给药量。以高、中、低3个剂量的活血定眩丸灌服大鼠连续6周，观察大鼠的生长发育、血液学、血液生化学、脏器系数、组织病理学变化及停药后2周上述指标的变化。结果小鼠2次／d灌服活血定眩丸的最大给药〉148、8g生药／kg体重，此剂量相当于临床成人每日口服剂量0．2242g生药／kg体重的663倍。长期毒性实验显示，大鼠摄食量、活动、体重、血液学、生化指标检查、脏器重量系数、病理学检查均未见明显异常，与对照组相比均无明显差异。结论活血定眩丸的急性毒性和长期毒性实验均未见有明显毒性反应。     

中医药治疗椎动脉型颈椎病作用机理的研究进展

中医药疗法是椎动脉型颈椎病非手术治疗的重要手段之一，应用广泛，疗效肯定。近年来，对其机理研究的开展，不仅丰富了人们对颈椎病的认识，同时。也促进了椎动脉型颈椎病中医药治疗的临床实践。下面仅就中医药治疗椎动脉型颈椎病作用机理的进展情况综述如下。     

益气化瘀方联合干细胞移植促进脊髓损伤修复的实验研究※

目的:观察益气化瘀方联合过表达Mash-1修饰的胚胎干细胞对小鼠脊髓损伤的修复作用。方法:采用钳夹法建立小鼠急性脊髓损伤模型,于造模后第3天将Mash-1修饰的胚胎干细胞移植到脊髓损伤部位,并给予益气化瘀方干预。通过观察小鼠的后肢功能评分、脊髓的剩余面积以及神经营养因子、炎症因子和凋亡相关基因的表达改变;并采用免疫荧光检测OCT3/4、nestin、β-tubulin Ⅲ、GFAP的阳性细胞数目,分析移植细胞在体内的存活和分化情况。结果:与模型组比较,益气化瘀方可减少炎症因子TNF-α和凋亡基因caspase-3的表达,轻微提高小鼠运动功能。与单纯干细胞移植组比较,益气化瘀方联合Mash-1修饰胚胎干细胞移植能减少炎症因子TNF-α的基因表达水平,提高移植细胞的存活数量,进而改善小鼠的后肢运动评分。结论:益气化瘀方能减轻脊髓损伤的炎症反应,增加移植细胞在脊髓损伤部位的存活数量,促进脊髓损伤的修复。     

扶正固本法抑制乳腺癌骨破坏的作用及机制研究※

目的:探讨扶正固本法对乳腺癌骨转移后骨破坏的抑制作用及可能的分子机制。方法:通过胫骨内注射乳腺癌细胞建立乳腺癌骨转移动物模型,给予扶正固本方药干预,给药后采用IVIS检测乳腺癌在骨环境中的生长情况,X-ray和TRAP染色分析骨破坏及破骨细胞活性情况,并采用ELISA检测小鼠血清中的TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17、PTHrP、RANKL、OPG、TGF-β、IGF、PDGF细胞因子的表达改变。结果:IVIS结果显示扶正固本方药可减缓乳腺癌在骨环境中的生长,X-ray和TRAP染色表明扶正固本方药可以减少乳腺癌骨转移引起的骨破坏及破骨细胞活性,ELISA结果显示扶正固本方药可以降低血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17、PTHrP、RANKL、TGF-β、IGF、PDGF的表达水平,提高血清中OPG的表达水平。结论:扶正固本方药可通过调节多种细胞因子的表达,从而减缓乳腺癌细胞在骨环境中的生长,以及减轻乳腺癌细胞所引起的骨破坏。