玛咖提取物对小鼠毒性及免疫器官的影响

目的 探讨玛咖提取物对小鼠毒性及免疫器官的影响。方法 给予BALB/c小鼠玛咖提取物15 d,观察玛咖对小鼠的毒性作用,称量胸腺和脾重量。结果24 h内小鼠口服累计剂量为320 g/(kg·bw),未见动物出现任何毒性反应。给予玛咖提取物16.0、32.0、64.0 g/(kg·bw)15 d,胸腺重量比对照组分别增加了36.84%、89.47%、107.89%,脾脏重量分别增加了44.83%、62.01%、89.66%,小鼠碳粒廓清指数分别增加了30.85%、42.55%、54.79%,血清溶血素值分别增加了11.64%、20.03%、31.51%,与对照组相比,差异有显著性(P<0.05~0.01)。结论 玛咖提取物具有增加免疫器官重量和提高免疫功能的作用,且毒性较低。     

玛咖提取物对小鼠毒性及免疫器官影响的实验研究

目的 探讨玛咖提取物对小鼠毒性及免疫器官的影响。方法 给予BALB/c小鼠玛咖提取物15 d,观察玛咖对小鼠的毒性作用,称量胸腺和脾脏重量。 结果 在24h内小鼠口服累计剂量为320g/Kg体重,未见动物出现任何毒性反应。给予玛咖提取物16.0g/Kg、32.0g/Kg、64.0g/Kg 15 d,胸腺重量比对照组分别增加了36.84%、89.47%、107.89%,脾脏重量分别增加了44.83%、62.01%、89.66%,小鼠碳粒廓清指数分别增加了30.85%、42.55%、54.79%,血清溶血素值分别增加了11.64%、20.03%、31.51%,与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05～0.01)。结论 玛咖提取物具有增加免疫器官重量和提高免疫功能的作用. 且毒性较低。     

十二碳烯酸对人乳腺癌细胞株BT-20环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷水平的影响

目的观察十二碳烯酸对人乳腺癌细胞株BT-20增殖及其环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)水平的影响。方法选用甘肃地产猫儿眼(Euphorbia kansui L.),经提取分离制得十二碳烯酸。人乳腺癌细胞株BT-20传代培养后,分别给予0.2、0.6、1.8 mg/L 3个浓度的十二碳烯酸培养48 h作为实验1、2、3组;每孔加5-Fu(10 mg/L,PBS液配制)20μl培养48 h作为5-Fu组;加等量PBS液培养48 h作为空白对照组。用MTT法检测各组细胞的增殖抑制率,用放射免疫法检测各组细胞的cAMP、cGMP含量,观察十二碳烯酸对人BT-20细胞cAMP、cGMP水平的影响。结果经给予不同液体培养48 h后,与对照组(细胞增殖抑制率为0)比较,实验1、2、3组和5-Fu组人乳腺癌细胞株BT-20的增殖抑制率分别为57.15%、75.87%、88.78%和81.73%(P均<0.01);c AMP含量分别增加了13.23%、25.96%、47.59%和34.39%(P均<0.01);cGMP含量分别降低了12.59%、19.29%、33.49%和22.47%(P<0.05,P<0.01);c AMP/c GMP比值分别增加了29.32%、55.77%、121.55%和72.59%(P<0.05,P<0.01)。结论十二碳烯酸具有抑制人乳腺癌细胞株BT-20增殖和升高c AMP/c GMP比值的作用。     

低频电刺激对中国树鼩死亡后脏器中激素水平影响

目的 探索低频电刺激对中国树鼩死亡后脏器中激素水平的影响。方法 给予中国树鼩低频电刺激，分别于死亡后0 h、3 h、6 h、12 h、18 h、24 h、36 h和72 h取甲状腺、肝脏、脾脏，用放射免疫法测定内皮素(endothelin,ET)、心钠素（atrial natriuretic factor，ANF）、血栓素(thromboxane ,TX)水平；剥取死后0 h中国树鼩中脑腹侧背盖区 (ventral tegmental area，VTA)检测c-fos表达。结果 电刺激后，中国树鼩尸体脏器中内皮素、心钠素、血栓素水平比对照组显著升高,其含量随死亡后时间的延长而降低，且呈现一定的趋势；VTA c-fos表达明显增强。结论 低频电刺激能引起中国树鼩脏器中激素的合成、释放和脑组织c-fos表达。     

脉冲电磁场对大鼠椎间盘退变及A2A腺苷受体介导的活性氧/PI3K/Akt信号通路的影响

目的 观察脉冲电磁场（PEMF）对椎间盘退行性病变（IDD）大鼠髓核A2A腺苷受体（A2AR）的调控效应,并探讨其对A2AR介导的活性氧（ROS）/PI3K/Akt信号通路的影响。 方法 采用随机数字表法将50只SD大鼠分为对照组、椎间盘退行性病变组（简称模型组）、A2AR激动剂CGS-21680治疗组（简称激动剂组）、PEMF组和PEMF联合CGS-21680治疗组（简称观察组）。除对照组外,其余各组大鼠均制成IDD动物模型。制模后激动剂组向L5-6椎间盘组织注射100 μl CGS-21680,PEMF组给予PEMF干预,观察组注射CGS-21680后再给予PEMF干预,PEMF干预时间为14 d。培养大鼠原代髓核细胞,将其分为对照组、IL-1β模型组(简称IL-1β组)、激动剂组、PEMF组和观察组,各组细胞干预方法同上。于制模8周后采用HE染色评估各组大鼠椎间盘组织病理形态变化,采用TUNEL染色评估髓核细胞凋亡情况,采用免疫组化/免疫荧光法测定8-OHDG表达,采用ELISA试剂盒等检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及ROS含量,采用Western blot技术检测A2AR、PI3K、AKT及p-AKT蛋白水平。 结果 模型组大鼠髓核细胞明显皱缩、坏死,纤维环断裂;观察组纤维环完整,髓核结构基本趋于正常。激动剂组、PEMF组及观察组SOD水平及A2AR、PI3K、p-AKT、AKT蛋白含量均较模型组明显升高,MDA、ROS及8-OHDG表达均显著降低（P＜0.05）;并且观察组ROS水平亦显著低于激动剂组及PEMF组（P＜0.05）,p-AKT磷酸化水平则显著高于激动剂组及PEMF组（P＜0.05）。细胞实验结果显示,激动剂组、PEMF组及观察组髓核细胞SOD水平、A2AR、PI3K、p-AKT、AKT蛋白含量均显著高于IL-1β组,MDA、ROS及8-OHDG水平均明显降低（P＜0.05）;并且观察组ROS表达亦显著低于激动剂组和PEMF组（P＜0.05）,A2AR蛋白含量及p-AKT磷酸化水平则明显高于激动剂组及PEMF组（P＜0.05）。激动剂组、PEMF组及观察组髓核细胞Bax水平均较IL-1β组显著降低,Bcl-2表达则明显升高（P＜0.05）,并且观察组细胞凋亡率亦显著低于激动剂组和PEMF组,Bcl-2表达则显著高于激动剂组及PEMF组（P＜0.05）。 结论 PEMF可通过上调A2AR活性,减少ROS生成,从而发挥抗氧化应激作用;联合A2AR激动剂能进一步激活PI3K/Akt磷酸化,下调促凋亡蛋白Bax水平,上调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,从而抑制髓核细胞凋亡,减缓IDD恶性进展。     

腺苷受体2A调控神经肽Y抑制髓核细胞凋亡及基质降解的机制研究

目的探索腺苷受体2A(A2AR)调控神经肽Y(NPY)的机制及其在椎间盘退行性病变中对髓核细胞凋亡和细胞外基质的影响。方法采用随机数字表分组法将30只雄性SD大鼠分为5组, 每组6只。S组为对照组, 即穿刺大鼠L5～6椎间盘后注射生理盐水;M组为模型组, 即通过椎间盘穿刺联合椎间盘内注射肿瘤坏死因子α构建大鼠椎间盘退变模型;A2AR-小干扰RNA(siRNA)组、NC-siRNA组和CGS-21680组则为构建椎间盘退变模型基础上分别向椎间盘内注射A2AR的siRNA、阴性对照(NC) siRNA和A2AR激动剂CGS-21680。采用蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应检测A2AR、NPY、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)、蛋白激酶A(PKA)和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)等蛋白在椎间盘中的表达。组间比较采用单因素方差分析。结果在M组中, A2AR(1.72±0.50比0.95±0.18, F=11.49, P>0.05)、NPY(0.40±0.03比0.20±0.04, F=22.08, P<0.05)和bax(0.62±...     

低频电刺激对不同动物血内激素水平的影响

目的 探索低频电刺激对不同动物血激素水平的影响。方法 分别给予中国树鼩、Wistar大鼠、BALB/c小鼠低频电刺激后,分别在12h、24h、36h各取一组动物采血,用放射免疫法检测去甲肾上腺素（noradrenaline,NA）、内皮素(endothelin,ET)水平。结果 给予中国树鼩、Wistar大鼠、BALB/c小鼠低频电刺激后12h、24h、36h, NA、ET水平比对照组显著升高（P<0.01）,给予利血平后24 h,再给予相同电刺激,NA、ET水平比单纯电刺激组明显降低（P<0.05～0.01）;不同动物对同一刺激的应激敏感程度不同,依次为中国树鼩>Wistar大鼠>BALB/c小鼠。结论 低频电刺激能促进中国树鼩、Wistar大鼠、BALB/c小鼠NA、ET释放,利血平具有降低机体对低频电刺激的应激作用。     

玛咖提取物对体育运动的抗疲劳作用

目的 探讨玛咖提取物对体育运动的抗疲劳作用。方法 50只雄性Wistar大鼠随机分为,①对照组：正常饲养,不游泳,灌胃等量蒸馏水;②单纯游泳组：游泳,灌胃等量蒸馏水;③游泳+给药组：游泳,并分别灌胃玛咖提取物4.0、8.0和16.0 g/（kg·bw）。每组10只动物。采用循环水流自由游泳,给予大鼠4.0、8.0和16.0 g/（kg·bw）玛咖提取物,连续给药15 d,第16天采样测定肝过氧化脂质（LPO）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和肝糖元水平。结果 与单纯游泳组动物比较,给予玛咖提取物4.0、8.0和16.0 g/（kg·bw）15 d后,大鼠下沉次数分别减少了27.44%、42.86%、64.11%（P<0.01）,下沉前游泳时间和游泳总时间分别延长了18.99%、64.46%、90.69%和37.12%、56.23%、94.72%（P<0.01）,LPO水平分别降低了31.31%、42.00%、56.95%（P<0.01）,SOD、GSH-Px和肝糖原水平分别升高了25.92%,31.82%、62.09%,12.33%,23.01%、46.36%和17.83%、44.69%、62.99%（P<0.01）。结论 玛咖提取物具有降低肝LPO水平,增加肝糖原水平,提高SOD、GSH-Px活性,增强运动耐力和抗疲劳作用。     

苯污染对大鼠肝肾功能及血核苷酸水平的影响

目的 探索苯对Wistar大鼠肝肾功能及血核苷酸水平的影响。方法 给予Wistar大鼠不同浓度苯21 d，用全自动生化仪检测血液不同成分的水平，用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测血液中环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）和热休克蛋白-70（HSP-70）的水平。结果 给予Wistar大鼠不同苯剂量0.19、0.38、0.76 g/（kg·bw），连续21 d，动物血浆中总胆红素水平比对照组升高了134.40%、173.63%、254.75%，谷草转氨酶升高了70.76%、85.44%、106.61%，肌酐升高了24.54%、67.46%、84.50%，肌酸激酶升高了151.35%、180.85%、245.54%，尿素[0.38、0.76 g/（kg·bw）组]升高了0.48%、23.43%；丙氨酸转移酶水平超过了检测值上限，均为1185.60%；cAMP水平比对照组升高了41.84%、264.02%、314.23%，cGMP升高了31.29%、40.46%、272.14%，HSP-70升高了82.11%、187.37%、1484.21%；淀粉酶水平比对照组分别降低了62.03%、63.66%、64.45%。结论 苯污染使血液中cAMP和cGMP比值发生变化，引起新陈代谢的紊乱，导致肝肾功能损伤或病变。     

脉冲电磁场对椎间盘退行性病变大鼠A2A腺苷受体及p38 MAPK信号通路的影响

目的 观察脉冲电磁场（PEMF）对椎间盘退行性病变（IDD）大鼠A2A腺苷受体（A2AR）及p38 MAPK信号通路的影响。 方法 采用随机数字表法将40只SD大鼠分为对照组、IDD模型组（简称模型组）、PEMF组和PEMF联合CGS-21680治疗组（简称观察组）。将模型组、PEMF组及观察组大鼠制成IDD动物模型，PEMF组于制模后给予PEMF干预，观察组则给予PEMF干预并注射A2AR激动剂CGS-21680。于造模8周后采用番红O-快绿染色评估各组大鼠椎间盘病理改变，同时检测各组大鼠椎间盘A2AR、环磷酸腺苷（cAMP）、蛋白激酶A(PKA)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）、Ⅱ型胶原（Col-Ⅱ）、基质金属蛋白酶-3（MMP3）表达水平。 结果 模型组大鼠髓核组织皱缩，纤维成分及软骨细胞增多，观察组大鼠髓核形态基本趋于正常，纤维环完整无破裂。模型组椎间盘组织A2AR蛋白表达及mRNA水平均高于对照组，观察组A2AR蛋白表达及mRNA水平均显著高于其他各组（P<0.05）。PEMF组和观察组椎间盘cAMP含量及PKA mRNA表达均较模型组增高，且观察组与模型组间差异具有统计学意义（P<0.05）。模型组大鼠椎间盘p38 MAPK、p-p38 MAPK含量及p-p38 MAPK/p38 MAPK比值均显著高于对照组（P<0.05），PEMF组和观察组p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白含量及p-p38 MAPK/p38 MAPK比值均有不同程度降低，且观察组上述指标数值均显著低于模型组（P<0.05），p-p38 MAPK蛋白含量及p-p38 MAPK/p38 MAPK比值亦显著低于PEMF组（P<0.05）。模型组大鼠Caspase-3蛋白含量及mRNA表达均显著高于对照组，PEMF组及观察组上述指标含量均较模型组明显降低（P<0.05）。模型组大鼠MMP3含量较对照组显著升高，Col-Ⅱ含量则明显下降；PEMF组、观察组MMP3含量均较模型组降低，Col-Ⅱ表达均较模型组增高，并且观察组上述指标含量与模型组间差异均具有统计学意义（P<0.05）。 结论 炎性因子刺激能活化p38 MAPK信号通路并诱导细胞凋亡，这也是促进IDD大鼠病变的重要原因之一。PEMF联合A2AR激动剂干预能激活A2AR/cAMP/PKA信号通路，进而抑制p38 MAPK磷酸化，减少髓核细胞凋亡，缓解IDD损伤。