支气管哮喘患者T淋巴细胞的细胞周期分布及周期调节蛋白表达的意义

目的通过检测T淋巴细胞的细胞周期分布及其细胞周期调节蛋白(CCRP)的表达,探讨发作期支气管哮喘(简称哮喘)患者T淋巴细胞过度活化、增殖的调控机制.方法采用碘化丙啶DNA染色法应用流式细胞仪分析30例发作期哮喘患者(哮喘组)及20名正常人(正常组)外周血T淋巴细胞的细胞周期分布;采用间接免疫荧光法,应用流式细胞仪同步测定相应T淋巴细胞内CCRP、依赖激酶抑制蛋白(P27kipl)、细胞周期蛋白E(cyclin E)、cyclin A、cyclin B的表达水平.比较哮喘患者和正常人上述指标的差异.结果哮喘组S期、S+G2/M期的T淋巴细胞百分率分别为(18±9)%和(25±10)%,对照组分别为(5±4)%、(11±6)%, 两组比较差异有显著性(P均<0.01);哮喘组G0/G1期的T淋巴细胞百分率为(76±10)%,对照组为(90±6)%,两组比较差异有显著性(P<0.01).哮喘组T淋巴细胞内P27kipl的表达水平为 (4.0±2.4)%,对照组为(6.7±4.8)%,两组比较差异有显著性(P<0.05);哮喘组cyclin E、cyclin A、cyclin B的表达水平分别为(25±24)%、(9±7)%、(6.4±5.9)%,对照组分别为(6±5)%、(4±4)%、(3.4±1.6)%,两组比较差异均有显著性(P均<0.01).结论 T淋巴细胞内CCRP异常表达与发作期哮喘患者T淋巴细胞过度活化、增殖有关,将CCRP作为调控靶点,可望成为治疗哮喘的新途径.     

肺表面活性物质对哮喘T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响

目的 观察肺表面活性物质(PS)对发作期哮喘患者T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响,揭示PS对CD4+、CD8+T细胞增殖周期的具体作用机制及其在哮喘治疗中的意义.方法 利用细胞培养技术,通过体外PS干预,流式细胞仪测定经PS干预和未经PS干预的CD4+、CD8+T细胞的细胞周期分布和CD4+、CD8+T细胞内细胞周期调节蛋白p27kipl、cyclinE、cyclinA、cyclinB的表达水平.结果 哮喘患者CD4+、CD8+T细胞分别与PS体外共同培养后,加PS组的S期、G2/M期的CD4+T比例显著低于对照组(P＜0.01);G0/G1期的CD4+T细胞比例显著高于对照组(P＜0.01).加PS组的S期CD8+T比例显著低于对照组(P＜0.01);G2期的CD8+T细胞比例略低于对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05);G0/G1期的CD8+T细胞比例高于对照组(P＜0.05).CD4+T细胞内p27kipl的表达水平高于对照组(P＜0.05);CD4+T细胞内cyclinE表达水平显著低于对照组(P＜0.01);CD4+T细胞内cyclinA、cyclinB的表达水平低于对照组(P＜0.05).CD8+T细胞内p27kipl的表达水平高于对照组(P＜0.05);CD8+T细胞内cyclinE、cyclinA表达水平低于对照组(P＜0.01);CD8T细胞内cyclinB的表达水平与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PS通过抑制CD4+T细胞的正性细胞周期调节蛋白cyclinE、cyclinA、cyclinB的表达和上调其负性细胞周期调节蛋白p27kipl的表达,抑制CD4+T细胞的DNA合成和细胞分裂,进而抑制CD4+T细胞增殖;通过下调CD8+T细胞内cyclinE、cyclinA的表达,上调p27kippl的表达,抑制CD8+T细胞DNA合成.

Abstract：

Objective The aim of this study was to observe the effect of pulmonary surfactant (PS)on the cell cycle distribution and expression of cell cycle regulatory proteins in T lymphocyte subsets in patients with asthma attack and evaluate the molecular regulatory mechanism of PS on T lymphocyte subsets cell proliferation cycle during asthma attack and its therapy significance. Methods The CD4+、CD8+ T lymphocytes obtained from peripheral blood of 30 patients with asthma attack were incubated with PS,the cell cycle and the expression of p27kipl , CyclinE, CyclinA, CyclinB in CD4+ , CD8+ T lymphocytes with PS and without PS were anasyzed by flow cytometry. Results CD4 + T lymphocytes with PS progressed into S phase and G2/M phase were significantly lower than those without PS( P ＜0.01). But remained in G0/G1 phase were significantly higher than those without PS (P ＜ 0.01). CD8+ T lymphocytes with PS progressed into S phase were significantly lower than those without PS( P ＜0.01),G2/M phase were little lower than those without PS( P ＞ 0.05), Go/G1 phase were higher than those without PS( P ＜0.05). The expression of p27kipl in CD4+T lymphocytes with PS was higher than that without PS( P ＜0.05). The expression of cyclinE in CD4+ T lymphocytes with PS was significantly lower than that without PS( P ＜0.01 ). The expression of cyclinA,cyclinB in CD4+ T lymphocytes with PS were lower than those without PS( P ＜0.05). The expression of p27kipl in CD8+ T lymphocytes with PS was higher than that without PS( P ＜0.05). The expression of cyclinE and cyclinA in CD8+ T lymphocytes with PS were significantly lower than that without PS( P ＜0. 01). The expression of cyclinB in CD8+ T lymphocytes with PS was little lower than that without PS( P ＞0.05). Conclusions During asthma attack,PS can inhibit the DNA synthesis, cell division and proliferation of CD4+T lymphocytes by inhibiting positive cell cycle regulatory proteins cyclinE, cyclinA, cyclinB expression and increasing negative cell cycle regulatory protein p27kipl expression in CD4+ T lymphocytes. PS can inhibit the DNA synthesis of CD8+ T lymphocytes by inhibiting positive cell cycle regulatory proteins cyclinE, cyclinA,expression and increasing negative cell cycle regulatory protein p27kipl expression in CD8+ T lymphocytes.     

低能量氦氖激光血管内照射对缺血再灌注心肌超微结构的影响

目的:探讨低能量氦氖激光血管内照射(ILIB)对缺血再灌注心肌组织超微结构的影响。方法:通过结扎冠状动脉阻断冠状动脉血流,复制家兔急性心肌缺血-再灌注损伤动物模型。将家兔随机分为4组:假手术组、心肌缺血30min组、缺血30min再灌注30min组、缺血30min再灌注30min+ILIB组。在透射电镜下观察各组心肌超微结构的变化。结果:假手术组心肌纤维呈阶段性收缩、间质水肿、线粒体轻度肿胀、间质可见闭塞的毛细血管;心肌缺血组心肌纤维排列紊乱、肌浆水肿、线粒体水肿、血管扩张、血管结构破坏、血管内可见白细胞镶嵌;缺血再灌注组心肌纤维排列相对整齐、线粒体水肿不明显、肌浆水肿较轻、心肌间质可见轻度毛细血管扩张淤血;缺血再灌注+ILIB组心肌纤维排列整齐、线粒体无肿胀、间质毛细血管内可见红细胞、无毛细血管内白细胞镶嵌现象、毛细血管管腔通畅、血管壁较完整。结论:IL-IB可使缺血再灌注心肌超微结构基本恢复正常,对心肌有保护作用。     

特发性肺纤维化11例临床分析

目的：探讨特发性肺纤维化（IPF）患者临床特点、治疗和转归。方法：结合复习文献资料，总结分析11例IPF患者的临床表现、辅助检查及治疗转归。结果：IPF患者以进行性呼吸困难、干咳、杵状指及Velcro罗音为突出表现，高分辨率CT对诊断IPF具有特殊价值，经纤维支气管镜肺活检是确诊IPF的主要手段和最好依据，目前治疗IPF的药物仍以糖皮质激素和免疫抑制剂为主。结论：目前本病的发病机制仍不明确，临床误诊误治率高，尚无特效疗法，抗纤维化药物成为当今研究肺纤维化治疗的热点。     

肺表面活性物质对哮喘T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响

目的观察肺表面活性物质（PS）对发作期哮喘患者T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响,揭示PS对CD4＋、CD8＋T细胞增殖周期的具体作用机制及其在哮喘治疗中的意义。方法利用细胞培养技术,通过体外PS干预,流式细胞仪测定经PS干预和未经PS干预的CD4＋、CD8＋T细胞的细胞周期分布和CD4＋、CD8＋T细胞内细胞周期调节蛋白p27kip1、cyclinE、cyclinA、cyclinB的表达水平。结果哮喘患者CD4＋、CD8＋T细胞分别与PS体外共同培养后,加PS组的S期、G2/M期的CD4＋T比例显著低于对照组（P〈0.01）;G0/G1期的CD4＋T细胞比例显著高于对照组（P〈0.01）。加PS组的S期CD8＋T比例显著低于对照组（P〈0.01）;G2期的CD8＋T细胞比例略低于对照组,但差异无统计学意义（P〉0.05）;G0/G1期的CD8＋T细胞比例高于对照组（P〈0.05）。CD4＋T细胞内p27kip1的表达水平高于对照组（P〈0.05）;CD4＋T细胞内cyclinE表达水平显著低于对照组（P〈0.01）;CD4＋T细胞内cyclinA、cyclinB的表达水平低于对照组（P〈0.05）。CD8＋T细胞内p27kip1的表达水平高于对照组（P〈0.05）;CD8＋T细胞内cyclinE、cyclinA表达水平低于对照组（P〈0.01）;CD8＋T细胞内cyclinB的表达水平与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 PS通过抑制CD4＋T细胞的正性细胞周期调节蛋白cyclinE、cyclinA、cyclinB的表达和上调其负性细胞周期调节蛋白p27kip1的表达,抑制CD4＋T细胞的DNA合成和细胞分裂,进而抑制CD4＋T细胞增殖;通过下调CD8＋T细胞内cyclinE、cyclinA的表达,上调p27kip1的表达,抑制CD8＋T细胞DNA合成。     

慢性阻塞性肺疾病血栓前状态相关指标及意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者血栓前状态相关指标含量变化及意义。方法选取我科2008年1月-2010年12月期间诊治的125例COPD患者及80例健康体检志愿者作为研究对象,其中65例急性期COPD患者为A组,60例稳定期患者为B组,80例健康体检志愿者为C组,采用酶联免疫吸附双抗体夹心法（ELISA）分别测定三组研究对象血栓前状态重要标志物血清s-Es及D-二聚体水平,观察并比较三组研究对象两项指标血清水平。结果 A组患者两项指标显著高于B组患者和C组健康人群（P〈0.05）,B组患者两项指标显著高于C组健康人群,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论慢性肺阻塞肺疾病血栓前状态的重要标志物D-二聚体及s-Es在患者体内高度表达,且疾病越严重,其血清水平越高,因此,测定三项指标血清水平可作为判断患者血栓前状态严重程度的可靠指标。     

慢性阻塞性肺疾病患者运动耐力下降的生理学研究

目的研究平板踏车联合无创正压通气（NIPPV）运动锻炼对COPD患者呼吸生理学的影响,探讨与运动耐力改善相关的生理学机制,期望为COPD患者呼吸康复提供新的更为有效的方法。方法按2011年修订版GOLD标准选择稳定期重度至极重度COPD患者为研究对象,分为3组：即平板踏车联合NIPPV运动锻炼组（A组）、平板踏车运动锻炼组（B组）、既无NIPPV又无平板踏车运动锻炼组（C组）,每组观测20例。在运动锻炼前后分别测定6MWD、MRC评分、MEP、MIP及肺通气功能。结果经平板踏车联合NIPPV运动锻炼后COPD患者6MWD、MEP、MIP明显增加（P〈0．01）,MRC评分明显降低（P〈0．01）,肺功能FEV1％pred、FEV1／FVC、MVV、PEF等指标稍有改善,但锻炼前后差异无统计学意义（P〉0．05）;而MVV则有明显改善（P〈0．01）,差异具有统计学意义。结论重度至极重度稳定期COPD患者在平板踏车上进行面罩NIPPV运动锻炼有助于改善其运动耐力和吸气肌力,缓解呼吸困难,是一种较好的适合于重度至极重度稳定期cOPD患者的呼吸康复锻炼方法。     

发作期哮喘患者T细胞亚群的变化及其与肺功能的关系

目的 :探讨发作期哮喘患者外周血T细胞亚群的变化及与肺功能的关系 .方法 :采用直接免疫荧光法 ,应用流式细胞仪 ,检测 34例急性发作期哮喘患者及 2 1例健康人外周血CD+ 3 T ,CD+ 4 T ,CD+ 8T细胞的百分率及CD+ 4 /CD+ 8的比值 ,同时测定 2 4例哮喘发作期患者FVC ,FEV1,FEV1/FVC ,FEF 2 5 %～ 75 % .结果 :发作期哮喘患者外周血CD+ 4 T显著高于对照组 (P <0 0 5 ) ;CD+ 8T细胞著性低于对照组 (P <0 0 1) ;CD+ 4 T细胞与CD+ 8T细胞的比值显著高于对照组 (P <0 0 1) ;CD+ 3 T细胞与对照组比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) .FVC与CD+ 3 T水平呈负相关 (r =- 0 4 85 ,P <0 0 5 ) ,与CD+ 4 T水平呈负相关 (r =- 0 4 17,P <0 0 5 ) ;FEV1与CD+ 4 T水平呈负相关 (r =- 0 5 12 ,P <0 0 5 ) ,与CD4/CD8比值呈负相关 (r =- 0 5 30 ,P<0 0 1) ;FEF 2 5 %～ 75 %与CD4/CD8比值呈负相关 (r =- 0 5 0 1,P <0 0 5 ) ;FEV1/FVC与CD+ 3 T ,CD+ 4 T ,CD+ 8T及CD4/CD8比值无相关关系 (P >0 0 5 ) .结论 :急性发作期哮喘患者T细胞亚群的变化表明T细胞免疫功能紊乱在哮喘变应性气道炎症中起重要作用 ,且哮喘患者T细胞免疫功能异常与某些呼气流速的肺功能指标有负的相关性     

莫西沙星治疗老年肺炎的临床疗效观察

目的观察莫西沙星对老年肺炎的临床疗效。方法选取82例我科2008年6月～2009年12月诊治的老年肺炎患者,随机分为两组,42例治疗组患者采用莫西沙星治疗,40例对照组患者采用头孢曲松钠联合阿奇霉素治疗,观察比较两组患者临床疗效及不良反应发生情况。结果治疗组总有效率为95.24%,而对照组总有效率仅为82.50%,经比较两组差异显著（P〈0.05）,差异有统计学意义。治疗组患者2例（4.76%）出现药物副反应,对照组8例（20.00%）出现药物副反应,经比较两组差异显著（P〈0.05）,差异有统计学意义。结论莫西沙星抗菌谱广,不良反应轻,且对老年肺炎的常见致病菌抗菌作用强,在老年肺炎的治疗上有一定优势,值得临床相关人员参考和应用。