人端粒酶逆转录启动子驱动的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因治疗裸鼠胰腺移植瘤的安全性研究

目的 探讨人端粒酶逆转录（hTERT）启动子驱动的单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-TK）基因治疗裸鼠胰腺癌的安全性。方法 应用细菌内同源重组法构建hTERT启动子和常规巨细胞病毒（CMV）启动子驱动的HSV-TK基因真核表达载体PDC312-TP—TK，PSU-CMV-TK。制备腺病毒液，检测病毒滴度为1．9×10^10pfu／ml和1．4×10^10pfu／ml。建立裸鼠胰腺癌皮下移植瘤模型，分别以两种方法治疗后观察皮下移植瘤消退、HSV-TK基因表达情况、肝脏苏木素-伊红（HE）染色切片、肝功能。结果 PDC312-TP-TK组与PSU-CMV-TK组对肿瘤的抑瘤率分别为58．3％和65．6％，治疗组间差异无统计学意义（P〉0．05），杀伤方面具有一样的高效性；但其对肝脏的毒副作用远小于PSU-CMV-TK组，PDC312-TP-TK组血清中ALT，AST，ALP分别为（54．00±1．97）、（147．00±12．67）、（33．00±2．59）U／L而PSU-CMV-TK组中为（334．00±9．81）、（511．00±11．24）、（98．00±3．12）。差异有统计学意义（P〈0．01）。裸鼠肝脏苏木素-伊红（HE）染色中，仅PSU-CMV-TK组有肝脏坏死改变。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）中也仅PSU-CMV-TK组检测到1143bp的TK基因片段。结论 hTERT启动子驱动的HSV-TK基因是一种新的靶向治疗方法，在具有治疗高效性的同时，更具有安全性。